| 目录 | 第1-8页 |
| Contents | 第8-12页 |
| 中文摘要 | 第12-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-32页 |
| ·Hedgehog信号通路及其核心成员Gli1简介 | 第15-20页 |
| ·Hedgehog信号通路 | 第15-16页 |
| ·Hedgehog信号通路的组成 | 第16-19页 |
| ·Gli1及其功能 | 第19-20页 |
| ·Wnt信号通路及其核心成员β-catenin简介 | 第20-24页 |
| ·Wnt信号通路 | 第20-21页 |
| ·Wnt信号通路的组成 | 第21-24页 |
| ·Hedgehog、Wnt信号通路与大肠癌 | 第24-27页 |
| ·Hedgehog信号通路与大肠癌 | 第24-25页 |
| ·Wnt信号通路与大肠癌 | 第25-26页 |
| ·Hedgehog、Wnt信号通路的交互作用 | 第26-27页 |
| ·本课题研究目的及意义 | 第27页 |
| 参考文献 | 第27-32页 |
| 第二章 肠癌细胞中Hedgehog、Wnt信号通路核心成员及其相互作用研究 | 第32-38页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·细胞株 | 第32页 |
| ·实验试剂及抗体 | 第32页 |
| ·研究方法 | 第32-35页 |
| ·肠癌细胞的复苏与冻存 | 第32-33页 |
| ·肠癌细胞的培养 | 第33页 |
| ·肠癌细胞总RNA提取及反转录 | 第33页 |
| ·荧光定量PCR | 第33-34页 |
| ·蛋白提取及Western Blotting | 第34页 |
| ·免疫共沉淀 | 第34页 |
| ·数据处理 | 第34-35页 |
| ·结果 | 第35-36页 |
| ·肠癌细胞中Hedgehog、Wnt信号通路表达情况检测分析 | 第35-36页 |
| ·Hedgehog、Wnt信号通路核心成员相互作用情况 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-38页 |
| 第三章 Wnt信号通路改变对Hedgehog通路核心成员Gill表达的影响 | 第38-47页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·细胞株 | 第38页 |
| ·主要试剂与抗体 | 第38页 |
| ·研究方法 | 第38-40页 |
| ·LiCl处理肠癌细胞 | 第38页 |
| ·免疫荧光染色 | 第38-39页 |
| ·Western Blotting | 第39页 |
| ·肠癌细胞系细胞浆、核蛋白的提取 | 第39页 |
| ·免疫共沉淀 | 第39-40页 |
| ·RNA干扰 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-44页 |
| ·LiCl处理提高了肠癌细胞中Gli1的表达水平 | 第40-43页 |
| ·LiCl处理提高肠癌细胞中Gli1的细胞核表达水平 | 第43页 |
| ·siRNA β-catenin降低肠癌细胞中Gli1的表达水平 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-47页 |
| 第四章 Hedgehog信号通路改变对Wnt通路核心成员β-catenin表达的影响 | 第47-53页 |
| ·实验材料 | 第47页 |
| ·细胞株 | 第47页 |
| ·主要试剂与抗体 | 第47页 |
| ·研究方法 | 第47-49页 |
| ·肠癌细胞过表达Gli1 | 第47-48页 |
| ·蛋白提取和Western blotting | 第48页 |
| ·荧光定量PCR | 第48页 |
| ·GANT61处理肠癌细胞 | 第48页 |
| ·RNA干扰 | 第48-49页 |
| ·数据处理 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-52页 |
| ·Gli1过表达提高肠癌细胞中β-catenin的表达水平 | 第49-50页 |
| ·敲减Gli1降低肠癌细胞β-catenin的表达水平 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52页 |
| 参考文献 | 第52-53页 |
| 第五章 过表达Gli1对肠癌细胞增殖的影响 | 第53-58页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·细胞株 | 第53页 |
| ·主要试剂与抗体 | 第53页 |
| ·研究方法 | 第53-54页 |
| ·肠癌细胞过表达Gli1 | 第53页 |
| ·MTT法测定肠癌细胞增殖 | 第53-54页 |
| ·蛋白提取和 Westenr blotting | 第54页 |
| ·荧光定量PCR | 第54页 |
| ·数据处理 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-56页 |
| ·Gli1过表达促进肠癌细胞的增殖 | 第54-55页 |
| ·Gli1通过上调C-myc的表达促进肠癌细胞增殖 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-58页 |
| 结论与讨论 | 第58-60页 |
| 附录1 英文缩略语表 | 第60-62页 |
| 附录2 主要试剂配方 | 第62-63页 |
| 附录3 实验主要仪器设备 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 个人简况及联系方式 | 第66-68页 |
