致谢 | 第1-8页 |
英文缩写词 | 第8-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
第一章 前言 | 第13-34页 |
·抗菌肽(蛋白)的研究进展 | 第13-28页 |
·抗菌肽PR-39、Protegrin的研究进展 | 第13-21页 |
·乳铁蛋白的研究进展 | 第21-26页 |
·抗菌肽(蛋白)的研究应用前景 | 第26-28页 |
·断奶仔猪腹泻的原因及预防措施 | 第28-33页 |
·断奶仔猪腹泻发生的原因 | 第28-31页 |
·预防和治疗断奶仔猪腹泻的措施 | 第31-33页 |
·本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
第二章 仔猪骨髓抗菌肽(蛋白)基因和内标β-actin基因的克隆 | 第34-50页 |
·克隆策略 | 第34-35页 |
·试验材料 | 第35-37页 |
·动物材料 | 第35页 |
·菌种与载体 | 第35页 |
·试剂与工具酶 | 第35页 |
·引物 | 第35页 |
·培养基及主要化学试剂的配制 | 第35-37页 |
·试验方法 | 第37-44页 |
·基因组总RNA的提取 | 第37页 |
·反转录 | 第37-38页 |
·聚合酶链式反应(PCR)反应 | 第38-39页 |
·PCR产物电泳及割胶回收 | 第39-40页 |
·PCR回收产物与pGEM-T easy Vector连接 | 第40-41页 |
·感受态细胞的制备与目的DNA的转化 | 第41页 |
·重组克隆筛选和重组质粒的提取与鉴定 | 第41-43页 |
·重组DNA核苷酸序列测定分析 | 第43-44页 |
·试验结果 | 第44-48页 |
·抗菌肽(蛋白)和β-actin RT-PCR产物电泳结果 | 第44-45页 |
·质粒DNA PCR检验结果 | 第45-46页 |
·抗菌肽(蛋白)和β-actin测序结果 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
第三章 不同日龄仔猪抗菌肽和乳铁蛋白基因表达的差异 | 第50-62页 |
·试验材料 | 第50页 |
·动物材料 | 第50页 |
·试剂 | 第50页 |
·试验方法 | 第50-53页 |
·RNA的提取 | 第50页 |
·反转录 | 第50页 |
·聚合酶链式反应(PCR) | 第50-52页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第52-53页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第53页 |
·试验结果 | 第53-58页 |
·循环数对抗菌肽(蛋白)基因表达的影响 | 第53-55页 |
·Mg2+浓度对抗菌肽(蛋白)基因表达的影响 | 第55页 |
·不同日龄抗菌肽(蛋白)基因表达的差异 | 第55-58页 |
·讨论 | 第58-62页 |
·RT-PCR方法的构建 | 第58-60页 |
·不同日龄仔猪抗菌肽基因表达的差异 | 第60-61页 |
·不同日龄仔猪乳铁蛋白基因表达的差异 | 第61-62页 |
第四章 断奶日龄对仔猪抗菌肽(蛋白)基因表达的影响 | 第62-71页 |
·试验材料 | 第62页 |
·动物材料 | 第62页 |
·试剂 | 第62页 |
·试验方法 | 第62页 |
·试验结果 | 第62-69页 |
·断奶日龄对抗菌肽PR-39基因表达的影响 | 第62-65页 |
·断奶日龄对抗菌肽Protegrin-1基因表达的影响 | 第65-67页 |
·断奶日龄对乳铁蛋白基因表达的影响 | 第67-69页 |
·讨论 | 第69-71页 |
小结 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-83页 |
附录一 pGEM-T easy Vector | 第83-84页 |
附录二 pGEM-3Z Vector | 第84页 |