| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 实验一 贵州省猪传染性胸膜肺炎血清学调查 | 第10-14页 |
| 前言 | 第10页 |
| 1 材料 | 第10页 |
| ·检测试剂 | 第10页 |
| ·猪血清样本 | 第10页 |
| ·主要仪器 | 第10页 |
| 2 方法 | 第10-11页 |
| 3 结果 | 第11-12页 |
| ·血清学调查结果 | 第11-12页 |
| ·非免疫猪群不同饲养方式检测 | 第12页 |
| ·非免疫猪群不同年龄阶段检测 | 第12页 |
| 4 讨论 | 第12-14页 |
| 实验二 猪胸膜肺炎放线杆菌检测技术研究 | 第14-20页 |
| 前言 | 第14页 |
| 1 材料 | 第14-15页 |
| ·实验试剂 | 第14页 |
| ·实验菌株 | 第14页 |
| ·主要仪器 | 第14-15页 |
| 2 方法 | 第15-17页 |
| ·引物合成 | 第15页 |
| ·菌种复苏 | 第15-16页 |
| ·PCR反应体系及条件 | 第16页 |
| ·不同DNA提取方法比较 | 第16页 |
| ·不同血清型APP的PCR | 第16-17页 |
| ·PCR特异性、敏感性试验 | 第17页 |
| 3 结果 | 第17-18页 |
| ·不同DNA提取方法比较 | 第17页 |
| ·不同血清型APP的PCR | 第17-18页 |
| ·PCR特异性试验 | 第18页 |
| ·PCR敏感性试验 | 第18页 |
| 4 讨论 | 第18-20页 |
| 实验三 猪胸膜肺炎放线杆菌PCR分群研究 | 第20-25页 |
| 前言 | 第20页 |
| 1 材料 | 第20-21页 |
| ·实验菌株 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21页 |
| 2 方法 | 第21-23页 |
| ·DNA提取 | 第21页 |
| ·OmLA同源性分析 | 第21页 |
| ·引物设计 | 第21-22页 |
| ·多重PCR扩增 | 第22页 |
| ·特异性检测 | 第22-23页 |
| 3 结果 | 第23页 |
| ·多重PCR扩增 | 第23页 |
| ·多重PCR特异性 | 第23页 |
| 4 讨论 | 第23-25页 |
| 实验四 猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ基因克隆与序列测定 | 第25-32页 |
| 前言 | 第25页 |
| 1 材料 | 第25-26页 |
| ·菌株和载体 | 第25页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-30页 |
| ·培养基的制备 | 第26页 |
| ·DNA的提取 | 第26页 |
| ·质粒提取试剂 | 第26页 |
| ·ApxⅣ引物设计 | 第26-27页 |
| ·ApxⅣ的PCR扩增 | 第27页 |
| ·PCR产物的回收 | 第27-28页 |
| ·T载体的连接 | 第28页 |
| ·感受态细胞制备 | 第28-29页 |
| ·重组质粒转化与酶切 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-31页 |
| ·PCR扩增 | 第30页 |
| ·双酶切 | 第30-31页 |
| ·序列测定 | 第31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 实验五 猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ基因原核表达及其初步鉴定 | 第32-41页 |
| 前言 | 第32页 |
| 1 材料 | 第32-33页 |
| ·菌株和载体 | 第32页 |
| ·实验试剂 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE配制 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-36页 |
| ·质粒提取 | 第33页 |
| ·质粒双酶切 | 第33页 |
| ·表达 | 第33-34页 |
| ·制备感受态细胞及转化 | 第34页 |
| ·重组质粒PCR | 第34页 |
| ·诱导表达 | 第34-35页 |
| ·表达条件优化 | 第35页 |
| ·Western Blotting分析 | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-39页 |
| ·质粒转化 | 第36页 |
| ·重组质粒PCR | 第36-37页 |
| ·重组载体BL21表达 | 第37页 |
| ·表达条件优化 | 第37-38页 |
| ·Western Blotting | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 综述 | 第42-51页 |
| 主要参考文献 | 第51-54页 |
| 附录一 发表文章 | 第54页 |
| 附录二 本文用到的部分英文缩写及含义说明 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |