抗虫基因cry2A~*对早粳稻的转化
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-20页 |
| ·苏云金芽孢杆菌及其杀虫晶体蛋白 | 第10-12页 |
| ·苏云金芽孢杆菌简介 | 第10页 |
| ·Bt 杀虫晶体蛋白及其基因的分类 | 第10-11页 |
| ·Bt 杀虫晶体蛋白杀虫机理 | 第11页 |
| ·转Bt 基因水稻研究概况 | 第11-12页 |
| ·植物基因工程常用启动子 | 第12-16页 |
| ·组成型启动子 | 第13-14页 |
| ·组织特异性启动子 | 第14-15页 |
| ·诱导型启动子 | 第15-16页 |
| ·水稻转化常用筛选标记基因 | 第16-17页 |
| ·nptⅡ | 第16页 |
| ·hpt | 第16页 |
| ·bar | 第16-17页 |
| ·密码子偏爱性及 Bt 基因密码子优化 | 第17-18页 |
| ·密码子偏爱性 | 第17-18页 |
| ·Bt 基因密码子优化 | 第18页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第18-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-35页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·细菌菌株 | 第20页 |
| ·基因、质粒和植物表达载体 | 第20-22页 |
| ·试剂盒、主要试剂和仪器设备 | 第22-23页 |
| ·试剂盒 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23-25页 |
| ·细菌培养基 | 第23页 |
| ·水稻遗传转化培养基 | 第23-25页 |
| ·目的基因的验证 | 第25-28页 |
| ·质粒DNA 的小量提取（碱裂解法） | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化(电击法) | 第25-26页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组质粒 PCR 验证 | 第27-28页 |
| ·根瘤农杆菌介导的水稻遗传转化体系及其优化 | 第28-31页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第28页 |
| ·愈伤组织的继代 | 第28页 |
| ·愈伤组织的预培养 | 第28页 |
| ·根瘤农杆菌的培养及处理 | 第28页 |
| ·根瘤农杆菌侵染转化水稻愈伤组织及共培养 | 第28-29页 |
| ·清菌和筛选 | 第29页 |
| ·抗性愈伤的预分化与转基因植株的再生 | 第29页 |
| ·遗传转化体系的优化 | 第29-31页 |
| ·转化水稻的分子检测 | 第31-35页 |
| ·T_0 代目的基因整合检测 | 第31-32页 |
| ·T_1 代外源基因表达检测 | 第32-35页 |
| 第3章 结果与分析 | 第35-47页 |
| ·目的基因的验证 | 第35-36页 |
| ·酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·PCR 验证 | 第36页 |
| ·根瘤农杆菌介导的水稻遗传转化体系优化 | 第36-40页 |
| ·不同基因型愈伤组织诱导率 | 第36-37页 |
| ·愈伤组织继代次数对抗性愈伤的影响 | 第37-38页 |
| ·侵染时间的确定 | 第38-39页 |
| ·清菌方法及筛选培养基抑菌性抗生素浓度 | 第39页 |
| ·PPT 有效筛选浓度 | 第39-40页 |
| ·分化培养基抑菌抗生素浓度 | 第40页 |
| ·转基因水稻植株的获得 | 第40-41页 |
| ·转基因植株T_0 代PCR 检测 | 第41-42页 |
| ·转基因植株T_1 代株系外源基因表达 | 第42-47页 |
| ·bar 基因表达 | 第42-45页 |
| ·cry2A~*基因表达的RT-PCR 检测 | 第45-47页 |
| 第4章 讨论 | 第47-54页 |
| ·农杆菌介导获得转cry2A~*基因粳稻的意义 | 第47页 |
| ·农杆菌介导粳稻遗传转化体系的改进 | 第47-50页 |
| ·提高外源基因表达的途径 | 第50-51页 |
| ·筛选标记基因 | 第51-52页 |
| ·T_1 代遗传规律分析 | 第52-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
