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棉花GhMAPK6的表达及功能分析

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
本文缩写符号第8-12页
一、引言第12-26页
   ·植物MAPK级联途径参与调控ABA信号转导第12-21页
     ·MAPK可以被ABA激活第13-14页
     ·磷酸化、去磷酸化与ABA信号转导的关系第14-16页
     ·MAPK级联途经参与调控ABA信号转导过程第16-21页
   ·植物中的MAPKs蛋白第21-24页
     ·植物中MAPKs的结构特点第22页
     ·植物中MAPKs的分类第22-23页
     ·棉花中的MAPKs第23-24页
   ·立题依据及本文研究的意义第24-26页
二、材料与方法第26-42页
   ·实验材料第26-28页
     ·菌种和载体第26页
     ·植物材料第26页
     ·化学试剂第26页
     ·工具酶第26页
     ·常用储液第26页
     ·常用缓冲液第26-27页
     ·常用培养基第27页
     ·棉花基因组DNA提取试剂第27页
     ·棉花总RNA的提取试剂第27-28页
     ·PCR分析扩增试剂第28页
     ·DNA测序第28页
     ·仪器设备第28页
   ·实验方法第28-42页
     ·目的基因cDNA序列的分离第28-31页
     ·基因和蛋白序列分析第31-32页
     ·棉花各组织材料的收取第32页
     ·棉花基因组DNA的提取第32-33页
     ·基因结构分析第33页
     ·基因的表达模式分析第33-34页
     ·GhMAPK6:eGFP载体构建第34-35页
     ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第35页
     ·农杆菌介导的棉花转化第35-36页
     ·棉花愈伤组织细胞荧光观察第36页
     ·拟南芥的培养以及农杆菌介导的遗传转化第36-38页
     ·GhMAPK6过量表达转基因拟南芥的筛选及鉴定第38-40页
     ·GhMAPK6过量表达转基因拟南芥的表型分析第40-42页
三、结果与分析第42-56页
   ·棉花GhMAPK6基因分离克隆及结构进化分析第42-47页
     ·棉花GhMAPK6基因的分离第42-43页
     ·棉花GhMAPK6蛋白结构分析第43-44页
     ·棉花GhMAPK6蛋白的疏水性分析第44-45页
     ·棉花GhMAPK6与其它植物MAPK蛋白的进化关系分析第45-46页
     ·棉花GhMAPK6基因DNA全长序列分析第46-47页
   ·棉花GhMAPK6基因的表达分析第47-49页
     ·RNA提取第47页
     ·GhMAPK6基因在棉花不同组织中的差异表达第47-48页
     ·GhMAPK6基因在不同胁迫处理下的差异表达第48-49页
   ·棉花GhMAPK6亚细胞定位分析第49-50页
     ·GhMAPK6-eGFP融合载体的构建第49页
     ·GhMAPK6-eGFP的棉花转化和eGFP融合蛋白的荧光定位第49-50页
   ·GhMAPK6在转基因拟南芥中的功能分析第50-56页
     ·GhMAPK6过量表达载体的构建和拟南芥Atmkk1突变体的转化第50-51页
     ·过量表达转基因拟南芥的鉴定第51-53页
     ·GhMAPK6过量表达能互补和恢复拟南芥突变体Atmkk1的表型第53-56页
四、讨论第56-60页
   ·棉花GhMAPK6基因及其编码蛋白结构同源性及进化分析第56页
   ·GhMAPK6基因在棉花中的表达调控第56-57页
   ·GhMAPK6可能参与调控H202介导的ABA信号转导第57-60页
参考文献第60-67页
附录第67-68页
在校期间发表的论文第68-69页
致谢第69页

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