| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| ·研究神经细胞迁移机制的意义 | 第10页 |
| ·神经细胞迁移的简要历史回顾 | 第10-13页 |
| ·神经细胞主动迁移学说的确立 | 第10-11页 |
| ·神经细胞迁移的主要方式 | 第11页 |
| ·神经细胞迁移的分子机制 | 第11-13页 |
| ·发育过程中的GnRH 神经细胞迁移 | 第13-16页 |
| ·Myo X 的作用概述 | 第16-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-31页 |
| ·动物材料和细胞株 | 第20页 |
| ·表达载体和干涉质粒 | 第20-21页 |
| ·表达载体 | 第20页 |
| ·Myo X siRNA 载体构建 | 第20-21页 |
| ·化学试剂 | 第21-22页 |
| ·抗体 | 第22页 |
| ·仪器 | 第22页 |
| ·冰冻切片 | 第22-23页 |
| ·切片前准备 | 第22页 |
| ·冰冻切片免疫组化 | 第22-23页 |
| ·大鼠鼠尾胶原的制备 | 第23页 |
| ·培养细胞的免疫荧光染色 | 第23-24页 |
| ·免疫印迹分析 | 第24-25页 |
| ·RIPA 缓冲液配制 | 第24页 |
| ·细胞蛋白抽提 | 第24页 |
| ·Western blot 分析 | 第24-25页 |
| ·细胞的培养及转染 | 第25-26页 |
| ·NLT 细胞的培养条件 | 第25页 |
| ·NLT 细胞的转化 | 第25-26页 |
| ·稳定转染细胞系的筛选 | 第26页 |
| ·细胞与基质间粘附的测定 | 第26-27页 |
| ·细胞总RNA 的提取和实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
| ·细胞总RNA 的提取 | 第27页 |
| ·去除DNA 污染 | 第27页 |
| ·cDNA 合成 | 第27-28页 |
| ·Real-time PCR | 第28页 |
| ·Real-time PCR 数据处理及统计学分析 | 第28页 |
| ·细胞团制备与细胞迁移立体凝胶分析 | 第28-30页 |
| ·细胞团制备 | 第28-29页 |
| ·胶原凝胶的配制 | 第29页 |
| ·细胞团包埋与细胞凝胶内迁移 | 第29页 |
| ·细胞凝胶内迁移统计分析方法 | 第29-30页 |
| ·细胞迁移的Transwell 分析 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-46页 |
| ·Myo X 与DCC 在GnRH 神经细胞中的表达 | 第31页 |
| ·Myo X 调节丝状伪足在NLT 细胞中的分布 | 第31-33页 |
| ·Myo X-siRNA 减低Myo X 表达 | 第33-35页 |
| ·减低内源性Myo X 的表达降低细胞的迁移能力 | 第35页 |
| ·减低内源性Myo X 表达抑制NLT 细胞的化学趋向性 | 第35-37页 |
| ·过表达无头形式 Myo X 细胞系的建立 | 第37页 |
| ·无头形式Myo X 抑制细胞的迁移 | 第37-38页 |
| ·无头形式Myo X 抑制了GnRH 细胞的化学趋向性 | 第38-39页 |
| ·无头形式Myo X 降低NLT 细胞与胞外基质的粘附能力 | 第39-41页 |
| ·无头形式的Myo X 降低NLT 细胞与细胞间的粘附能力 | 第41页 |
| ·无头形式的Myo X 影响GnRH 细胞中NCAM 蛋白的表达 | 第41-43页 |
| ·Netrin-1 能够诱导NLT 细胞定向迁移 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第60页 |
