| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-24页 |
| 1.1 蛋白质的合成终止 | 第15页 |
| 1.2 原核生物终止密码子的识别机制 | 第15-16页 |
| 1.3 真核生物eRF1识别终止密码子的机制研究 | 第16-21页 |
| 1.3.1 真核生物第一类肽链释放因子eRF1的结构与功能 | 第16-17页 |
| 1.3.2 密码子变异性 | 第17-18页 |
| 1.3.3 eRF1识别终止密码子机制的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.4 肽链释放的其他影响因素 | 第20-21页 |
| 1.4 八肋游仆虫及赭纤虫的特点 | 第21-22页 |
| 1.4.1 八肋游仆虫 | 第21页 |
| 1.4.2 赭纤虫 | 第21页 |
| 1.4.3 其他纤毛虫 | 第21-22页 |
| 1.5 本课题研究的意义 | 第22-24页 |
| 第二章 纤毛虫第一类肽链释放因子识别终止密码子特异性位点分析 | 第24-44页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 实验材料 | 第24-28页 |
| 2.2.1 实验菌株和质粒 | 第24-25页 |
| 2.2.2 生化试剂与酶 | 第25页 |
| 2.2.3 试剂的配制 | 第25-28页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-33页 |
| 2.3.1 嵌合体Eo/Sc eRF1以及Sc eRF1 N端位点的突变 | 第28-30页 |
| 2.3.2 质粒洗牌技术 | 第30-31页 |
| 2.3.3 双荧光素酶通读效率实验 | 第31-33页 |
| 2.3.4 Western Blotting | 第33页 |
| 2.4 实验结果 | 第33-41页 |
| 2.4.1 嵌合体Eo/Sc eRF1以及Sc eRF1 N端位点的突变 | 第33-37页 |
| 2.4.2 游仆虫eRF1 N端嵌合体Eo/Sc eRF1与Sc eRF1及其突变体支持细胞存活性分析 | 第37-38页 |
| 2.4.3 游仆虫eRF1 N端嵌合体Eo/Sc eRF1与Sc eRF1及其突变体识别终止密码子活性的定量分析 | 第38-40页 |
| 2.4.4 Western blot检测eRF1在酵母细胞中稳定表达 | 第40-41页 |
| 2.5 讨论 | 第41-44页 |
| 第三章 磷酸化对第一类肽链释放因子识别终止密码子性质的影响 | 第44-58页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2 实验材料 | 第44-47页 |
| 3.2.1 实验菌株和质粒 | 第44-45页 |
| 3.2.2 生化试剂 | 第45页 |
| 3.2.3 试剂的配制 | 第45-47页 |
| 3.2.4 实验仪器 | 第47页 |
| 3.3 实验方法 | 第47-49页 |
| 3.3.1 赭纤虫eRF1 N端磷酸化位点的突变 | 第47-49页 |
| 3.3.2 质粒洗牌技术 | 第49页 |
| 3.3.3 双荧光素酶通读效率实验 | 第49页 |
| 3.4 实验结果 | 第49-56页 |
| 3.4.1 赭纤虫eRF1突变质粒的构建 | 第49-52页 |
| 3.4.2 磷酸化位点对Bj eRF1识别终止密码子性质的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.3 删除磷酸化位点对Bj eRF1识别终止密码子效率的影响 | 第53-55页 |
| 3.4.4 引入磷酸化位点对Bj eRF1识别终止密码子效率的影响 | 第55-56页 |
| 3.5 讨论 | 第56-58页 |
| 总结与展望 | 第58-60页 |
| 总结 | 第58-59页 |
| 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 附录 | 第64-65页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 个人简介及联系方式 | 第67-69页 |
