中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
一、文献综述 | 第13-22页 |
1 似鲇高原鳅及其疾病研究概况 | 第13-14页 |
1.1 似鲇高原鳅的生物学特性 | 第13页 |
1.2 似鲇高原鳅的疾病概况 | 第13-14页 |
2 鱼类溃疡症的病因 | 第14-18页 |
2.1 传染性溃疡症 | 第14-17页 |
2.1.1 细菌性溃疡症 | 第14页 |
2.1.2 病毒性溃疡症 | 第14-15页 |
2.1.3 寄生虫性溃疡症 | 第15-16页 |
2.1.4 真菌性溃疡症 | 第16-17页 |
2.2 非传染性溃疡症 | 第17-18页 |
2.2.1 由营养不良引起的溃疡症 | 第17页 |
2.2.2 由环境胁迫引起的溃疡症 | 第17-18页 |
3 蛙病毒概述 | 第18-22页 |
3.1 蛙病毒的生物学特性 | 第18页 |
3.2 蛙病毒的分布和宿主范围 | 第18-20页 |
3.2.1 两栖动物源蛙病毒 | 第19页 |
3.2.2 鱼源蛙病毒 | 第19页 |
3.2.3 爬行动物源蛙病毒 | 第19-20页 |
3.3 蛙病毒感染的病理损伤 | 第20页 |
3.4 蛙病毒的诊断与防治 | 第20-22页 |
4 本研究的目的与意义 | 第22页 |
二、实验材料和方法 | 第22-33页 |
1 材料 | 第22-24页 |
1.1 实验动物 | 第22-23页 |
1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
1.3 主要仪器设备 | 第24页 |
2 方法 | 第24-33页 |
2.1 临床症状及显微镜检查 | 第24-25页 |
2.1.1 临床症状及病理剖解观察 | 第24页 |
2.1.2 寄生虫学检查 | 第24页 |
2.1.3 真菌学检查 | 第24页 |
2.1.4 细菌学检查 | 第24-25页 |
2.2 自然感染似鲇高原鳅的病理学检查 | 第25页 |
2.3 病原分离 | 第25-26页 |
2.3.1 细菌分离 | 第25页 |
2.3.2 病毒分离 | 第25-26页 |
2.3.2.1 病料处理 | 第25页 |
2.3.2.2 细胞传代培养 | 第25-26页 |
2.3.2.3 组织悬液接种到EPC单层细胞 | 第26页 |
2.3.2.4 细胞病毒液的制备 | 第26页 |
2.3.2.5 细胞病毒液的扩大培养 | 第26页 |
2.3.2.6 细胞病毒液TCID_(50)的测定 | 第26页 |
2.4 回归试验 | 第26-27页 |
2.5 病毒鉴定 | 第27-30页 |
2.5.1 病毒的形态学观察 | 第27页 |
2.5.2 病毒的理化特性测定 | 第27-29页 |
2.5.2.1 核酸类型 | 第27-28页 |
2.5.2.2 脂溶剂敏感性测定 | 第28页 |
2.5.2.3 耐酸性试验 | 第28页 |
2.5.2.4 耐碱性试验 | 第28页 |
2.5.2.5 胰蛋白酶敏感性试验 | 第28页 |
2.5.2.6 耐热性试验 | 第28-29页 |
2.5.3 病毒的PCR鉴定 | 第29-30页 |
2.5.3.1 引物设计及合成 | 第29页 |
2.5.3.2 病料总DNA的提取 | 第29-30页 |
2.5.3.3 PCR检测及扩增产物鉴定 | 第30页 |
2.6 主要功能基因T-克隆及进化分析 | 第30-33页 |
2.6.1 PCR扩增 | 第31-32页 |
2.6.1.1 引物设计及合成 | 第31页 |
2.6.1.2 病毒总DNA的提取 | 第31页 |
2.6.1.3 PCR扩增体系 | 第31-32页 |
2.6.1.4 PCR扩增条件 | 第32页 |
2.6.2 主要功能基因T-载体克隆与鉴定 | 第32-33页 |
2.6.2.1 目的片段的胶回收 | 第32页 |
2.6.2.2 目的基因与pMD19-T连接 | 第32页 |
2.6.2.3 重组克隆质粒转化感受态细胞DH5α | 第32-33页 |
2.6.2.4 阳性克隆菌的鉴定 | 第33页 |
2.6.3 鳅源蛙病毒进化分析 | 第33页 |
三、实验结果 | 第33-50页 |
1 临床症状及显微镜检查 | 第33-36页 |
2 组织病理学观察 | 第36-39页 |
3 病原分离 | 第39-41页 |
3.1 细菌分离 | 第39-40页 |
3.2 病毒分离 | 第40-41页 |
4 回归试验 | 第41页 |
5 病毒鉴定 | 第41-44页 |
5.1 分离病毒的形态学观察 | 第41-43页 |
5.2 分离病毒的理化性质鉴定 | 第43页 |
5.3 分离病毒的PCR检测 | 第43-44页 |
6 鳅源蛙病毒主要功能基因的克隆及进化分析 | 第44-50页 |
6.1 PCR扩增结果 | 第44-47页 |
6.2 分离病毒进化分析 | 第47-50页 |
四、讨论 | 第50-54页 |
1 溃疡症的病因 | 第50-52页 |
2 蛙病毒感染的病理损伤 | 第52页 |
3 蛙病毒的形态发生学与细胞损伤 | 第52-53页 |
4 蛙病毒的进化分析 | 第53-54页 |
五、结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |