| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| Abbreviation | 第9-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-19页 |
| ·研究背景 | 第14页 |
| ·海洋细菌研究的历史 | 第14-16页 |
| ·海洋细菌的分类和分布 | 第16页 |
| ·海洋细菌产生的生物活性物质 | 第16-18页 |
| ·肽类物质 | 第17页 |
| ·生物碱类物质 | 第17页 |
| ·大环内脂类物质 | 第17-18页 |
| ·含卤素类物质 | 第18页 |
| ·其他活性物质 | 第18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 海洋芽孢杆菌B-9987基因组文库的构建 | 第19-32页 |
| ·引言 | 第19-20页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·菌株与质粒 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20页 |
| ·实验仪器 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-28页 |
| ·MaxPlax~(TM) Lambda Packaging Extract的质量测定 | 第21-22页 |
| ·B-9987基因组DNA的提取及纯化{27} | 第22-23页 |
| ·基因组DNA的部分酶切 | 第23-24页 |
| ·低熔点琼脂糖凝胶筛选目的片段DNA及目的片段的去磷酸化 | 第24-25页 |
| ·载体SuperCos1的处理 | 第25-26页 |
| ·载体和目的片段的连接反应 | 第26页 |
| ·体外包装 | 第26页 |
| ·侵染适宜的宿主菌 | 第26-27页 |
| ·文库质量的检测 | 第27页 |
| ·质粒文库的保存 | 第27-28页 |
| ·实验结果与分析 | 第28-31页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第28页 |
| ·基因组片段的部分酶切 | 第28-29页 |
| ·载体的处理及与目的片段的连接 | 第29-30页 |
| ·文库效价的检测 | 第30-31页 |
| ·文库质量的检测 | 第31页 |
| ·小结 | 第31-32页 |
| 第三章 Macrolactins生物合成基因簇的克隆与鉴定 | 第32-60页 |
| ·引言 | 第32-33页 |
| ·实验材料 | 第33-39页 |
| ·菌株和质粒 | 第33-35页 |
| ·引物 | 第35页 |
| ·培养基和生化试剂 | 第35-39页 |
| ·抗生素及其使用浓度 | 第39页 |
| ·实验试剂及仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-48页 |
| ·芽孢杆菌的培养及保藏 | 第39-40页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的小量提取 | 第40页 |
| ·芽孢杆菌中质粒DNA的小量提取 | 第40-41页 |
| ·芽孢杆菌的基因组DNA的提取 | 第41页 |
| ·大肠杆菌的感受态细胞制备(CaCl_2法)及转化 | 第41-42页 |
| ·B-9987胞内R-M反应液的制备 | 第42页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳中DNA片段的胶回收 | 第42-43页 |
| ·载体大片段的去磷酸化 | 第43页 |
| ·DNA连接反应 | 第43页 |
| ·大肠杆菌中质粒的快速检测 | 第43-44页 |
| ·芽孢杆菌电转化感受态的制备及其电转化 | 第44页 |
| ·PCR及相关技术 | 第44-45页 |
| ·同源重组质粒双交换技术 | 第45-46页 |
| ·HPLC及ESI-MS分析 | 第46-47页 |
| ·序列分析网站 | 第47页 |
| ·其他 | 第47-48页 |
| ·实验结果与分析 | 第48-59页 |
| ·海洋芽孢杆菌B-9987限制修饰系统的研究 | 第48-51页 |
| ·B-9987中Macrolactins基因簇的克隆 | 第51-53页 |
| ·基因bmmA中断质粒的构建 | 第53-54页 |
| ·海洋芽孢杆菌B-9987中bmmA基因双交换同源重组 | 第54-55页 |
| ·bmmA基因阻断菌株Macrolactins产量的检测 | 第55-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 结语与创新点 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第68页 |
