摘要 | 第1-3页 |
Abstract | 第3-4页 |
主要缩略词英汉对照表 | 第4-7页 |
第一章 幽门螺杆菌尿素酶研究进展 | 第7-12页 |
1 幽门螺杆菌的危害 | 第7页 |
2 尿素酶基因结构 | 第7-8页 |
·尿素酶基因概述 | 第7页 |
·各亚基间的作用 | 第7-8页 |
3 蛋白质结构 | 第8-9页 |
·尿素酶蛋白质空间结构 | 第8页 |
·三聚体装配 | 第8-9页 |
4 尿素酶致病性 | 第9-10页 |
·定植作用 | 第9页 |
·对宿主的损伤 | 第9-10页 |
5 尿素酶疫苗探讨 | 第10页 |
6 尿素酶的检测技术 | 第10-12页 |
第二章 幽门螺杆菌尿素酶 B 基因的克隆、表达和抗原性鉴定 | 第12-32页 |
1 材料与方法 | 第12-22页 |
·材料 | 第12-14页 |
·Hp UreB 基因的电子克隆 | 第14页 |
·引物设计 | 第14-15页 |
·Hp UreB 基因克隆 | 第15-16页 |
·重组克隆质粒 pMD 18-T-UreB 构建 | 第16-17页 |
·pMD18-T-UreB 重组克隆质粒酶切鉴定 | 第17-18页 |
·重组表达质粒 pET28a-UreB 构建和鉴定 | 第18-20页 |
·重组 UreB 蛋白的原核表达及优化 | 第20-21页 |
·表达蛋白纯化 | 第21-22页 |
·纯化 UreB 蛋白生物学活性鉴定 | 第22页 |
2 结果 | 第22-30页 |
·幽门螺旋杆菌 UreB 基因的电子克隆 | 第22-24页 |
·PCR 扩增以及克隆 | 第24页 |
·转化菌 PCR 阳性鉴定 | 第24-27页 |
·UreB 重组蛋白的原核表达及优化 | 第27-28页 |
·表达产物的表达条件优化 | 第28-29页 |
·UreB 重组蛋白的纯化 | 第29-30页 |
·UreB 重组蛋白活性鉴定 | 第30页 |
3 讨论 | 第30-32页 |
第三章 抗 UreB 单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定 | 第32-47页 |
1 材料与方法 | 第32-40页 |
·材料 | 第32-34页 |
·抗幽门螺杆菌 UreB 单克隆抗体的制备 | 第34-35页 |
·阳性杂交瘤细胞筛选体系建立 | 第35-36页 |
·单克隆抗体制备 | 第36-37页 |
·腹水制备 | 第37页 |
·单克隆抗体的纯化 | 第37-38页 |
·单克隆抗体特生物学特性鉴定 | 第38-40页 |
2 结果 | 第40-45页 |
·单克隆抗体筛选方法的建立 | 第40页 |
·细胞融合及杂交瘤细胞株的建立 | 第40-41页 |
·抗体纯化技术 | 第41页 |
·单克隆抗体的 SDS-PAGE 鉴定结果 | 第41-42页 |
·单克隆抗体特生物学特性鉴定 | 第42-45页 |
3 讨论 | 第45-47页 |
第四章 幽门螺杆菌 UreB 双抗体夹心 ELISA 检测方法的建立及应用 | 第47-52页 |
1 材料及方法 | 第47-49页 |
·材料 | 第47-48页 |
·单克隆抗体的浓缩 | 第48页 |
·酶标抗体制备 | 第48页 |
·双抗夹心法建立 | 第48-49页 |
·Hp UreB 双抗夹心 ELISA 检测粪便标本 | 第49页 |
·统计学方法 | 第49页 |
2 结果 | 第49-50页 |
·抗体包被浓度及酶标抗体工作浓度的确定 | 第49页 |
·两种检测方法比较结果 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简历 | 第59-60页 |
导师简介 | 第60-61页 |