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黄萎病菌致病相关基因VdMsb的功能研究及棉花几丁质相关基因家族的全基因组鉴定与功能分析

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-16页
本文所用主要缩略词第16-17页
第一部分 文献综述第17-35页
 第一章 棉花黄萎病菌及其致病基因的研究进展第17-25页
  1 棉花黄萎病菌的概述第17-20页
   ·棉花黄萎病菌病原菌第17-18页
   ·棉花黄萎病的发病症状及危害第18页
   ·黄萎病菌致病机理第18页
   ·棉花黄萎病菌的侵染过程第18-20页
  2 棉花黄萎病菌致病相关基因的研究进展第20-22页
   ·大丽轮枝菌的全基因组测序第20页
   ·棉花黄萎病菌致病基因的研究进展第20-21页
   ·棉花黄萎病菌微菌核的研究进展第21-22页
  3 真菌MAPK信号通路及Msb基因第22-25页
   ·MAPK信号通路第22-23页
   ·MAPK在植物病原菌中的作用第23页
   ·Msb基因的研究进展第23-25页
 第二章 几丁质相关基因在植物免疫系统中的研究进展第25-34页
  1 植物免疫系统概述第25-26页
  2 植物与病原菌的互作机理第26-28页
   ·植物对病原相关分子模式的识别第26-27页
   ·植物对病原菌效应因子的识别第27-28页
  3 LysM基因的研究进展第28-31页
   ·LysM结构域概述第28页
   ·植物中LysM基因的结构特征及分类第28-29页
   ·LysM基因在植物抗病中的作用第29-31页
  4 几丁质酶基因的研究进展第31-34页
   ·几丁质酶基因的结构特征及分类第31-32页
   ·几丁质酶在植物抗病中的作用第32-33页
   ·棉花中几丁质酶基因的研究进展第33-34页
 本研究的目的与意义第34-35页
第二部分 研究报告第35-113页
 第三章 黄萎病菌致病相关基因Msb的克隆及功能研究第35-67页
  1 材料与方法第36-52页
   ·黄萎病菌菌株和培养条件第36页
   ·细菌菌株和质粒第36页
   ·培养基第36-38页
   ·序列分析第38-39页
   ·真菌DNA的提取第39-40页
   ·基因组序列的PCR扩增第40-41页
   ·PCR扩增产物的电泳、回收和连接第41页
   ·连接产物的转化、菌液检测及阳性克隆的质粒提取第41-43页
   ·真菌总RNA的提取及RT-PCR扩增第43-45页
   ·真菌载体的农杆菌转化第45-46页
   ·农杆菌介导的黄萎病菌遗传转化及阳性转化子鉴定第46-47页
   ·Southern杂交分析第47-51页
   ·棉花和拟南芥的种植与接种第51页
   ·电镜扫描分析第51-52页
   ·黄萎病菌侵染后棉花维管束症状观察第52页
  2 结果和分析第52-63页
   ·VdMsb基因的克隆及生物信息学分析第52-54页
   ·VdMsb基因缺失突变体的获得第54-56页
   ·VdMsb基因互补突变体的获得第56-57页
   ·野生型与突变体菌株的RT-PCR检测第57页
   ·野生型与突变体菌株的Southern杂交分析第57-58页
   ·野生型与突变体菌株的表型观察第58-59页
   ·VdMsb基因对黄萎病致病力的影响第59-61页
   ·VdMsb基因影响致病力机理的初步研究第61-63页
  3 讨论第63-67页
   ·Msb类基因的保守性第63-64页
   ·VdMsb基因影响黄萎病菌的微菌核形成第64-65页
   ·VdMsb基因调控黄萎病菌的致病力第65-66页
   ·黄萎病菌致病基因的研究在棉花抗病育种中的应用前景第66-67页
 第四章 棉花LysM基因家族的全基因组鉴定及功能分析第67-95页
  1 材料与方法第68-75页
   ·实验材料第68页
   ·棉花幼苗的培养及病菌接种第68页
   ·棉花幼苗的不同胁迫处理第68页
   ·棉花RNA的提取及反转录方法第68-70页
   ·生物信息学分析第70页
   ·基因家族成员的荧光定量PCR分析第70-72页
   ·目的基因的克隆第72-73页
   ·病毒介导的基因沉默(VIGS)方法第73-75页
  2 结果与分析第75-90页
   ·LysM基因家族全基因组注释第75-78页
   ·LysM基因的保守结构域及系统进化分析第78-80页
   ·LysM基因的内含子-外显子结构分析第80-82页
   ·海岛棉LysM基因的表达分析第82-86页
   ·海岛棉GbLYK5和GbLYP1基因的克隆第86-87页
   ·利用VIGS技术对GbLYK5和GbLYP1基因功能的初步验证第87-90页
  3 讨论第90-95页
   ·LysM基因家族在棉花中的分布特征及分类第90-92页
   ·棉花中LysM基因家族成员的表达特征第92页
   ·GbLYK5和GbLYP1基因影响棉花对黄萎病菌的抗性第92-95页
 第五章 棉花几丁质酶基因家族的全基因组鉴定及功能分析第95-113页
  1 材料与方法第95-96页
  2 结果与分析第96-110页
   ·几丁质酶基因家族全基因组注释第96-99页
   ·几丁质酶基因的系统进化分析第99-100页
   ·几丁质酶基因的内含子_外显子结构分析第100-102页
   ·海岛棉几丁质酶基因的表达分析第102-107页
   ·海岛棉GbChi22基因的克隆第107-108页
   ·利用VIGS技术对GbChi22基因功能的初步验证第108-110页
  3 讨论第110-113页
   ·几丁质酶基因家族在棉花中的分布特征及分类第110-111页
   ·棉花中几丁质酶基因的表达特征及功能分析第111-113页
全文结论第113-115页
附录第115-123页
参考文献第123-133页
攻读博士学位期间已发表的论文第133-135页
致谢第135页

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