| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩语表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-27页 |
| ·结核病流行现状 | 第10-11页 |
| ·DNA拓扑异构酶 | 第11-12页 |
| ·螺旋酶(Gyrase) | 第12-16页 |
| ·螺旋酶的结构 | 第13-14页 |
| ·螺旋酶的功能 | 第14-16页 |
| ·螺旋酶的作用机制 | 第16-18页 |
| ·螺旋酶ATPase的功能与活性位点研究进展 | 第18-21页 |
| ·螺旋酶的药物开发 | 第21-24页 |
| ·蛋白组学研究技术 | 第24-27页 |
| 2 研究目的与意义 | 第27-28页 |
| 3 材料与方法 | 第28-44页 |
| ·材料 | 第28-32页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·本实验所涉及质粒 | 第29-30页 |
| ·菌株 | 第30页 |
| ·酶、常用试剂盒及常用试剂 | 第30页 |
| ·溶液及缓冲液 | 第30-31页 |
| ·仪器 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-44页 |
| ·结核分枝杆菌螺旋酶B亚基及其系列缺失突变体的构建 | 第32-38页 |
| ·结核分枝杆菌螺旋酶B亚基缺失突变体的表达与纯化 | 第38-40页 |
| ·酵母双杂交检测GyrA、GyrB的突变体系列之间相互作用 | 第40-41页 |
| ·SPR方法检测结核分枝杆菌螺旋酶GyrA、GyrB之间的相互作用 | 第41-43页 |
| ·圆二色谱法来比较野生型GyrB和GyrB系列突变体之间的二级结构差异 | 第43-44页 |
| 4 结果与分析 | 第44-58页 |
| ·各缺失突变体的构建及蛋白质的表达纯化 | 第44-52页 |
| ·GyrB突变体的pET28a和pGADT7载体的构建 | 第44-49页 |
| ·GyrB突变体蛋白质表达与纯化 | 第49-52页 |
| ·酵母双杂交方法验证GyrA亚基与GyrB及其缺失突变体的相互作用 | 第52-53页 |
| ·圆二色谱技术分析GyrB缺失突变体之间二级结构的差异的 | 第53-55页 |
| ·表面等离子共振方法分析A亚基与缺失突变体之间的相互作用 | 第55-58页 |
| ·SPR检测GyrB动力学常数 | 第55-56页 |
| ·GyrB各缺失突变体结合活力大小比较 | 第56-58页 |
| 5 讨论 | 第58-62页 |
| ·ATPase域对GyrA和GyrB相互作用的影响 | 第58-60页 |
| ·缺失ATPase会对螺旋酶功能产生的影响 | 第60-62页 |
| 6 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
