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深海细菌Demequina sp.JK4木聚糖酶的克隆、表征与异源表达分析

摘要第1-9页
Abstract第9-10页
缩略语表第10-11页
1 前言第11-25页
   ·木聚糖(xylan)第11-13页
     ·木聚糖的概念第11页
     ·木聚糖的结构第11-12页
     ·木聚糖的分类第12-13页
   ·木聚糖酶(xylanase)第13-25页
     ·木聚糖酶的定义第13-14页
     ·木聚糖酶的分类第14-15页
     ·木聚糖酶的结构域第15-18页
     ·木聚糖酶的应用第18-21页
     ·木聚糖酶基因的克隆和异源表达第21-22页
     ·芽孢杆菌木聚糖酶基因的研究进展第22-25页
2 材料和方法第25-45页
   ·材料第25-29页
     ·菌株和质粒第25页
     ·试剂第25-26页
     ·培养基第26页
       ·常用溶液第26-27页
     ·SDS-PAGE相关溶液第27-28页
     ·包涵体复性及纯化相关溶液第28页
     ·木聚糖酶活性检测相关溶液第28-29页
     ·仪器设备第29页
   ·方法第29-45页
     ·分子生物学常用操作第29-31页
     ·玉米芯木聚糖的提取第31-32页
     ·Demequina sp.JK4基因组文库的构建第32-33页
     ·具木聚糖酶活性的克隆的筛选第33-34页
     ·木聚糖酶基因序列的分析第34页
     ·木聚糖酶基因Mxyn10的克隆第34-36页
     ·木聚糖酶Mxyn10的表达与纯化第36-37页
     ·Mxyn10酶学性质的研究第37-40页
     ·产木聚糖酶细菌的筛选和鉴定第40-41页
     ·芽孢杆菌木聚糖酶基因的克隆第41-43页
     ·芽孢杆菌木聚糖酶活性的测定第43-44页
     ·枯草芽孢杆菌木聚糖酶基因的饱和突变第44-45页
3 结果第45-65页
   ·Demequina sp.JK4基因组文库的构建第45-47页
     ·载体的制备第45页
     ·Demequina sp.JK4基因组DNA片段的制备第45-47页
   ·木聚糖酶基因的筛选第47-48页
     ·文库的筛选第47-48页
   ·Mxyn10的测序及序列分析第48-51页
     ·重组质粒插入片段的测序第48-49页
     ·Mxyn10的序列比对分析第49-51页
     ·Mxyn10的二级结构第51页
   ·木聚糖酶基因Mxyn10的克隆与纯化第51-54页
     ·木聚糖酶基因Mxyn10的克隆第51-53页
     ·Mxyn10的纯化与检测第53-54页
   ·Mxyn10的酶学性质第54-59页
     ·木糖标准曲线第54页
     ·pH对Mxyn10活性的影响第54-56页
     ·温度对Mxyn10活性的影响第56-57页
     ·金属离子及化合物对Mxyn10活性的影响第57-58页
     ·Mxyn10的底物特异性第58-59页
     ·Mxyn10的动力学参数第59页
   ·产木聚糖酶芽孢杆菌的筛选第59-60页
   ·芽孢杆菌木聚糖酶基因的克隆第60-63页
     ·木聚糖酶基因的克隆第60-62页
     ·木聚糖酶基因的比对第62页
     ·芽孢杆菌木聚糖酶活性的比较第62-63页
   ·枯草芽孢杆菌木聚糖酶基因的突变第63-65页
4 讨论第65-69页
   ·海洋生物资源的开发与利用第65页
   ·Mxyn10的表达第65-66页
   ·Mxyn10的酶学性质及应用前景第66-69页
参考文献第69-76页
致谢第76-77页
附录1第77-78页
附录2第78-95页

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