摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
·在香精香料的生产中生物技术使用情况的研究进展 | 第10-11页 |
·苯丙素类物质的生物转化研究进展 | 第11-17页 |
·生物转化木质素 | 第11页 |
·生物转化异丁香酚 | 第11-12页 |
·生物转化丁香酚 | 第12-13页 |
·生物转化阿魏酸 | 第13页 |
·生物转化反式茴香脑 | 第13-17页 |
·反式茴香脑、茴香醛、茴香酸物化性质 | 第13-14页 |
·茴香醛和茴香酸的利用价值 | 第14-15页 |
·反式茴香脑生物降解研究现状 | 第15-17页 |
·质粒转座子 | 第17-19页 |
·研究背景 | 第19-20页 |
·研究目的 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-30页 |
·菌种与质粒 | 第21页 |
·培养基、试剂和菌种保存 | 第21-22页 |
·培养基和试剂的配制 | 第21-22页 |
·菌种保存 | 第22页 |
·抗生素与使用浓度 | 第22页 |
·检测方法 | 第22-23页 |
·薄层色谱法操作 | 第22-23页 |
·三亲结合及突变体库的构建和筛选 | 第23-24页 |
·三亲结合 | 第23-24页 |
·突变体库的构建 | 第24页 |
·突变体的筛选 | 第24页 |
·基因组 DNA 提取 | 第24-25页 |
·质粒提取 | 第25-26页 |
·PCR 扩增和纯化 | 第26页 |
·PCR 扩增 | 第26页 |
·试剂盒快速回收 DNA 片段 | 第26页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第26-27页 |
·DNA 的酶切和连接 | 第27-28页 |
·酶切反应 | 第27页 |
·DNA 连接反应 | 第27-28页 |
·制备感受态细胞和转化 | 第28-30页 |
·大肠杆菌 DH5α超级感受态的制备 | 第28页 |
·化学转化 | 第28页 |
·电转化感受态的制备 | 第28-29页 |
·电转化 | 第29-30页 |
第三章 BURKHOLDERIA SP.WGB30 突变体库的构建和分析 | 第30-45页 |
·Burkholderia sp.WGB30 突变体库的构建 | 第30-35页 |
·转座子质粒的选择 | 第30-33页 |
·pTnMod-RKm 三亲结合法 | 第30-31页 |
·pTnMod-RKm 电转化法 | 第31-33页 |
·pTnMod-KmO 三亲结合法 | 第33-35页 |
·不能转化反式茴脑的突变体的筛选 | 第35页 |
·34 株突变体薄层层析分析 | 第35-37页 |
·突变体的突变基因的克隆和分析 | 第37-45页 |
·反向 PCR 法 | 第37-39页 |
·反向巢氏 PCR | 第39-41页 |
·构建重组质粒法 | 第41-42页 |
·质粒拯救 | 第42-43页 |
·小结 | 第43-45页 |
第四章 讨论和总结 | 第45-49页 |
·Burkholderia sp.WGB30 突变体库的构建 | 第45页 |
·突变体的筛选 | 第45-46页 |
·转座子侧翼序列的克隆 | 第46-47页 |
·展望 | 第47-48页 |
·后续研究 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
感谢 | 第54-55页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第55页 |