| 目录 | 第1-5页 |
| CONTENTS | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-34页 |
| ·猪细小病毒病流行及免疫预防研究进展 | 第11-19页 |
| ·PPV 的发生历史及在我国的流行情况 | 第11-12页 |
| ·PPV 的病原学特征 | 第12-16页 |
| ·PPV 的流行病学 | 第16页 |
| ·PPV 的疫苗研究进展 | 第16-19页 |
| ·猪瘟的流行及免疫防治研究进展 | 第19-33页 |
| ·CSFV 的病原学分类及生物学特征 | 第21-27页 |
| ·猪瘟疫苗研究进展 | 第27-31页 |
| ·猪瘟病毒抗原表位研究进展 | 第31-33页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-61页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·质粒与菌株 | 第34页 |
| ·病毒与细胞 | 第34页 |
| ·实验动物 | 第34页 |
| ·抗体及疫苗制剂 | 第34页 |
| ·试剂 | 第34-35页 |
| ·培养液及培养基 | 第35页 |
| ·实验主要仪器设备 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-61页 |
| ·猪细小病毒的分离及初步鉴定 | 第36-37页 |
| ·VP2 基因的克隆与序列测定 | 第37-41页 |
| ·猪瘟抗原表位E290 基因的扩增 | 第41-43页 |
| ·重组载体的构建(即pM-VP2) | 第43-47页 |
| ·重组转座载体PM-VP2-E290 的构建 | 第47-50页 |
| ·重组转座载体PM-VP2-E290 转染昆虫细胞 | 第50-56页 |
| ·重组杆状病毒在昆虫细胞中的表达及表达产物的检测 | 第56-59页 |
| ·表达产物的小鼠实验免疫研究 | 第59-61页 |
| 3 结果 | 第61-74页 |
| ·分离病毒的血清学检测结果 | 第61页 |
| ·VP2 基因的克隆与序列测定 | 第61-64页 |
| ·PPV VP2 基因的PCR 扩增结果 | 第61页 |
| ·重组质粒pMD–18T –VP2 的酶切鉴定 | 第61-62页 |
| ·重组质粒pMD–18T–VP2 的PCR 鉴定 | 第62-63页 |
| ·PPV VP2 基因的序列测定结果及序列分析 | 第63-64页 |
| ·猪瘟抗原表位E290 基因的扩增 | 第64-65页 |
| ·重组载体pM-VP2 的构建 | 第65-66页 |
| ·重组转座载体PM-VP2-E290 的构建 | 第66-67页 |
| ·重组质粒PM-VP2-E290 的酶切鉴定 | 第66页 |
| ·重组质粒PM-VP2-E290 的序列测定 | 第66-67页 |
| ·重组转座载体PM-VP2-E290 转染昆虫细胞 | 第67-70页 |
| ·PM-VP2-E290 纯化质粒纯度和含量的测定 | 第67-68页 |
| ·PM-VP2-E290 纯化质粒与杆状病毒共转染昆虫细胞 | 第68页 |
| ·重组杆状病毒的噬斑纯化与鉴定 | 第68-69页 |
| ·重组杆状病毒滴度的测定 | 第69-70页 |
| ·重组杆状病毒在昆虫细胞中的表达及表达产物的检测 | 第70-72页 |
| ·SDS-PAGE 检测表达产物 | 第70-71页 |
| ·免疫印迹(Western-blot)分析 | 第71页 |
| ·表达产物的Dot-ELISA 检测 | 第71-72页 |
| ·表达产物的免疫电镜观察 | 第72页 |
| ·表达产物的小鼠实验免疫研究 | 第72-74页 |
| ·免疫小鼠血清中PPV 特异性抗体的动态变化 | 第72-73页 |
| ·特异性CTL 对靶细胞的杀伤活性 | 第73-74页 |
| 4 讨论 | 第74-86页 |
| ·安全性病毒样颗粒亚单位疫苗的设计 | 第74-77页 |
| ·关于病毒样颗粒对小鼠免疫效力的研究 | 第77-78页 |
| ·体液免疫方面 | 第77页 |
| ·细胞免疫方面 | 第77-78页 |
| ·PPV VP2 基因的序列分析 | 第78-79页 |
| ·杆状病毒表达系统中的表达及免疫原性测定 | 第79-81页 |
| ·有关实验方法的讨论 | 第81-85页 |
| ·CSFV E290 多肽基因的扩增 | 第81页 |
| ·小片段核酸的回收与鉴定 | 第81-82页 |
| ·转染过程 | 第82-83页 |
| ·不同条件对表达产量的影响 | 第83-85页 |
| 5 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-100页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第100-107页 |
| 附录 | 第107-111页 |
| 致谢 | 第111页 |
