| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-12页 |
| 第一章 丙型肝炎病毒分子生物学 | 第12-27页 |
| ·HCV的基因组 | 第12-14页 |
| ·HCV分型 | 第14-15页 |
| ·病毒复制 | 第15-21页 |
| ·吸附和进入 | 第16-17页 |
| ·蛋白前体的翻译和加工 | 第17-20页 |
| ·RNA复制 | 第20页 |
| ·病毒粒子的组装和释放 | 第20-21页 |
| ·病毒—细胞相互作用 | 第21-24页 |
| ·Core蛋白 | 第22-23页 |
| ·E2蛋白 | 第23页 |
| ·NS3蛋白 | 第23页 |
| ·NS5A蛋白 | 第23-24页 |
| ·NS4A和NS4B蛋白 | 第24页 |
| ·研究HCV复制的模型系统 | 第24-27页 |
| ·动物模型发 | 第25页 |
| ·HCV复制子(replicon)系统 | 第25-27页 |
| 第二章 正链RNA病毒基因组的复制 | 第27-47页 |
| ·正链RNA病毒基因组的复制 | 第27-40页 |
| ·正链RNA病毒基因组RNA结构特点和多样性 | 第27-28页 |
| ·正链RNA病毒基因组的复制策略 | 第28-30页 |
| ·正链RNA病毒的RdRp | 第30-35页 |
| ·正链RNA病毒基因组复制时RNA合成的起始 | 第35-39页 |
| ·正链RNA病毒基因组复制的模板特异性 | 第39-40页 |
| ·HCV基因组复制 | 第40-45页 |
| ·HCV RdRp(HCV NS5B) | 第40-41页 |
| ·HCV RNA作为复制模板的特性 | 第41-43页 |
| ·HCV其它非结构蛋白在HCV基因组复制中的作用 | 第43页 |
| ·细胞分子在HCV基因组复制中的作用 | 第43-45页 |
| ·本研究的目的 | 第45-47页 |
| 第三章 HCV NS5B基因的克隆、表达和纯化 | 第47-62页 |
| ·材料和方法 | 第47-54页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·重组表达质粒pET-5B的构建 | 第48-51页 |
| ·重组质粒pET-5B在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第51-53页 |
| ·NS5B蛋白的纯化 | 第53-54页 |
| ·实验结果 | 第54-58页 |
| ·HCV NS5B基因的扩增以及重组质粒pET-5B的鉴定 | 第54-56页 |
| ·HCV NS5B基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的诱导表达、纯化及鉴定 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-62页 |
| 第四章 体外转录制备RNA模板 | 第62-74页 |
| ·材料和方法 | 第62-68页 |
| ·实验材料 | 第62-63页 |
| ·重组质粒pGEM-(+)3’T和pGEM-(-)3’T的构建 | 第63-66页 |
| ·体外转录制备HCV(+)3’T和(-)3’T RNA | 第66-68页 |
| ·实验结果 | 第68-72页 |
| ·重组质粒pGEM-(+)3’T的鉴定 | 第68-69页 |
| ·重组质粒pGEM-(-)3’T的鉴定 | 第69-70页 |
| ·体外转录制备RNA及其纯化 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| 第五章 以HCV正、负链3’末端序列为模板的RdRp反应及模板竞争性实验 | 第74-89页 |
| ·材料和方法 | 第74-81页 |
| ·实验材料 | 第74-75页 |
| ·体外RdRp反应 | 第75-76页 |
| ·RNA探针的制备 | 第76-77页 |
| ·斑点杂交检测RdRp反应产物及检验RNA探针的特异性 | 第77-78页 |
| ·Northern blot检测RdRp反应产物 | 第78-79页 |
| ·RT-PCR检测RdRp反应产物 | 第79-81页 |
| ·结果 | 第81-86页 |
| ·斑点杂交检测(+)3’T RNA和(-)3'T RNA为模板的RdRp反应产物 | 第81-82页 |
| ·RNA探针的特异性 | 第82页 |
| ·Northern blot检测(+)3’T RNA和(-)3’T RNA为模板的RdRp反应产物 | 第82-84页 |
| ·模板竞争性RdRp反应 | 第84页 |
| ·RT-PCR检测(+)3’T RNA和(-)3’T RNA为模板的RdRp反应产物 | 第84-86页 |
| ·讨论 | 第86-89页 |
| 第六章 HCV负链RNA3’末端序列和结构对合成正链RNA的影响 | 第89-100页 |
| ·材料和方法 | 第91-93页 |
| ·实验材料 | 第91页 |
| ·体外转录制备各种突变的(-)3’T RNA模板 | 第91-93页 |
| ·体外RdRp反应 | 第93页 |
| ·Northern blot检测RdRp反应产物 | 第93页 |
| ·实验结果 | 第93-97页 |
| ·体外转录制备的各种突变(-)3’T RNA模板 | 第93-94页 |
| ·(-)3’T RNA 3’端第一个茎环结构对RNA合成的影响 | 第94页 |
| ·(-)3’T RNA的3’C对RNA合成的影响 | 第94-97页 |
| ·讨论 | 第97-100页 |
| 附录：实验试剂配制 | 第100-105页 |
| 参考文献 | 第105-123页 |
| 在读期间发表的论文 | 第123-124页 |
| 后记 | 第124页 |
