摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-29页 |
1 受体蛋白模建及其自我调节机制在疾病防治中的应用 | 第16-23页 |
·受体蛋白结构的计算机模建及其相应的药物设计思路 | 第16-18页 |
·受体蛋白结构的计算机模建 | 第16-17页 |
·基于受体结构的药物设计思路 | 第17-18页 |
·受体的自我调节及其相应的疾病防治手段 | 第18-22页 |
·受体的自我调节 | 第18-19页 |
·基于受体自我调节机制的疾病防治手段 | 第19-22页 |
·DNA 水平的阻滞途径 | 第19-20页 |
·RNA 水平的阻滞途径 | 第20-21页 |
·蛋白质水平的阻滞手段 | 第21-22页 |
·展望 | 第22-23页 |
2 质膜异位 F1F0 -ATP synthase 研究进展 | 第23-29页 |
·异位F1F0 -ATP synthase 的发现及其可能的异位机制 | 第24-25页 |
·异位F1F0 -ATP synthase 作为受体参与的一些生物学现象 | 第25-27页 |
·脂质代谢 | 第25-26页 |
·耦合因子6(Coupling Factor 6) | 第26页 |
·血管生成抑制素(angiostatin) | 第26-27页 |
·HSP60\90(Heat-Shock Protein 60\90) | 第27页 |
·WSSV-AP(white spot syndrome virus attachment protein) | 第27页 |
·展望 | 第27-29页 |
第二章 WSSV 结合蛋白 BP53(Binding Protein 53)部分抗原区段的原核表达,鉴定及其活性分析 | 第29-48页 |
1 WSSV 结合蛋白 BP53 的生物信息学初步分析及表达区段的确定 | 第29-30页 |
2 bp53~(-12.7)基因原核表达载体的构建 | 第30-34页 |
3 阳性目的单克隆的诱导表达与鉴定 | 第34-38页 |
4 结果 | 第38-45页 |
·重组蛋白的生物信息学初步分析 | 第38-40页 |
·引物设计 | 第40页 |
·质粒与目的片段bp53~(-12.7)的制备 | 第40-41页 |
·重组克隆的质粒提取 | 第41页 |
·重组克隆的双酶切鉴定、PCR 检测与DNA 测序 | 第41-42页 |
·L-ara 梯度诱导重组表达与电泳分析 | 第42-43页 |
·温度梯度诱导重组表达 | 第43-44页 |
·目的重组蛋白BP53~(-12.7)的免疫印迹检测 | 第44-45页 |
·目的重组蛋白BP53~(-12.7)的结合活性验证 | 第45页 |
5 讨论 | 第45-48页 |
第三章 WSSV 结合蛋白rBP53~(-12.7)多克隆抗体的制备与评价 | 第48-56页 |
1 试剂与仪器 | 第48-50页 |
2 方法 | 第50-52页 |
·抗原rBP53~(-12.7)的制备 | 第50页 |
·免疫途径与过程 | 第50-51页 |
·抗血清的纯化 | 第51页 |
·纯化后血清的特异性鉴定—Western-blot 印迹法 | 第51页 |
·纯化后血清的效价测定—ELISA 法 | 第51-52页 |
3 结果 | 第52-54页 |
·纯化的抗血清的ELISA 检测 | 第52页 |
·抗血清特异性的Western-blot 检测 | 第52-53页 |
·抗血清效价的ELISA 法测定 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
第四章 凡纳滨对虾中 BP53 基因的组织特异性表达分析 | 第56-66页 |
1 材料与方法 | 第56-60页 |
2 结果 | 第60-63页 |
·内参序列搜索结果 | 第60页 |
·引物设计 | 第60-61页 |
·bp53 基因的组织特异性表达分析 | 第61-63页 |
·bp53 与内参基因Real Time-PCR 扩增产物的溶解曲线分析 | 第61页 |
·bp53 与内参基因的扩增效率对比 | 第61-62页 |
·bp53 基因的组织特异性表达分析 | 第62-63页 |
3 讨论 | 第63-66页 |
第五章 三种 WSSV 敏感宿主 ATP synthase βsubunit 基因的克隆与分析 | 第66-87页 |
1 3 种 WSSV 敏感宿主 ATP synthaseβsubunit 基因全长的克隆. | 第67-70页 |
2 ATP synthase βsubunit 基因序列分析与系统树比对分析.. | 第70-71页 |
3 结果 | 第71-84页 |
·序列信息 | 第71-72页 |
·序列比对分析 | 第72页 |
·改进的简并引物设计方法 | 第72-73页 |
·3'和5' RACE 套式引物的设计 | 第73页 |
·RNA 提取结果 | 第73-74页 |
·简并引物扩增结果 | 第74-76页 |
·3' RACE 扩增结果 | 第76-77页 |
·5' RACE 扩增结果 | 第77-79页 |
·五种虾的ATP synthase βsubunit 基因序列分析 | 第79-80页 |
·虾类与其它物种ATP synthase βsubunit 序列的系统进化树分析 | 第80-84页 |
·ATP synthase βsubunit 基因的系统进化树分析 | 第80-82页 |
·ATP synthase βsubunit 蛋白质序列的进化树构建与分析 | 第82-84页 |
4 讨论 | 第84-87页 |
结论 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-96页 |
发表文章目录 | 第96-97页 |
致谢 | 第97-98页 |