| 内容提要 | 第1-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-14页 |
| ·选题的目的和意义 | 第9-12页 |
| ·研究内容 | 第12页 |
| ·采用的研究方法和技术路线 | 第12-13页 |
| ·研究方法 | 第12-13页 |
| ·技术路线 | 第13页 |
| ·本研究的特色和创新之处 | 第13-14页 |
| 第2章 人参、发根及反义RNA 技术概述 | 第14-40页 |
| ·人参 | 第14-15页 |
| ·人参分布及市场 | 第14页 |
| ·人参产品 | 第14-15页 |
| ·人参皂苷 | 第15-25页 |
| ·人参皂苷的药理活性 | 第15-18页 |
| ·人参皂苷的结构分类及命名 | 第18页 |
| ·人参皂苷的生物合成途径 | 第18-23页 |
| ·人参皂苷的提取纯化和测定 | 第23-24页 |
| ·人参皂苷的生物转化 | 第24-25页 |
| ·人参细胞、组织及发根培养 | 第25-26页 |
| ·植物发根研究进展 | 第26-35页 |
| ·发根诱导 | 第26-28页 |
| ·发根植株再生 | 第28-29页 |
| ·发根次级代谢产物生产 | 第29-31页 |
| ·发根基因工程 | 第31-32页 |
| ·发根的其它用途 | 第32页 |
| ·发根的大规模培养 | 第32-35页 |
| ·反义RNA 技术 | 第35-40页 |
| ·反义RNA 在生物体内的作用机制 | 第35-36页 |
| ·反义 RNA 技术 | 第36-38页 |
| ·反义RNA 技术在植物领域的应用 | 第38-40页 |
| 第3章 人参CS 基因片段的克隆 | 第40-56页 |
| ·引言 | 第40页 |
| ·实验材料及仪器 | 第40-41页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·仪器 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-48页 |
| ·培养基及试剂的配制 | 第41-44页 |
| ·人参发根的培养和菌株的低温保存 | 第44页 |
| ·人参发根总 RNA 的提取 | 第44页 |
| ·RT-PCR 及目的产物回收 | 第44-47页 |
| ·感受态大肠杆菌制备 | 第47页 |
| ·克隆载体重组、转化和鉴定 | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-55页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第48-49页 |
| ·PCR 扩增及目的片段的回收 | 第49-52页 |
| ·目的DNA 片段的克隆和酶切鉴定 | 第52-55页 |
| ·本章小结 | 第55-56页 |
| 第4章 CS 基因反义表达载体构建及发根农杆菌 A4 的转化 | 第56-67页 |
| ·引言 | 第56页 |
| ·材料和方法 | 第56-64页 |
| ·菌种及试剂 | 第56页 |
| ·仪器 | 第56-57页 |
| ·培养基及试剂配制 | 第57-59页 |
| ·CS 反义表达载体构建方法 | 第59-60页 |
| ·菌种的活化 | 第60-62页 |
| ·质粒pBI121 和 CS-pMD18-T 的提取 | 第62页 |
| ·反义表达载体构建和发根农杆菌A4 的转化 | 第62-63页 |
| ·发根农杆菌A4 阳性克隆的鉴定 | 第63-64页 |
| ·发根农杆菌A4 阳性克隆的保藏 | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-66页 |
| ·pBI121 载体 DNA 和目的片段 DNA 的制备 | 第64-65页 |
| ·连接、转化及农杆菌A4 阳性克隆的筛选 | 第65-66页 |
| ·本章小结 | 第66-67页 |
| 第5章 反义CS 发根体系的建立 | 第67-76页 |
| ·引言 | 第67页 |
| ·材料和方法 | 第67-72页 |
| ·植物材料、菌种和试剂 | 第67-68页 |
| ·仪器 | 第68页 |
| ·培养基及试剂配制 | 第68-69页 |
| ·转化用发根农杆菌的菌液制备 | 第69-70页 |
| ·人参发根诱导 | 第70页 |
| ·诱导出的人参发根的除菌 | 第70页 |
| ·杂交探针制备 | 第70-71页 |
| ·人参发根 Northern 印迹分析 | 第71-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-75页 |
| ·反义CS 人参发根体系的建立 | 第72-73页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第73-75页 |
| ·本章小结 | 第75-76页 |
| 第6章 反义CS 人参发根的生长和皂苷合成 | 第76-91页 |
| ·引言 | 第76页 |
| ·材料和方法 | 第76-80页 |
| ·试剂 | 第76页 |
| ·仪器 | 第76-77页 |
| ·培养基及试剂配制 | 第77页 |
| ·人参发根生长曲线测定 | 第77-78页 |
| ·人参发根总皂苷提取及测定 | 第78页 |
| ·DS 和CS 酶活性分析 | 第78-79页 |
| ·2,3-氧化角沙烯含量分析 | 第79页 |
| ·人参发根植物固醇含量分析 | 第79-80页 |
| ·结果与分析 | 第80-89页 |
| ·反义CS 人参发根的生长和形态变化 | 第80-81页 |
| ·反义CS 人参发根皂苷含量分析 | 第81-83页 |
| ·人参发根植物固醇含量分析 | 第83页 |
| ·发根DS、CS 酶活和2,3-氧化角沙烯含量分析 | 第83-89页 |
| ·本章小结 | 第89-91页 |
| 第7章 全文总结 | 第91-94页 |
| 参考文献 | 第94-112页 |
| 附录 | 第112-113页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文及取得的科研成果 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 摘要 | 第115-118页 |
| ABSTRACT | 第118-121页 |
