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反式茴脑降解菌Burkholderia sp.WGB30突变体库构建以及分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章 文献综述第10-21页
   ·在香精香料的生产中生物技术使用情况的研究进展第10-11页
   ·苯丙素类物质的生物转化研究进展第11-17页
     ·生物转化木质素第11页
     ·生物转化异丁香酚第11-12页
     ·生物转化丁香酚第12-13页
     ·生物转化阿魏酸第13页
     ·生物转化反式茴香脑第13-17页
       ·反式茴香脑、茴香醛、茴香酸物化性质第13-14页
       ·茴香醛和茴香酸的利用价值第14-15页
       ·反式茴香脑生物降解研究现状第15-17页
   ·质粒转座子第17-19页
   ·研究背景第19-20页
   ·研究目的第20-21页
第二章 材料与方法第21-30页
   ·菌种与质粒第21页
   ·培养基、试剂和菌种保存第21-22页
     ·培养基和试剂的配制第21-22页
     ·菌种保存第22页
   ·抗生素与使用浓度第22页
   ·检测方法第22-23页
     ·薄层色谱法操作第22-23页
   ·三亲结合及突变体库的构建和筛选第23-24页
     ·三亲结合第23-24页
     ·突变体库的构建第24页
     ·突变体的筛选第24页
   ·基因组 DNA 提取第24-25页
   ·质粒提取第25-26页
     ·PCR 扩增和纯化第26页
     ·PCR 扩增第26页
     ·试剂盒快速回收 DNA 片段第26页
   ·琼脂糖凝胶电泳第26-27页
   ·DNA 的酶切和连接第27-28页
     ·酶切反应第27页
     ·DNA 连接反应第27-28页
   ·制备感受态细胞和转化第28-30页
     ·大肠杆菌 DH5α超级感受态的制备第28页
     ·化学转化第28页
     ·电转化感受态的制备第28-29页
     ·电转化第29-30页
第三章 BURKHOLDERIA SP.WGB30 突变体库的构建和分析第30-45页
   ·Burkholderia sp.WGB30 突变体库的构建第30-35页
     ·转座子质粒的选择第30-33页
       ·pTnMod-RKm 三亲结合法第30-31页
       ·pTnMod-RKm 电转化法第31-33页
     ·pTnMod-KmO 三亲结合法第33-35页
   ·不能转化反式茴脑的突变体的筛选第35页
   ·34 株突变体薄层层析分析第35-37页
   ·突变体的突变基因的克隆和分析第37-45页
     ·反向 PCR 法第37-39页
     ·反向巢氏 PCR第39-41页
     ·构建重组质粒法第41-42页
     ·质粒拯救第42-43页
     ·小结第43-45页
第四章 讨论和总结第45-49页
   ·Burkholderia sp.WGB30 突变体库的构建第45页
   ·突变体的筛选第45-46页
   ·转座子侧翼序列的克隆第46-47页
   ·展望第47-48页
   ·后续研究第48-49页
参考文献第49-54页
感谢第54-55页
攻读硕士学位期间发表论文情况第55页

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