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条斑紫菜质外体锰超氧化物歧化酶的基因表达分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
1 综述第12-30页
   ·植物超氧化物歧化酶研究综述第12-21页
     ·前言第12页
     ·植物中氧自由基(ROS)的形成第12-14页
     ·引起植物体产生 ROS 的环境因素第14-16页
     ·植物中氧自由基(ROS)的清除第16-17页
     ·植物中 Mn SOD 的理化性质与功能第17-19页
     ·藻类 SOD 的研究进展第19-21页
     ·SOD 的应用第21页
   ·条斑紫菜的生物学特性第21-28页
     ·前言第21-22页
     ·条斑紫菜的形态结构特征第22-24页
     ·条斑紫菜的生活史第24-25页
     ·条斑紫菜的功能基因组学研究进展第25-27页
     ·条斑紫菜的功能基因研究进展第27-28页
   ·本研究的内容和意义第28-30页
     ·本研究立项依据和意义第28-29页
     ·本研究主要内容第29-30页
2 条斑紫菜Mn SOD 的类型鉴定、原核表达及活性检测第30-45页
   ·材料与方法第30-36页
     ·材料第30页
     ·试剂与仪器第30页
     ·PySOD 粗酶液的制备第30页
     ·PySOD 类型鉴定第30-31页
     ·表达载体构建策略第31-33页
     ·重组蛋白的表达与诱导条件的优第33页
     ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第33-34页
     ·Bradford 法测定蛋白含量第34-35页
     ·SOD 比活力测定第35-36页
   ·结果第36-42页
     ·PyMn SOD 的氨基酸序列分析第36-37页
     ·PySOD 类型的确定第37-38页
     ·PyMn SOD 重组子pET-S 的PCR 鉴定与测序第38-39页
     ·重组融合蛋白 PyMn SOD 的诱导表达与条件优化第39-40页
     ·重组融合蛋白 PyMn SOD 的活力测定第40-42页
   ·讨论第42-45页
     ·条斑紫菜中仅含有Mn 型SOD第42-43页
     ·原核表达载体pET-30c(+)适用于 PyMn SOD 的高效表达第43页
     ·Mn~(2+)能够诱导提高重组 PyMn SOD 的活性第43-45页
3 条斑紫菜SOD 多克隆抗体制备、免疫印迹与细胞定位第45-59页
   ·材料与方法第45-49页
     ·材料第45页
     ·试剂与仪器第45页
     ·多克隆抗体的制备第45页
     ·间接ELISA 测定多克隆抗体效价第45-47页
     ·Western Blot第47-48页
     ·条斑紫菜细胞超薄切片的制备第48-49页
     ·免疫胶体金标记第49页
     ·条斑紫菜两种世代 Mn SOD 比活力的比较第49页
   ·结果第49-56页
     ·重组融合蛋白PyMn SOD 的多克隆抗体的效价第49-51页
     ·重组融合蛋白 PyMn SOD 的免疫印迹分析(Western Blot)第51-52页
     ·孢子体 PyMn SOD 和配子体 PyMn SOD 的活性比较第52页
     ·孢子体 PyMn SOD 的细胞定位第52-54页
     ·配子体 PyMn SOD 的细胞定位第54-56页
   ·讨论第56-59页
     ·凝胶回收蛋白的方法制备多克隆抗体获得良好的特异性结果第56页
     ·配子体PyMn SOD 和孢子体PyMn SOD 分别表现出对环境的适应第56页
     ·PyMn SOD 定位于质外体中第56-59页
4 失水胁迫对条斑紫菜配子体 Mn SOD 活性的影响第59-67页
   ·材料与方法第59-61页
     ·材料第59页
     ·试剂与仪器第59页
     ·样品处理第59页
     ·丙二醛(MDA)含量的测定第59-60页
     ·蛋白含量测定第60页
     ·SOD 比活力测定第60-61页
     ·Western Blot第61页
   ·结果第61-64页
     ·水分胁迫与丙二醛(MDA)之间的关系第61-62页
     ·失水胁迫对 PyMn SOD 表达量和活性的影响第62-64页
   ·讨论第64-67页
     ·丙二醛(MDA)可以用作衡量条斑紫菜配子体(叶状体)失水胁迫程度的指标第64-65页
     ·PyMn SOD 在条斑紫菜配子体(叶状体)失水胁迫中的作用第65-67页
参考文献第67-76页
致谢第76-77页
个人简历第77页
学术论文情况第77页

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