摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 绪论 | 第11-19页 |
·杜氏藻 | 第11-14页 |
·杜氏藻概况 | 第11-12页 |
·杜氏藻的分子生物学研究 | 第12-13页 |
·杜氏藻的研究价值 | 第13-14页 |
·类胡萝卜素 | 第14-19页 |
·类胡萝卜素简介 | 第14-18页 |
·类胡萝卜素的代谢工程策略 | 第18-19页 |
第二章 巴氏杜氏藻 PDS 基因的克隆 | 第19-48页 |
·引言 | 第19页 |
·实验材料与仪器 | 第19-24页 |
·藻种及培养液 | 第19-20页 |
·质粒和菌种 | 第20-21页 |
·试剂及试剂盒 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·常用试剂的配制 | 第22-24页 |
·实验方法 | 第24-43页 |
·杜氏盐藻的培养 | 第24页 |
·盐藻基因组的提取 | 第24-25页 |
·大肠杆菌 GT-116 (Top10) 感受态的制备 | 第25-26页 |
·PCR 扩增目的基因 | 第26-31页 |
·目的 DNA 片段的回收 | 第31-33页 |
·DNA 的连接、转化、验证与保存 | 第33-35页 |
·PDS 基因编码区的获得与验证 | 第35-42页 |
·PDS 启动子与终止子的获得 | 第42-43页 |
·结果与讨论 | 第43-47页 |
·巴氏藻基因组的提取 | 第43-44页 |
·PDS 基因编码区序列的获取 | 第44页 |
·5’RACE 验证 5’端编码区序列 | 第44-46页 |
·PDS 基因启动子与终止子的获得 | 第46-47页 |
·完整 PDS 基因 | 第47页 |
·本章小结 | 第47-48页 |
第三章 PDS 基因启动子的活性验证 | 第48-60页 |
·引言 | 第48-50页 |
·报告基因 | 第48-49页 |
·绿色荧光蛋白 | 第49-50页 |
·实验材料 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-57页 |
·质粒提取 | 第50-51页 |
·酶切位点分析与引物设计 | 第51-52页 |
·酶切产物纯化 | 第52-53页 |
·外源表达盒的构建 | 第53-56页 |
·启动子活性验证 | 第56-57页 |
·结果与讨论 | 第57-59页 |
·重组质粒的构建 | 第57-58页 |
·EGFP 的表达 | 第58-59页 |
·本章小结 | 第59-60页 |
第四章 PDS 基因的生物信息学分析 | 第60-69页 |
·引言 | 第60页 |
·PDS 基因的生物信息学分析 | 第60-61页 |
·开放阅读框及氨基酸序列分析 | 第60页 |
·序列相似性搜索与保守结构域分析 | 第60页 |
·多重序列比对及构建系统发育树 | 第60-61页 |
·PDS 基因编码区序列分析 | 第61页 |
·PDS 基因启动子分析 | 第61页 |
·结果与分析 | 第61-68页 |
·八氢番茄红素脱氢酶 ORF 分析 | 第61页 |
·序列相似性搜索与保守结构域分析 | 第61-63页 |
·多重比对与系统发育树构建 | 第63-65页 |
·PDS 基因编码区序列分析 | 第65-66页 |
·PDS 基因启动子分析 | 第66-68页 |
·本章小结 | 第68-69页 |
结论与展望 | 第69-71页 |
结论 | 第69-70页 |
展望 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-78页 |
附录:完整 PDS 基因序列 | 第78-84页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
附件 | 第86页 |