摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-24页 |
·植物细胞RNA依赖的RNA聚合酶的分离与鉴定 | 第12-13页 |
·真核生物RNA依赖的RNA聚合酶(RDRs)的分类与命名 | 第13-15页 |
·RDRs的分类 | 第13-14页 |
·RDRs的命名 | 第14-15页 |
·RDRs的功能 | 第15-17页 |
·RDRs与RNA沉默 | 第15-16页 |
·RDRs与植物病毒防御 | 第16-17页 |
·水稻条纹叶枯病 | 第17-22页 |
·病害发生情况 | 第17-19页 |
·水稻条纹病毒 | 第19-22页 |
·本研究的目的和意义 | 第22-24页 |
第2章 材料与方法 | 第24-35页 |
·试验材料 | 第24-25页 |
·生物材料 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24-25页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·培养基及溶液配制 | 第25页 |
·方法 | 第25-35页 |
·总RNA的提取 | 第25-26页 |
·总RNA中基因组DNA的处理 | 第26-27页 |
·水稻叶片DNA的提取 | 第27页 |
·ELISA | 第27-28页 |
·RSV的饲毒与接毒 | 第28页 |
·目的基因的克隆 | 第28-32页 |
·RT-PCR | 第32-34页 |
·定量PCR(qRT-PCR) | 第34-35页 |
第3章 水稻OsRDR1的克隆与分析 | 第35-48页 |
·材料与方法 | 第35-36页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·试验材料 | 第35页 |
·引物设计 | 第35-36页 |
·方法 | 第36-37页 |
·水稻叶片总RNA提取 | 第36页 |
·RT-PCR及扩增产物克隆 | 第36页 |
·测序与序列分析 | 第36-37页 |
·结果与分析 | 第37-47页 |
·日本晴水稻叶片总RNA | 第37页 |
·OsRDR1的序列扩增 | 第37-39页 |
·OsRDR1的序列分析 | 第39-47页 |
·小结与讨论 | 第47-48页 |
第4章 水稻OsRDR1的表达模式分析 | 第48-54页 |
·材料与方法 | 第48-49页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·试验材料 | 第48页 |
·引物设计 | 第48-49页 |
·方法 | 第49-50页 |
·接毒与饲毒 | 第49页 |
·水稻总RNA提取 | 第49页 |
·RNA中基因组的处理 | 第49页 |
·半定量RT-PCR检测与定量PCR(qPCR) | 第49-50页 |
·结果与分析 | 第50-54页 |
·RNA的提取 | 第50页 |
·OsRDR1的表达特性分析 | 第50-52页 |
·小结与讨论 | 第52-54页 |
第5章 水稻OsRDR1突变体的鉴定 | 第54-61页 |
·材料与方法 | 第54-55页 |
·主要试剂 | 第54页 |
·试验材料 | 第54页 |
·引物设计 | 第54-55页 |
·方法 | 第55页 |
·水稻叶片基因组DNA的提取 | 第55页 |
·水稻叶片总RNA的提取 | 第55页 |
·PCR与RT-PCR检测 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-58页 |
·DNA的提取 | 第55页 |
·总RNA的提取 | 第55-57页 |
·PCR鉴定OsRDR1突变体 | 第57-58页 |
·RT-PCR鉴定OsRDR1突变体 | 第58页 |
·OsRDR1突变体生物性状观测 | 第58-60页 |
·小结与讨论 | 第60-61页 |
第6章 OsRDR1参与病毒来源的小RNA(vsRNA)形成 | 第61-68页 |
·材料与方法 | 第61-62页 |
·毒源及接种 | 第61页 |
·植物材料 | 第61-62页 |
·方法 | 第62页 |
·总RNA提取和小RNA(sRNA)的纯化 | 第62页 |
·sRNA文库构建和测序 | 第62页 |
·RSV vsRNA生物信息学分析 | 第62页 |
·结果与讨论 | 第62-68页 |
·2个sRNA文库概述 | 第62-63页 |
·RSV vsRNA特征分析 | 第63-65页 |
·OsRDR1在RSV vsRNA的生物发生中起重要作用 | 第65-68页 |
第7章 结论与展望 | 第68-69页 |
·结论 | 第68页 |
·展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-81页 |
附录Ⅰ 缩略词表 | 第81-84页 |
附录Ⅱ 各种培养基及试剂的配制方法 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第86-87页 |