甜菜夜蛾幼虫期EcR和USP基因表达模式与功能研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-26页 |
| 1 昆虫蜕皮变态 | 第10-20页 |
| ·昆虫蜕皮变态的现象 | 第10页 |
| ·昆虫蜕皮变态的生理过程 | 第10-12页 |
| ·昆虫蜕皮与变态过程中的主要激素 | 第12-14页 |
| ·昆虫蜕皮与变态的分子机制 | 第14-20页 |
| 2 RNAi技术与应用 | 第20-24页 |
| ·RNAi技术简介 | 第20-21页 |
| ·RNAi的应用 | 第21-22页 |
| ·RNAi在其他昆虫基因功能研究中的应用 | 第22-24页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-36页 |
| 1 供试昆虫 | 第26页 |
| 2 主要试剂与耗材 | 第26页 |
| 3 主要仪器 | 第26页 |
| 4 基因克隆 | 第26-30页 |
| ·总RNA提取 | 第26-27页 |
| ·cDNA合成 | 第27页 |
| ·PCR扩增 | 第27-28页 |
| ·PCR产物纯化 | 第28页 |
| ·连接 | 第28页 |
| ·转化与涂板 | 第28-29页 |
| ·阳性克隆筛选 | 第29-30页 |
| ·测序 | 第30页 |
| ·序列分析 | 第30页 |
| 5 MRNA表达水平分析 | 第30-32页 |
| ·龄期及取样 | 第30页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第30-32页 |
| 6 RNA干扰 | 第32-36页 |
| ·引物设计 | 第32页 |
| ·模板DNA的合成 | 第32-33页 |
| ·dsRNA的体外转录合成 | 第33-34页 |
| ·dsRNA的注射 | 第34页 |
| ·RNAi效率的检测 | 第34-35页 |
| ·RNAi后产生致死表型观察 | 第35页 |
| ·RNAi后统计产生致死表型的比率 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与分析 | 第36-48页 |
| 1 PCR产物熔解曲线和扩增效率分析 | 第36-38页 |
| 2 ECR和USP的表达模式 | 第38-40页 |
| ·EcR和USP的表达模式 | 第38-39页 |
| ·EcRA和EcRB的表达模式 | 第39-40页 |
| 3 ECR和USP的功能 | 第40-48页 |
| ·EcR与USP表达下调后甜菜夜蛾的表型变化 | 第40-42页 |
| ·dsRNA注射后甜菜夜蛾产生致死表型的比率 | 第42-43页 |
| ·甜菜夜蛾EcR和USP基因的RNAi效率 | 第43-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-58页 |
| 1 甜菜夜蛾ECR和USP基因的表达规律 | 第48-53页 |
| ·甜菜夜蛾EcR和USP基因的表达变化 | 第48-51页 |
| ·EcR-A和EcR-B基因的表达差异 | 第51-53页 |
| 2 RNAI研究ECR和USP基因的功能 | 第53-58页 |
| ·致死表型与功能 | 第53-54页 |
| ·RNAi效率 | 第54-58页 |
| 第五章 主要结论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-72页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
