| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-41页 |
| 第一节 微生物的铝毒性及抗性机理 | 第15-29页 |
| 1.Al对微生物的毒性 | 第16-20页 |
| ·Al的性质和毒性形式 | 第16-17页 |
| ·Al的跨膜运输 | 第17页 |
| ·Al对微生物生长的抑制 | 第17-18页 |
| ·Al的细胞学影响 | 第18-19页 |
| ·Al对生物大分子的影响 | 第19-20页 |
| 2.微生物的耐Al机理 | 第20-29页 |
| ·Al的排出与隔离 | 第21-22页 |
| ·有机酸在耐Al毒害中的作用 | 第22-23页 |
| ·某些金属离子和离子转运蛋白在耐Al毒害中的作用 | 第23-24页 |
| ·特定酶系统在耐Al毒害中的作用 | 第24-26页 |
| ·其它螯合作用在耐Al毒害中的作用 | 第26-27页 |
| ·其它耐Al机制 | 第27-29页 |
| 第二节 热激蛋白与生物耐热性 | 第29-41页 |
| 1.热激蛋白 | 第30-31页 |
| ·热激蛋白的分类及分布 | 第30页 |
| ·热激蛋白的物化特性 | 第30-31页 |
| 2.热激蛋白的产生及调控机制 | 第31-35页 |
| ·HSF的种类 | 第31-32页 |
| ·HSF的结构 | 第32-33页 |
| ·HSF调节的HS基因的转录 | 第33-34页 |
| ·HSP翻译水平的调节 | 第34-35页 |
| 3.热激蛋白在生物热休克应答中的作用 | 第35-39页 |
| ·HSP70家族的作用 | 第35-37页 |
| ·其它HSP家族的作用 | 第37-39页 |
| 4.与生物耐热性相关的其它因子 | 第39-41页 |
| 第二章 Al~(3+)对酵母的氧化毒性及酵母的抗性机制研究 | 第41-69页 |
| 1.前言 | 第41-43页 |
| 2.材料与方法 | 第43-49页 |
| ·菌株 | 第43-44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·酿酒酵母细胞在Al作用下的生长情况检测 | 第44-45页 |
| ·酵母菌株在Al作用下的生长量测定 | 第44页 |
| ·酵母菌株在Al作用下的相对生长率测定 | 第44页 |
| ·酵母细胞在Al作用后的FDA-PI染色观察 | 第44-45页 |
| ·酵母细胞在Al作用下的菌落生长情况观察 | 第45页 |
| ·酵母细胞Al~(3+)吸收情况分析 | 第45页 |
| ·酵母细胞在Al作用下的ROS水平测定 | 第45-46页 |
| ·胞内蛋白质浓度测定 | 第45-46页 |
| ·Al处理后胞内ROS水平测定 | 第46页 |
| ·Al作用下酵母细胞的膜脂过氧化测定 | 第46页 |
| ·Al作用后酵母菌株呼吸缺陷型的检出 | 第46-47页 |
| ·酵母菌株Al作用后胞内还原型谷胱苷肽(GSH)含量检测 | 第47页 |
| ·RT-PCR分析Al作用下GSH合成相关基因的转录水平 | 第47-48页 |
| ·酵母细胞内GSH含量改变后的耐Al能力分析 | 第48页 |
| ·GSH表达增强或抑制后酵母细胞在Al作用下的存活率测定 | 第48页 |
| ·GSH表达增强抑制后酵母细胞在Al作用下的菌落生长情况观察 | 第48页 |
| ·酵母细胞Al处理后的胞内SOD酶活性测定 | 第48-49页 |
| ·数据统计分析 | 第49页 |
| 3.结果 | 第49-59页 |
| ·Al对酿酒酵母细胞生长的毒性作用 | 第49-51页 |
| ·酵母细胞对Al~(3+)的吸收情况 | 第51-52页 |
| ·酵母细胞在Al胁迫下ROS水平的变化 | 第52-53页 |
| ·Al胁迫下酵母细胞的膜脂过氧化水平 | 第53-54页 |
| ·酵母菌株在Al胁迫下呼吸缺陷型的检出频率 | 第54-55页 |
| ·酵母菌株在Al胁迫下胞内还原型谷胱苷肽(GSH)含量变化 | 第55-56页 |
| ·Al胁迫后酵母GSH合成相关基因GSH1、YAP1转录水平的变化 | 第56-57页 |
| ·酵母胞内GSH合成受抑制(增强)后细胞耐Al性的变化 | 第57-58页 |
| ·酵母细胞Al胁迫后的胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性变化 | 第58-59页 |
| 4.讨论 | 第59-67页 |
| ·酵母Al毒的表现及对Al~(3+)的吸收特性 | 第59-61页 |
| ·Al对酵母细胞的氧化胁迫作用 | 第61-64页 |
| ·酵母在Al作用下的抗氧化机制 | 第64-67页 |
| 5.结论 | 第67-69页 |
| 第三章 耐Al酵母菌株的分离和海藻糖对Al耐性的作用研究 | 第69-84页 |
| 1.前言 | 第69-70页 |
| 2.材料与方法 | 第70-73页 |
| ·菌株 | 第70-71页 |
| ·培养基 | 第71页 |
| ·耐Al酵母菌株LT的诱变筛选 | 第71页 |
| ·酿酒酵母突变株LT和亲株LK的生长曲线测定 | 第71页 |
| ·酵母突变株LT和亲株LK在Al胁迫下的生长测定 | 第71-72页 |
| ·Al胁迫下相对生长率测定 | 第71页 |
| ·Al胁迫下平板菌落生长情况观察 | 第71-72页 |
| ·两种菌株的超微弱发光情况检测 | 第72页 |
| ·酵母菌株经Al胁迫后的胞内海藻糖测定 | 第72页 |
| ·酵母菌株经温和热处理后的海藻糖含量与耐Al性测定 | 第72-73页 |
| ·酵母菌株稳定期时的海藻糖含量与耐Al性测定 | 第73页 |
| ·数据统计分析 | 第73页 |
| 3.结果 | 第73-80页 |
| ·耐Al酵母突变株LT的获得 | 第73-74页 |
| ·突变株LT和亲株LK在Al胁迫下的生长特性 | 第74-75页 |
| ·两种菌株的超微弱发光强度差异 | 第75-76页 |
| ·酵母菌株在Al应激下的胞内海藻糖积累 | 第76-77页 |
| ·温和热诱导后酵母细胞的海藻糖积累及耐Al性变化 | 第77-79页 |
| ·酵母细胞在稳定期时的海藻糖积累及耐Al性变化 | 第79-80页 |
| 4.讨论 | 第80-83页 |
| ·酵母突变株LK具有较强的耐Al性和相应的物化特性 | 第80-81页 |
| ·海藻糖的积累与酵母细胞的耐Al作用紧密相关 | 第81-83页 |
| 5 结论 | 第83-84页 |
| 第四章 耐热酵母菌株的耐热机制研究 | 第84-102页 |
| 1 前言 | 第84-86页 |
| 2 材料与方法 | 第86-89页 |
| ·菌株 | 第86页 |
| ·培养基 | 第86-87页 |
| ·酵母细胞高温处理后的存活率测定 | 第87页 |
| ·酵母菌株的发酵力测定 | 第87页 |
| ·酵母细胞经温和热诱导后的耐热性测定 | 第87页 |
| ·胞内蛋白提取、SDS-PAGE及Western-blot分析 | 第87-88页 |
| ·电泳样品的制备 | 第87-88页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第88页 |
| ·Western-blot分析 | 第88页 |
| ·其它逆境因子作用后酵母的耐热性检测 | 第88-89页 |
| ·在不同葡萄糖含量的培养基中生长时的耐热性测定 | 第88页 |
| ·在不同pH条件下培养时的耐热性测定 | 第88页 |
| ·温和浓度H_2O_2作用后的耐热性测定 | 第88页 |
| ·温和浓度乙醇诱导后的耐热性测定 | 第88-89页 |
| ·数据统计分析 | 第89页 |
| 3.结果 | 第89-97页 |
| ·两种菌株热处理后的存活率差异 | 第89-90页 |
| ·两种菌株的耐高温发酵力差异 | 第90-91页 |
| ·酵母菌株经温和热诱导后的耐热性变化 | 第91-92页 |
| ·两种酵母菌株在热休克应答前后的蛋白图谱差异 | 第92-95页 |
| ·菌株单倍体子代的耐热性及蛋白表达特征 | 第95页 |
| ·其它逆境因子胁迫对酵母耐热性的影响 | 第95-97页 |
| 4.讨论 | 第97-101页 |
| ·以HSP70合成为标志的热休克应答反应与酿酒酵母的诱导耐热性密切相关 | 第97-98页 |
| ·HSP70的组成性表达与HU-TY-1菌株具有较高的固有耐热性密切相关 | 第98-100页 |
| ·不同逆境因子诱导的应激反应间存在一定的互通性 | 第100-101页 |
| 5.结论 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-120页 |
| 在读期间参加的主要科研项目及发表的论文 | 第120-121页 |
| 致谢 | 第121页 |
