| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略词表(Abbreviation) | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-37页 |
| ·仪器 | 第16页 |
| ·试剂 | 第16-17页 |
| ·溶液及培养基的配制 | 第17-20页 |
| ·实验菌株及质粒 | 第20-21页 |
| ·引物 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-37页 |
| ·金黄色葡葡萄球菌基因组提取 | 第22页 |
| ·大肠杆菌质粒提取 | 第22-23页 |
| ·金黄色葡菌球菌中质粒提取 | 第23-24页 |
| ·大肠杆菌的超级感受态制备 | 第24页 |
| ·金黄色葡萄球菌感受态制备 | 第24-25页 |
| ·构建pkor1：：clpP重组质粒 | 第25-27页 |
| ·clpP基因敲除 | 第27-30页 |
| ·细菌双杂交研究clpP和clpX蛋白互作 | 第30-31页 |
| ·clpP基因功能互补及过表达 | 第31页 |
| ·SarZ和MgrA蛋白定点突变 | 第31-32页 |
| ·噬菌体转导 | 第32-34页 |
| ·蛋白纯化 | 第34页 |
| ·蛋白热稳定分析 | 第34-35页 |
| ·电泳迁移率检测分析(EMSA) | 第35-37页 |
| 3 实验结果与分析 | 第37-54页 |
| ·clpP基因在newman基因组中的敲除 | 第37-42页 |
| ·穿梭质粒(△clpP-pkoRl)的构建 | 第37-39页 |
| ·RN4220修饰 | 第39-40页 |
| ·重组质粒电击转入newman菌株 | 第40页 |
| ·突变体的筛选 | 第40-42页 |
| ·clpX基因在newman基因组中的敲除 | 第42页 |
| ·pkorl：：clpX-上-erm-下重组质粒的构建 | 第42页 |
| ·RN4220修饰 | 第42页 |
| ·△clpX-pKOR1质粒电击转入newman | 第42页 |
| ·突变体筛选 | 第42页 |
| ·clpX/clpP在newman基因组中的双敲除 | 第42-43页 |
| ·Western blot | 第43页 |
| ·△clpP表型特征 | 第43-44页 |
| ·细菌双杂交质粒构建 | 第44-46页 |
| ·SarZ/MgrA家族蛋白的研究 | 第46-54页 |
| ·SarZ做了一些蛋白折叠相关的点突变(18个) | 第46页 |
| ·蛋白小试SDS-page | 第46-48页 |
| ·电泳迁移率实验(EMSA) | 第48-50页 |
| ·蛋白最适buffer筛选和热稳定性分析 | 第50页 |
| ·胞外蛋白酶活性检测 | 第50-52页 |
| ·在SarZ的基础上进行另一类SarA家族蛋白—MgrA的研究 | 第52-54页 |
| 4 总结与讨论 | 第54-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
