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云南狂犬病野外毒株N和G基因的克隆、测序及酵母表达质粒的构建

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
文献综述第9-20页
 第一章 狂犬病病毒及其分子生物学研究进展第9-20页
   ·狂犬病概述第9-10页
   ·我国狂犬病流行病学特征第10页
   ·狂犬病病毒第10-12页
     ·RV 形态特征第10-12页
     ·RV 理化学特性第12页
   ·RV 的分子生物学研究第12-18页
     ·RV 基因分型第12-13页
     ·RV 基因型地理分布第13-14页
     ·RV 的基因组结构第14-15页
     ·RV 主要基因及其编码蛋白第15-18页
   ·关于酵母表达系统第18-20页
试验研究第20-50页
 第二章 云南狂犬病监测及病毒部分N 基因序列比较第20-34页
   ·试验材料第20-23页
     ·狂犬病疫苗弱毒株第20-21页
     ·野外样品第21页
     ·质粒与菌种第21页
     ·主要试剂第21页
     ·实验用具第21页
     ·仪器设备第21-22页
     ·试剂配制第22-23页
     ·引物设计与合成第23页
   ·试验方法第23-28页
     ·直接免疫荧光试验第23页
     ·病毒基因组RNA 的抽提第23-24页
     ·RT-PCR第24-25页
     ·套式PCR第25页
     ·PCR 产物凝胶电泳和结果观察第25页
     ·PCR 产物纯化第25-26页
     ·DH5α感受态细胞的制备第26页
     ·纯化PCR 产物与pMD18-T 载体的克隆及测序第26-28页
   ·结果与分析第28-32页
     ·直接免疫荧光试验第28-29页
     ·RT-PCR 和套式PCR第29-31页
     ·序列比对及系统发育分析第31-32页
   ·讨论与小结第32-34页
 第三章 云南4 株狂犬病毒N 和G 基因的克隆及测序第34-50页
   ·试验材料第34-36页
     ·毒株与样品第34页
     ·质粒与菌种第34-35页
     ·主要试剂第35页
     ·引物设计与合成第35-36页
   ·试验方法第36-40页
     ·病毒基因组RNA 的抽提第36页
     ·狂犬病病毒N、G 基因的扩增与纯化第36-37页
     ·纯化PCR 产物与pMD18-T 载体的克隆及测序第37页
     ·序列比对分析第37页
     ·重组质粒的构建第37-40页
   ·结果与分析第40-47页
     ·N 和G 基因扩增及纯化第40页
     ·N 基因序列比对及系统发育分析第40-43页
     ·G 基因序列比对及系统发育分析第43-47页
     ·重组质粒的构建与鉴定第47页
   ·讨论与小结第47-50页
结论第50-51页
参考文献第51-56页
主要缩略词第56-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页

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