| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-29页 |
| 1 类胡萝卜素生物合成相关基因克隆及其基因工程研究进展 | 第11-22页 |
| ·类胡萝卜素的生物学功能 | 第11-12页 |
| ·类胡萝卜素的生物合成途径 | 第12-14页 |
| ·类胡萝卜素生物合成的主要酶及其基因 | 第14-19页 |
| ·类胡萝卜素基因工程 | 第19-22页 |
| ·问题及展望 | 第22页 |
| 2 洋桔梗组织培养和基因工程研究进展 | 第22-25页 |
| ·洋桔梗组织培养研究进展 | 第23-24页 |
| ·洋桔梗基因工程研究进展 | 第24-25页 |
| 3 cDNA文库构建研究进展 | 第25-28页 |
| ·经典cDNA文库的构建 | 第25页 |
| ·新型cDNA文库的构建 | 第25-27页 |
| ·cDNA文库技术的局限性 | 第27-28页 |
| 4 立题依据及技术路线 | 第28-29页 |
| ·立题依据 | 第28页 |
| ·技术路线 | 第28-29页 |
| 第二章 枸杞叶片cDNA文库的构建 | 第29-40页 |
| 1 材料与方法 | 第29-36页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-38页 |
| ·RNA的提取与mRNA的分离 | 第36-37页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第37页 |
| ·文库滴度及重组效率的测定 | 第37-38页 |
| ·cDNA插入片段的分析 | 第38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| 4 小结 | 第39-40页 |
| 第三章 枸杞类胡萝卜素合成酶基因PSY、LycB的克隆与序列分析 | 第40-55页 |
| 1 材料与方法 | 第40-45页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-53页 |
| ·PSY基因的扩增与克隆 | 第45-46页 |
| ·PSY基因序列分析 | 第46-48页 |
| ·PSY基因所编码的蛋白质特性分析 | 第48-49页 |
| ·LycB基因的扩增与克隆 | 第49页 |
| ·LycB基因序列分析 | 第49-52页 |
| ·LycB基因所编码的蛋白质特性分析 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-54页 |
| 4 小结 | 第54-55页 |
| 第四章 PSY基因和LycB基因植物表达载体的构建 | 第55-72页 |
| 1 材料与方法 | 第55-62页 |
| ·材料 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-69页 |
| ·PSY基因的PCR扩增 | 第62页 |
| ·PSY基因的T-vector克隆 | 第62-63页 |
| ·PSY基因植物表达载体的构建与鉴定 | 第63-65页 |
| ·LycB基因的PCR扩增 | 第65页 |
| ·LycB基因的T-vector克隆 | 第65-67页 |
| ·LycB基因植物表达载体的构建与鉴定 | 第67-69页 |
| ·农杆菌的检测 | 第69页 |
| 3 讨论 | 第69-70页 |
| 4 小结 | 第70-72页 |
| 第五章 洋桔梗叶片体外再生体系的建立 | 第72-79页 |
| 1 材料与方法 | 第72-74页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·技术路线 | 第72页 |
| ·试验方案及方法 | 第72-73页 |
| ·试验结果观察与数据统计 | 第73-74页 |
| 2 结果与分析 | 第74-77页 |
| ·6-BA和NAA对不定芽分化的影响 | 第74-75页 |
| ·赤霉素GA_3对不定芽株高生长的影响 | 第75-76页 |
| ·生长素对不定芽生根的影响 | 第76-77页 |
| ·再生苗的移栽 | 第77页 |
| 3 讨论 | 第77-78页 |
| 4 小结 | 第78-79页 |
| 第六章 利用农杆菌介导法将PSY基因导入洋桔梗的研究 | 第79-98页 |
| 1 材料与方法 | 第79-85页 |
| ·植物材料 | 第79页 |
| ·质粒和菌株 | 第79页 |
| ·洋桔梗叶片不定芽诱导及农杆菌转化所用培养基 | 第79页 |
| ·头孢霉素(Cef)浓度的确定 | 第79-80页 |
| ·卡那霉素(Km)适宜筛选浓度的确定 | 第80页 |
| ·影响农杆菌转化因素的试验 | 第80页 |
| ·洋桔梗遗传转化方法及步骤 | 第80-81页 |
| ·抗性植株的分子检测 | 第81-85页 |
| 2 结果与分析 | 第85-94页 |
| ·头孢霉素(Cef)浓度的确定 | 第85-86页 |
| ·筛选压的确定 | 第86-89页 |
| ·农杆菌侵染效果 | 第89页 |
| ·菌液浓度对叶片分化的影响 | 第89-90页 |
| ·侵染时间对叶片分化的影响 | 第90页 |
| ·共培养时间对叶片分化的影响 | 第90-91页 |
| ·AS浓度对叶片分化的影响 | 第91-92页 |
| ·农杆菌介导洋桔梗叶片转化再生流程 | 第92-93页 |
| ·抗性植株的分子检测 | 第93-94页 |
| 3 讨论 | 第94-97页 |
| 4 小结 | 第97-98页 |
| 结论 | 第98-99页 |
| 本试验的主要创新点 | 第99页 |
| 需要进一步研究的工作 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 附图 | 第108-110页 |
| 博士在读期间论文发表情况 | 第110页 |
