| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 第一部分 研究背景 | 第9-42页 |
| 一、组蛋白乙酰化修饰与真核生物基因的转录调控 | 第9-28页 |
| (一) 真核生物的染色质结构与转录调控的关系 | 第9-12页 |
| (二) 组蛋白乙酰化修饰与转录调控 | 第12-18页 |
| (三) 组蛋白乙酰转移酶p300/CBP复合物的研究进展 | 第18-27页 |
| (四) 组蛋白乙酰化修饰与真核生物转录调控的关系 | 第27-28页 |
| 二、组蛋白去乙酰化修饰与真核生物基因的转录调控 | 第28-34页 |
| (一) 组蛋白去乙酰化酶的分类 | 第28-29页 |
| (二) 组蛋白去乙酰化酶的生物学功能 | 第29-33页 |
| (三) HDAC抑制剂 | 第33-34页 |
| 三、人PTTG基因及其转录调控机制的研究进展 | 第34-40页 |
| (一) PTTG基因的发现 | 第34页 |
| (二) hPTTG基因的定位 | 第34-35页 |
| (三) hPTTG基因结构及表达 | 第35-37页 |
| (四) PTTG的作用机制 | 第37-39页 |
| (五) PTTG与垂体肿瘤 | 第39-40页 |
| (六) PTTG的研究展望 | 第40页 |
| 四、本论文研究的内容和意义 | 第40-42页 |
| (一) 立题依据 | 第40-41页 |
| (二) 本文的研究内容和意义 | 第41-42页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第42-54页 |
| 一、实验材料 | 第42-43页 |
| (一) 质粒 | 第42页 |
| (二) hPTTG启动子报告基因质粒的构建 | 第42页 |
| (三) 蛋白质和抗体 | 第42页 |
| (四) 哺乳动物细胞系 | 第42页 |
| (五) 试剂 | 第42-43页 |
| 二、实验方法 | 第43-54页 |
| Ⅰ.分子生物学实验方法 | 第43-50页 |
| (一) 分子克隆 | 第43页 |
| (二) DNA的琼脂糖凝胶电泳 | 第43页 |
| (三) 质粒大量制备的方法 | 第43-45页 |
| (四) 哺乳动物细胞总RNA的提取和反转录 | 第45-46页 |
| (五) 逆转录 | 第46页 |
| (六) PCR和荧光实时定量realtime PCR | 第46-47页 |
| (七) 染色质免疫沉淀实验 | 第47-49页 |
| (八) RNA干涉 | 第49-50页 |
| (九) 哺乳动物细胞(HeLa)的基因组DNA提取 | 第50页 |
| Ⅱ.细胞生物学实验方法 | 第50-53页 |
| (一) 哺乳动物细胞系的培养 | 第50页 |
| (二) 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测 | 第50-51页 |
| (三) 蛋白质的Western Blotting分析 | 第51-53页 |
| Ⅲ.统计分析 | 第53-54页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第54-64页 |
| 一、hPTTG报告基因质粒的构建及鉴定 | 第54-55页 |
| 二、组蛋白乙酰转移酶p300/CBP在hPTTG转录调控中的作用 | 第55-62页 |
| (一) 腺病毒癌蛋白E1A抑制了p300介导的hPTTG启动子活性 | 第55-56页 |
| (二) p300/CBP参与了hPTTG的转录激活 | 第56-58页 |
| (三) p300参与hPTTG转录激活的机制 | 第58-62页 |
| 三、组蛋白乙酰转移酶p/CAF在hPTTG转录调控中的作用 | 第62页 |
| 四、组蛋白去乙酰化酶在hPTTG转录调控中的作用 | 第62-64页 |
| 第四部分 讨论 | 第64-69页 |
| 一、组蛋白乙酰转移酶p300/CBP、p/CAF和组蛋白去乙酰化酶HDAC3及HDAC6都参与了hPTTG的转录调控 | 第64-65页 |
| 二、p300通过NF-YA/YB招募到hPTTG启动子区域 | 第65页 |
| 三、组蛋白乙酰转移酶p300参与hPTTG基因表达调控的分子机制 | 第65-67页 |
| (一) 组蛋白乙酰转移酶p300的HAT活性在hPTTG基因表达调控中起重要作用 | 第65-66页 |
| (二) p300通过乙酰化转录因子从而促进hPTTG基因的转录 | 第66-67页 |
| 四、组蛋白可逆的乙酰化修饰参与了hPTTG基因的转录调控过程 | 第67页 |
| 五、hPTTG基因表达调控的简单模型 | 第67-69页 |
| 主要结论和创新点 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-84页 |
| 附录 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第86页 |
