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鸡肿瘤性疾病原位杂交诊断技术的建立与应用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 MDV、ALV-J 和REV 研究综述第11-27页
   ·基因组结构特点第11-13页
     ·MDV 的基因组结构特点第11-12页
     ·ALV-J 基因组结构特点第12页
     ·REV 基因组结构特点第12-13页
   ·流行病学第13-15页
     ·MDV 流行病学第13页
     ·ALV-J 流行病学第13-14页
     ·REV 流行病学第14-15页
   ·临床症状和病理变化第15-19页
     ·MDV 的临床症状和病理变化第15-16页
     ·ALV-J 的临床症状和病理变化第16-17页
     ·REV 的临床症状和病理变化第17-19页
   ·致病机制第19-22页
     ·MDV 致病机制第19-20页
     ·ALV 致病机制第20-21页
     ·REV 致病机制第21-22页
   ·疾病的诊断第22-24页
     ·MDV 的诊断第22-23页
     ·ALV-J 的诊断第23页
     ·REV 的诊断第23-24页
   ·防治措施第24-25页
     ·MDV 的防治第24-25页
     ·ALV-J 的防治第25页
     ·REV 的防治第25页
   ·MDV、ALV-J 和REV 的鉴别诊断第25-26页
   ·本研究的目的和意义第26-27页
第二章 原位杂交检测鸡三种肿瘤性疾病第27-45页
   ·实验材料第27-29页
     ·主要试验仪器第27-28页
     ·菌种及载体第28页
     ·病料第28页
     ·主要试剂及培养基配置第28-29页
   ·试验方法第29-39页
     ·病料的采集与处理第29-30页
     ·探针的制备第30-36页
     ·石蜡切片的制作第36-37页
     ·切片的原位杂交第37-39页
   ·结果第39-43页
     ·目的基因的扩增第39页
     ·重组质粒的PCR 鉴定第39页
     ·重组质粒的酶切鉴定第39-40页
     ·亚克隆的酶切鉴定第40页
     ·标记探针的电泳鉴定第40-41页
     ·探针标记效率和浓度测定结果第41页
     ·原位杂交检测结果第41-42页
     ·切片的HE 染色第42-43页
   ·讨论第43-45页
第三章ALV-J、MDV 和REV 相关基因遗传变异性分析第45-60页
   ·试验材料第45-46页
     ·菌种、载体第45页
     ·主要试剂第45-46页
     ·培养基的配制第46页
     ·主要仪器第46页
   ·实验方法第46-48页
     ·引物设计第46-47页
     ·病料DNA 的提取第47页
     ·PCR 扩增第47页
     ·PCR 产物的回收第47页
     ·回收产物与pMD18-T Vector 的连接第47页
     ·感受态细胞的制备(CaCl_2 法)第47页
     ·连接产物的转化第47页
     ·重组质粒的提取第47-48页
     ·重组质粒的菌液PCR 鉴定第48页
     ·重组质粒的酶切鉴定第48页
     ·重组质粒的序列测定第48页
     ·ALV-J gp85、gp37,MDV meq 和REV env 的变异分析第48页
   ·结果第48-58页
     ·目的基因的扩增第48页
     ·重组质粒的PCR 鉴定第48-49页
     ·重组质粒的酶切鉴定第49页
     ·序列测定结果第49-50页
     ·核酸序列同源性分析第50-51页
     ·氨基酸序列同源性分析第51-53页
     ·氨基酸序列比对第53-56页
     ·基因进化分析第56-58页
   ·讨论第58-60页
结论第60-61页
参考文献第61-68页
致谢第68-69页
作者简介第69页

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