| 摘要 | 第11-14页 |
| ABSTRACT | 第14-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第18-36页 |
| 1 脂肪氧合酶的概述 | 第18-22页 |
| 1.1 脂肪氧合酶的来源 | 第18页 |
| 1.2 脂肪氧合酶的催化特性 | 第18-19页 |
| 1.3 脂肪氧合酶的三维结构 | 第19-21页 |
| 1.4 脂肪氧合酶的生产与应用 | 第21-22页 |
| 2 酶蛋白分子热稳定性改良 | 第22-24页 |
| 2.1 非理性设计 | 第22-23页 |
| 2.2 理性设计 | 第23页 |
| 2.3 利用生物信息学辅助热稳定性改造 | 第23-24页 |
| 2.4 脂肪氧合酶分子改造 | 第24页 |
| 3 三苯甲烷类染料脱色 | 第24-26页 |
| 3.1 三苯甲烷类染料简介 | 第24-25页 |
| 3.2 生物降解三苯甲烷类染料 | 第25页 |
| 3.3 LOX用于三苯甲烷类染料脱色 | 第25-26页 |
| 4 本研究的目的意义及内容 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-36页 |
| 第2章 Anabaena sp.PCC 7120脂肪氧合酶定点突变及突变酶酶学性质测定 | 第36-72页 |
| 1 材料 | 第37-38页 |
| 1.1 菌种 | 第37页 |
| 1.2 主要药品和试剂 | 第37页 |
| 1.3 培养基和主要溶液 | 第37-38页 |
| 1.4 主要仪器和设备 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-47页 |
| 2.1 基因工程菌的构建 | 第38-39页 |
| 2.2 重组质粒稳定性检测 | 第39页 |
| 2.3 Ana-LOX热稳定性改造设计 | 第39-40页 |
| 2.4 Ana-LOX基因的定点突变 | 第40-44页 |
| 2.5 突变酶的诱导表达 | 第44-45页 |
| 2.6 突变酶的分离纯化 | 第45页 |
| 2.7 SDS-PAGE电泳分析 | 第45页 |
| 2.8 突变酶活力测定 | 第45-46页 |
| 2.9 突变酶酶学性质测定 | 第46页 |
| 2.10 圆二色谱(CD)分析Ana-LOX二级结构 | 第46-47页 |
| 2.11 荧光光谱分析Ana-LOX表面疏水性 | 第47页 |
| 2.12 热变性分析 | 第47页 |
| 3 结果分析 | 第47-64页 |
| 3.1 重组质粒稳定性检测 | 第47页 |
| 3.2 Ana-LOX同源建模 | 第47-49页 |
| 3.3 Ana-LOX模型质量评估 | 第49-50页 |
| 3.4 Ana-LOX结构分析及突变位点的预测 | 第50-53页 |
| 3.5 定点突变和突变体库构建 | 第53-55页 |
| 3.6 突变酶分离纯化 | 第55页 |
| 3.7 突变酶活力测定 | 第55-56页 |
| 3.8 突变酶酶学性质测定 | 第56-59页 |
| 3.9 圆二色谱(CD)分析Ana-LOX二级结构 | 第59-60页 |
| 3.10 荧光光谱分析Ana-LOX表面疏水性 | 第60-61页 |
| 3.11 热变性分析 | 第61-63页 |
| 3.12 突变酶的三维结构模拟及突变位点分析 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-65页 |
| 5 本章小结 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 第3章 重组鱼腥藻脂肪氧合酶发酵条件优化及其脱色应用 | 第72-94页 |
| 1 材料 | 第73-74页 |
| 1.1 菌种 | 第73页 |
| 1.2 主要药品和试剂 | 第73页 |
| 1.3 培养基和主要溶液 | 第73页 |
| 1.4 主要仪器和设备 | 第73-74页 |
| 2 方法 | 第74-77页 |
| 2.1 Ana-LOX-V421/V40发酵条件优化 | 第74页 |
| 2.2 三苯甲烷类染料脱色研究 | 第74-77页 |
| 3 结果分析 | 第77-89页 |
| 3.1 培养基对Ana-LOX-V421/V40诱导表达的影响 | 第77-78页 |
| 3.2 诱导剂浓度对Ana-LOX-V421/V40诱导表达的影响 | 第78页 |
| 3.3 诱导时机对Ana-LOX-V421/V40诱导表达的影响 | 第78-79页 |
| 3.4 诱导时间对Ana-LOX-V421/V40诱导表达的影响 | 第79-80页 |
| 3.5 发酵条件正交试验 | 第80-81页 |
| 3.6 三苯甲烷类染料脱色研究 | 第81-89页 |
| 4 讨论 | 第89页 |
| 5 本章小结 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-94页 |
| 全文结论 | 第94-96页 |
| 创新点 | 第96-98页 |
| 硕士期间科硏成果 | 第98-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
