摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
1 综述 | 第12-30页 |
·植物超氧化物歧化酶研究综述 | 第12-21页 |
·前言 | 第12页 |
·植物中氧自由基(ROS)的形成 | 第12-14页 |
·引起植物体产生 ROS 的环境因素 | 第14-16页 |
·植物中氧自由基(ROS)的清除 | 第16-17页 |
·植物中 Mn SOD 的理化性质与功能 | 第17-19页 |
·藻类 SOD 的研究进展 | 第19-21页 |
·SOD 的应用 | 第21页 |
·条斑紫菜的生物学特性 | 第21-28页 |
·前言 | 第21-22页 |
·条斑紫菜的形态结构特征 | 第22-24页 |
·条斑紫菜的生活史 | 第24-25页 |
·条斑紫菜的功能基因组学研究进展 | 第25-27页 |
·条斑紫菜的功能基因研究进展 | 第27-28页 |
·本研究的内容和意义 | 第28-30页 |
·本研究立项依据和意义 | 第28-29页 |
·本研究主要内容 | 第29-30页 |
2 条斑紫菜Mn SOD 的类型鉴定、原核表达及活性检测 | 第30-45页 |
·材料与方法 | 第30-36页 |
·材料 | 第30页 |
·试剂与仪器 | 第30页 |
·PySOD 粗酶液的制备 | 第30页 |
·PySOD 类型鉴定 | 第30-31页 |
·表达载体构建策略 | 第31-33页 |
·重组蛋白的表达与诱导条件的优 | 第33页 |
·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第33-34页 |
·Bradford 法测定蛋白含量 | 第34-35页 |
·SOD 比活力测定 | 第35-36页 |
·结果 | 第36-42页 |
·PyMn SOD 的氨基酸序列分析 | 第36-37页 |
·PySOD 类型的确定 | 第37-38页 |
·PyMn SOD 重组子pET-S 的PCR 鉴定与测序 | 第38-39页 |
·重组融合蛋白 PyMn SOD 的诱导表达与条件优化 | 第39-40页 |
·重组融合蛋白 PyMn SOD 的活力测定 | 第40-42页 |
·讨论 | 第42-45页 |
·条斑紫菜中仅含有Mn 型SOD | 第42-43页 |
·原核表达载体pET-30c(+)适用于 PyMn SOD 的高效表达 | 第43页 |
·Mn~(2+)能够诱导提高重组 PyMn SOD 的活性 | 第43-45页 |
3 条斑紫菜SOD 多克隆抗体制备、免疫印迹与细胞定位 | 第45-59页 |
·材料与方法 | 第45-49页 |
·材料 | 第45页 |
·试剂与仪器 | 第45页 |
·多克隆抗体的制备 | 第45页 |
·间接ELISA 测定多克隆抗体效价 | 第45-47页 |
·Western Blot | 第47-48页 |
·条斑紫菜细胞超薄切片的制备 | 第48-49页 |
·免疫胶体金标记 | 第49页 |
·条斑紫菜两种世代 Mn SOD 比活力的比较 | 第49页 |
·结果 | 第49-56页 |
·重组融合蛋白PyMn SOD 的多克隆抗体的效价 | 第49-51页 |
·重组融合蛋白 PyMn SOD 的免疫印迹分析(Western Blot) | 第51-52页 |
·孢子体 PyMn SOD 和配子体 PyMn SOD 的活性比较 | 第52页 |
·孢子体 PyMn SOD 的细胞定位 | 第52-54页 |
·配子体 PyMn SOD 的细胞定位 | 第54-56页 |
·讨论 | 第56-59页 |
·凝胶回收蛋白的方法制备多克隆抗体获得良好的特异性结果 | 第56页 |
·配子体PyMn SOD 和孢子体PyMn SOD 分别表现出对环境的适应 | 第56页 |
·PyMn SOD 定位于质外体中 | 第56-59页 |
4 失水胁迫对条斑紫菜配子体 Mn SOD 活性的影响 | 第59-67页 |
·材料与方法 | 第59-61页 |
·材料 | 第59页 |
·试剂与仪器 | 第59页 |
·样品处理 | 第59页 |
·丙二醛(MDA)含量的测定 | 第59-60页 |
·蛋白含量测定 | 第60页 |
·SOD 比活力测定 | 第60-61页 |
·Western Blot | 第61页 |
·结果 | 第61-64页 |
·水分胁迫与丙二醛(MDA)之间的关系 | 第61-62页 |
·失水胁迫对 PyMn SOD 表达量和活性的影响 | 第62-64页 |
·讨论 | 第64-67页 |
·丙二醛(MDA)可以用作衡量条斑紫菜配子体(叶状体)失水胁迫程度的指标 | 第64-65页 |
·PyMn SOD 在条斑紫菜配子体(叶状体)失水胁迫中的作用 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
个人简历 | 第77页 |
学术论文情况 | 第77页 |