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不同日龄仔猪抗菌肽和乳铁蛋白基因表达的差异及断奶日龄对其基因表达影响的研究

致谢第1-8页
英文缩写词第8-9页
中文摘要第9-11页
英文摘要第11-13页
第一章 前言第13-34页
   ·抗菌肽(蛋白)的研究进展第13-28页
     ·抗菌肽PR-39、Protegrin的研究进展第13-21页
     ·乳铁蛋白的研究进展第21-26页
     ·抗菌肽(蛋白)的研究应用前景第26-28页
   ·断奶仔猪腹泻的原因及预防措施第28-33页
     ·断奶仔猪腹泻发生的原因第28-31页
     ·预防和治疗断奶仔猪腹泻的措施第31-33页
   ·本研究的目的和意义第33-34页
第二章 仔猪骨髓抗菌肽(蛋白)基因和内标β-actin基因的克隆第34-50页
   ·克隆策略第34-35页
   ·试验材料第35-37页
     ·动物材料第35页
     ·菌种与载体第35页
     ·试剂与工具酶第35页
     ·引物第35页
     ·培养基及主要化学试剂的配制第35-37页
   ·试验方法第37-44页
     ·基因组总RNA的提取第37页
     ·反转录第37-38页
     ·聚合酶链式反应(PCR)反应第38-39页
     ·PCR产物电泳及割胶回收第39-40页
     ·PCR回收产物与pGEM-T easy Vector连接第40-41页
     ·感受态细胞的制备与目的DNA的转化第41页
     ·重组克隆筛选和重组质粒的提取与鉴定第41-43页
     ·重组DNA核苷酸序列测定分析第43-44页
   ·试验结果第44-48页
     ·抗菌肽(蛋白)和β-actin RT-PCR产物电泳结果第44-45页
     ·质粒DNA PCR检验结果第45-46页
     ·抗菌肽(蛋白)和β-actin测序结果第46-48页
   ·讨论第48-50页
第三章 不同日龄仔猪抗菌肽和乳铁蛋白基因表达的差异第50-62页
   ·试验材料第50页
     ·动物材料第50页
     ·试剂第50页
   ·试验方法第50-53页
     ·RNA的提取第50页
     ·反转录第50页
     ·聚合酶链式反应(PCR)第50-52页
     ·琼脂糖凝胶电泳第52-53页
     ·半定量RT-PCR分析第53页
   ·试验结果第53-58页
     ·循环数对抗菌肽(蛋白)基因表达的影响第53-55页
     ·Mg2+浓度对抗菌肽(蛋白)基因表达的影响第55页
     ·不同日龄抗菌肽(蛋白)基因表达的差异第55-58页
   ·讨论第58-62页
     ·RT-PCR方法的构建第58-60页
     ·不同日龄仔猪抗菌肽基因表达的差异第60-61页
     ·不同日龄仔猪乳铁蛋白基因表达的差异第61-62页
第四章 断奶日龄对仔猪抗菌肽(蛋白)基因表达的影响第62-71页
   ·试验材料第62页
     ·动物材料第62页
     ·试剂第62页
   ·试验方法第62页
   ·试验结果第62-69页
     ·断奶日龄对抗菌肽PR-39基因表达的影响第62-65页
     ·断奶日龄对抗菌肽Protegrin-1基因表达的影响第65-67页
     ·断奶日龄对乳铁蛋白基因表达的影响第67-69页
   ·讨论第69-71页
小结第71-72页
参考文献第72-83页
附录一 pGEM-T easy Vector第83-84页
附录二 pGEM-3Z Vector第84页

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