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甜菜夜蛾嗅觉受体和感觉神经元膜蛋白基因的克隆、表达定位及功能研究

目录第1-8页
摘要第8-11页
ABSTRACT第11-15页
第一章 文献综述第15-29页
 1 嗅觉感受器的类型和功能第15-16页
   ·毛形感器第15-16页
   ·锥形感器第16页
   ·腔锥形感器第16页
   ·刺形感器第16页
 2 昆虫嗅觉系统的分子机制第16-27页
   ·昆虫气味结合蛋白的研究进展第18-19页
   ·昆虫气味受体的研究进展第19-24页
     ·气味受体的鉴定第19-20页
     ·昆虫气味受体的结构特性和分布第20-21页
     ·昆虫气味受体的功能研究第21-22页
     ·昆虫性信息素受体的功能研究第22-24页
   ·昆虫感觉神经元膜蛋白的研究进展第24-26页
     ·SNMPs的鉴定第24页
     ·SNMPs的结构特性和分布第24-25页
     ·SNMPs的功能研究第25-26页
   ·昆虫气味降解酶的研究进展第26-27页
 3 本研究的目的和意义第27-29页
第二章 甜菜夜蛾性信息素受体基因的克隆、相对表达和功能研究第29-51页
 摘要第29-30页
 1 材料与方法第30-38页
   ·供试昆虫和组织收集第30页
   ·主要试剂和仪器第30-31页
   ·RNA的提取第31页
   ·第一链cDNA的合成第31-32页
   ·甜菜夜蛾PRs片段和全长克隆的引物设计第32-35页
   ·PCR扩增第35页
   ·PCR产物纯化、克隆、测序和序列分析第35-36页
     ·PCR产物纯化第35页
     ·连接反应第35页
     ·转化反应第35页
     ·菌落扩大培养和单克隆筛选第35-36页
     ·小量质粒DNA的提取第36页
     ·序列测定第36页
     ·序列分析第36页
   ·甜菜夜蛾PRs基因的定量分析第36-37页
     ·实时荧光定量PCR第36页
     ·数据分析第36-37页
   ·表达载体的构建、cRNA的合成和功能鉴定第37-38页
     ·表达载体构建第37页
     ·质粒线性化第37页
     ·酚-氯仿抽提第37页
     ·cRNA合成第37-38页
     ·甜菜夜蛾PRs的功能鉴定第38页
 2 结果与分析第38-47页
   ·甜菜夜蛾PRs基因的获得和分析第38-39页
     ·同源克隆第38页
     ·全长的克隆和分析第38-39页
   ·甜菜夜蛾PRs基因进化树分析第39-42页
   ·甜菜夜蛾PRs基因的组织表达谱第42-44页
   ·甜菜夜蛾PRs的功能研究第44-47页
     ·SexiOR13的配体特异性第44-46页
     ·SexiOR16的识别特异性第46-47页
 3 讨论第47-51页
第三章 甜菜夜蛾普通气味受体基因的克隆、表达定位和功能研究第51-73页
 摘要第51-52页
 1 材料与方法第52-59页
   ·供试昆虫和组织收集第52页
   ·供试植物气味第52-54页
   ·主要试剂和仪器第54-55页
   ·RNA的提取第55页
   ·第一链cDNA的合成第55页
   ·甜菜夜蛾PRs片段和全长克隆的引物设计第55-57页
   ·PCR扩增第57页
   ·PCR产物纯化、克隆、测序和序列分析第57页
   ·甜菜夜蛾PRs基因的定量分析第57页
   ·原位杂交第57-59页
     ·探针的合成第57-58页
     ·原位杂交(in situ hybridization)第58-59页
   ·表达载体的构建、cRNA的合成和功能鉴定第59页
 2 结果与分析第59-71页
   ·甜菜夜蛾ORs基因的获得和分析第59-61页
     ·同源克隆第59页
     ·全长的克隆和分析第59-61页
   ·ORs基因进化树分析第61-62页
   ·甜菜夜蛾ORs基因的组织表达谱第62页
   ·甜菜夜蛾ORs在触角中的表达定位第62-68页
     ·SexiOrco在雄虫触角中的表达定位第62-64页
     ·SexiOR3在雌雄成虫触角中的表达定位第64-66页
     ·SexiOR18在成虫触角中的表达定位第66-68页
   ·甜菜夜蛾ORs的功能研究第68-71页
     ·SexiOR3的电生理记录第68-71页
     ·SexiOR18的电生理记录第71页
 3 讨论第71-73页
第四章 甜菜夜蛾感觉神经元膜蛋白基因的克隆和表达定位第73-87页
 摘要第73-74页
 1 材料与方法第74-76页
   ·供试昆虫和组织收集第74页
   ·主要试剂和仪器第74页
   ·RNA的提取第74页
   ·第一链cDNA的合成第74页
   ·甜菜夜蛾SNMPs片段和全长克隆的引物设计第74-75页
   ·PCR扩增第75页
   ·PCR产物纯化、克隆、测序和序列分析第75页
   ·甜菜夜蛾SNMPs基因的定量分析第75页
   ·原位杂交第75-76页
     ·探针的合成第75页
     ·原位杂交(in situ hybridization)第75-76页
 2 结果与分析第76-84页
   ·甜菜夜蛾SNMPs基因的获得和分析第76-78页
   ·甜菜夜蛾SNMPs基因的组织表达谱第78-80页
   ·甜菜夜蛾SNMPs在触角中的表达定位第80-84页
     ·SexiSNMP1在雌雄成虫触角中的表达定位第80-82页
     ·SexiSNMP2在雌雄成虫触角中的表达定位第82-84页
 3 讨论第84-87页
全文总结第87-89页
参考文献第89-99页
附录:攻读硕士学位期间学术论文的发表情况第99-101页
致谢第101页

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