新疆红肉苹果PGIP基因的克隆及原核表达
| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-18页 |
| ·新疆野苹果研究进展 | 第10-13页 |
| ·新疆野苹果及伊犁野果林的发生 | 第10-11页 |
| ·新疆野苹果与栽培苹果的亲缘关系 | 第11-12页 |
| ·群体遗传结构 | 第12页 |
| ·形态及化学成分的遗传多样性 | 第12-13页 |
| ·新疆野苹果的生存现状 | 第13页 |
| ·多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白（PGIP）研究进展 | 第13-17页 |
| ·PGIPs 的发现 | 第13页 |
| ·PGIP 与 PG 的相互作用 | 第13-14页 |
| ·PGIP 特异的分子结构 | 第14页 |
| ·PGIP 的表达及其调控 | 第14-16页 |
| ·PGIP 基因的异源表达研究 | 第16页 |
| ·PGIP 在生长发育中的功能 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·植物材料与处理 | 第18页 |
| ·菌株及载体 | 第18页 |
| ·主要药品试剂、试剂盒及仪器设备 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·抗生素 | 第18-19页 |
| ·PCR 引物合成与测序 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-29页 |
| ·植物基因组 DNA 提取 | 第19-20页 |
| ·植物总 RNA 的提取 | 第20-21页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第21页 |
| ·PGIP 基因全长序列的获得 | 第21-22页 |
| ·凝胶电泳中 DNA 片段的回收 | 第22页 |
| ·DNA 片段与克隆载体的连接 | 第22-23页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备和转化 | 第23页 |
| ·阳性克隆的筛选及测序 | 第23页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第23-24页 |
| ·生物信息学分析 | 第24-25页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第25-26页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第26页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第26-27页 |
| ·表达条件的筛选及优化 | 第27页 |
| ·本研究使用的软件 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-38页 |
| ·克隆及表达策略 | 第29-30页 |
| ·DNA 和 RNA 的提取及质量检测 | 第30页 |
| ·PGIP 基因全长序列的获得 | 第30-31页 |
| ·PGIP 核酸序列和氨基酸序列的分析 | 第31-36页 |
| ·测序结果 | 第31页 |
| ·信号肽预测 | 第31-34页 |
| ·cDNA 序列及其编码氨基酸序列同源性分析 | 第34-35页 |
| ·MsPgip 蛋白质亲水性和疏水性分析 | 第35-36页 |
| ·在大肠杆菌中的表达 | 第36-38页 |
| ·重组质粒的构建及重组子的鉴定 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| ·PGIP 基因的克隆 | 第38-39页 |
| ·PGIP 基因在大肠杆菌中的表达 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第49页 |
