| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 文献综述 | 第11-28页 |
| 第一章 猪瘟及猪瘟病毒的研究进展 | 第11-21页 |
| ·猪瘟研究进展 | 第11-13页 |
| ·猪瘟概述 | 第11页 |
| ·猪瘟的流行病学 | 第11-12页 |
| ·猪瘟的临床症状 | 第12页 |
| ·猪瘟的防控及存在的问题 | 第12-13页 |
| ·猪瘟病毒 | 第13-21页 |
| ·CSFV 的形态结构 | 第13-14页 |
| ·CSFV 的理化特征 | 第14页 |
| ·CSFV 的基因组结构和功能 | 第14-16页 |
| ·CSFV 的结构蛋白 | 第16-18页 |
| ·CSFV 的入侵和增殖 | 第18-19页 |
| ·CSFV 体外细胞培养 | 第19-21页 |
| 第二章 新型猪瘟疫苗研究进展 | 第21-28页 |
| ·传统疫苗 | 第21页 |
| ·猪瘟疫苗免疫失败的原因分析 | 第21-22页 |
| ·猪群的自身因素 | 第21-22页 |
| ·疫苗的因素 | 第22页 |
| ·免疫操作因素 | 第22页 |
| ·新型猪瘟疫苗研究进展 | 第22-28页 |
| ·亚单位疫苗 | 第22-23页 |
| ·重组活载体疫苗 | 第23-25页 |
| ·DNA 疫苗 | 第25-26页 |
| ·标记疫苗 | 第26-28页 |
| 试验研究 | 第28-52页 |
| 第三章 猪瘟病毒石门株E2 基因真核表达载体的构建与纯化 | 第28-40页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·载体与菌株 | 第28页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第28-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-35页 |
| ·E2 基因的扩增与回收 | 第30-32页 |
| ·目的基因的克隆 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组表达载体的构建和鉴定 | 第34页 |
| ·阳性重组表达质粒的大量提取和纯化 | 第34-35页 |
| ·结果 | 第35-38页 |
| ·RT-PCR 产物的电泳结果 | 第35-36页 |
| ·目的片段的克隆与鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组表达质粒的鉴定与纯化结果 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第四章 表达猪瘟病毒石门株E2 蛋白细胞株的建立及其免疫效果的检测 | 第40-52页 |
| ·材料 | 第40-44页 |
| ·质粒和细胞系 | 第40页 |
| ·培养基 | 第40-41页 |
| ·血清 | 第41页 |
| ·羊下丘脑粗提物的制备 | 第41页 |
| ·肝素 | 第41页 |
| ·30g/L 谷氨酰胺 | 第41页 |
| ·抗生素 | 第41页 |
| ·缓冲液 | 第41-42页 |
| ·消化液 | 第42页 |
| ·转染用试剂 | 第42-43页 |
| ·间接免疫荧光试剂 | 第43页 |
| ·间接ELISA 检测用试剂 | 第43页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·主要仪器设备 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·培养液的准备 | 第44页 |
| ·细胞的培养 | 第44页 |
| ·嘌呤霉素最佳筛选浓度的确定 | 第44页 |
| ·重组pBABE-puro-E2 质粒转染永生化猪脐血管内皮细胞及表达E2 基因阳性细胞的筛选 | 第44-45页 |
| ·FACS 分析筛选膜表面表达E2 蛋白的永生化猪脐血管内皮细胞 | 第45-46页 |
| ·阳性细胞的RT-PCR 鉴定 | 第46页 |
| ·阳性细胞的间接荧光染色鉴定 | 第46页 |
| ·小鼠采血及血清分离 | 第46页 |
| ·表达E2 囊膜蛋白的永生化猪脐血管内皮细胞免疫Balb/c 小鼠 | 第46-47页 |
| ·ELISA 检测 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-50页 |
| ·嘌呤霉素对永生化猪脐血管内皮细胞最佳筛选浓度的确定 | 第47页 |
| ·重组质粒转染永生化猪脐血管内皮细胞后阳性细胞的筛选及鉴定 | 第47-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
