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水稻白叶枯病菌c-di-GMP信号蛋白分子鉴定及功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
1 绪论第9-15页
   ·水稻白叶枯病菌致病性的分子机理第9-11页
     ·Xoo基因组特征第9页
     ·Xoo致病机理研究第9-11页
   ·细菌第二信使环鸟苷二磷酸(c-di-GMP)研究概况第11-14页
     ·c-di-GMP代谢机制第11-12页
     ·c-di-GMP代谢的调控机制第12-13页
     ·c-di-GMP对致病性的调控机制第13-14页
   ·目的意义和技术路线第14-15页
     ·目的意义第14页
     ·技术路线第14-15页
2 信号蛋白新基因PXO-02944基因功能分析第15-30页
   ·材料第15-16页
     ·菌株和质粒第15页
     ·主要生化试剂和抗生素第15页
     ·培养基和病菌培养条件第15-16页
   ·试验方法第16-22页
     ·Xoo基因组DNA的制备第16-17页
     ·02944xoo基因扩增第17-18页
     ·02944xoo基因纯化第18页
     ·02944xoo基因片段的连接与转化第18-19页
     ·质粒DNA的提取第19页
     ·02944xoo基因突变体的构建第19-20页
     ·突变体互补菌株的构建第20页
     ·突变体致病性和致敏性的测定第20-21页
     ·突变体生长曲线的测定第21页
     ·突变体生物膜形成能力测定第21页
     ·突变体鞭毛运动性的检测第21页
     ·突变体胞外酶活性的检测第21页
     ·突变体胞外多糖的检测第21页
     ·02944xoo的生物信息学分析第21-22页
   ·结果与分析第22-28页
     ·02944xoo基因克隆第22页
     ·02944xoo生物信息学分析第22页
     ·02944xoo突变体的构建第22-24页
     ·02944xoo突变体互补菌株的构建第24页
     ·02944xoo突变体致病性和致敏性的测定第24-26页
     ·突变体生长曲线的测定第26-27页
     ·突变体生物膜形成能力测定第27页
     ·突变体鞭毛运动性的测定第27页
     ·突变体胞外酶活性的测定第27-28页
     ·突变体胞外多糖的测定第28页
   ·小结与讨论第28-30页
3 c-di-GMP信号系统中EAL结构域基因功能分析第30-41页
   ·材料第30页
     ·菌株和质粒第30页
     ·生化试剂第30页
     ·培养基和菌株培养条件第30页
   ·试验方法第30-32页
     ·03877xoo和vieAxoo突变体质粒的制备第30-31页
     ·03877xoo和vieAxoo突变体的构建第31页
     ·03877xoo和vieAxoo互补菌株的构建第31页
     ·△03877xoo和△vieAxoo致病性和致敏性的测定第31页
     ·△03877xoo和△vieAxoo生长曲线的测定第31页
     ·△03877xoo和△vieAxoo生物膜形成能力测定第31页
     ·△03877xoo和△vieAxoo鞭毛运动性的检测第31页
     ·△03877xoo和△vieAxoo胞外酶活性的检测第31页
     ·△03877xoo和△vieAxoo胞外多糖的检测第31-32页
   ·结果与分析第32-40页
     ·03877xoo和vieAxoo生物信息学分析第32页
     ·03877xoo和vieAxoo突变体的构建第32-33页
     ·△03877xoo和△vieAxoo互补菌株的构建第33-34页
     ·△03877xoo和AvieAxoo致病性和致敏性第34-37页
     ·△03877xoo和△vieAxoo生长曲线第37-38页
     ·△03877xoo和△vieAxoo生物膜形成能力第38-39页
     ·△03877xoo和△vieAxoo鞭毛运动性第39页
     ·△03877xoo和△vieAxoo胞外酶活性第39页
     ·△03877xoo和△vieAxoo胞外多糖第39-40页
   ·小结与讨论第40-41页
4 三个基因对EPS合成基因及T3SS相关基因影响第41-49页
   ·试验材料第41-42页
     ·供试菌株和突变体第41页
     ·生化试剂第41页
     ·培养条件第41-42页
   ·试验方法第42-44页
     ·相关基因实时定量PCR引物设计第42页
     ·细菌总RNA的提取第42页
     ·总RNA反转录合成第一链cDNA第42-43页
     ·实时定量PCR反应程序及体系第43-44页
     ·相对定量的方法第44页
   ·结果与分析第44-47页
     ·△02944xoo、△03877xoo和AvieAxoo中EPS相关基因表达第44-46页
     ·△02944xoo、△03877xoo和△vieAxoo中T3SS相关基因的表达第46-47页
   ·小结与讨论第47-49页
结论第49-50页
参考文献第50-57页
致谢第57-58页
附录第58-59页

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