中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-11页 |
英文缩写词 | 第11-12页 |
前言 | 第12-32页 |
一、整合素概述 | 第13-21页 |
(一) 整合素家族的组成和结构 | 第13页 |
(二) 白细胞中表达的整合素 | 第13-15页 |
(三) β2 整合素的配体 | 第15-16页 |
(四) β2 整合素的生理功能 | 第16-21页 |
1. β2 整合素与白细胞骨架重排 | 第16-17页 |
2. β2 整合素与白细胞迁移 | 第17页 |
3. β2 整合素与白细胞的炎症效应 | 第17页 |
4. β2 整合素介导的信号事件 | 第17-21页 |
(1) β2 整合素inside-out 信号 | 第17-18页 |
(2) β2 整合素outside-in 信号 | 第18-21页 |
二、c-Abl 激酶概述 | 第21-27页 |
(一) c-Abl 激酶的基本结构及细胞定位 | 第21-22页 |
(二) c-Abl 激酶活性调节 | 第22-23页 |
(三) c-Abl 激酶生理功能 | 第23-27页 |
1. c-Abl 激酶与细胞凋亡 | 第23-24页 |
2. c-Abl 激酶与细胞周期调控 | 第24-25页 |
3. c-Abl 激酶与基因转录调控 | 第25页 |
4. c-Abl 激酶与细胞信号转导 | 第25页 |
5. c-Abl 激酶的抑制剂 | 第25-27页 |
三、talin 概述 | 第27-29页 |
(一) talin 的结构及分布 | 第27页 |
(二) talin 与整合素活化 | 第27-29页 |
四、Vav 概述 | 第29-31页 |
(一) Vav 的结构及分布 | 第29-30页 |
(二) Vav 的功能 | 第30-31页 |
五、本论文的研究目的和意义 | 第31-32页 |
材料与方法 | 第32-45页 |
一、实验材料 | 第32-34页 |
(一) 菌株、细胞、质粒和抗体 | 第32页 |
(二) 试剂和酶类 | 第32-33页 |
(三) c-Abl 激酶干涉质粒的合成 | 第33页 |
(四) 主要仪器 | 第33页 |
(五) 主要溶液和培养基 | 第33-34页 |
二、实验方法 | 第34-45页 |
(一) 目的基因片段的扩增 | 第34-35页 |
(二) 表达质粒的构建和测序 | 第35-38页 |
(三) 蛋白质的表达 | 第38-40页 |
(四) 中性粒细胞的提取 | 第40页 |
(五) HL-60 细胞培养及分化 | 第40页 |
(六) 免疫沉淀及激酶反应实验 | 第40-42页 |
(七) Far Western 实验 | 第42页 |
(八) GST pull-down 实验 | 第42-43页 |
(九) 体外蛋白质结合实验 | 第43页 |
(十) 免疫荧光双标记实验 | 第43页 |
(十一) 流式细胞分析实验 | 第43页 |
(十二) 细胞静止粘附检测 | 第43-44页 |
(十三) 细胞氧呼吸爆发实验 | 第44页 |
(十四) 细胞转染与c-Abl 激酶的干涉 | 第44页 |
(十五) 数据分析 | 第44-45页 |
实验结果与分析 | 第45-62页 |
一、中性粒细胞的粘附能够活化c-Abl 酪氨酸激酶 | 第45-47页 |
二、c-Abl 激酶参与了β2 整合素介导的中性粒细胞的稳定粘附和伸展 | 第47-50页 |
(一) c-Abl 激酶的抑制影响了β2 整合素介导的中性粒细胞的稳定粘附 | 第47-48页 |
(二) c-Abl 激酶的干涉影响了β2 整合素介导的中性粒细胞的稳定粘附 | 第48-49页 |
(三) c-Abl 激酶参与β2 整合素介导的中性粒细胞的呼吸爆发 | 第49-50页 |
三、c-Abl 激酶不参与TNF-α引起的β2 整合素的活化 | 第50-51页 |
四、c-Abl 激酶募集到β2 整合素依赖于β2 整合素介导的细胞粘附 | 第51-54页 |
(一) β2 整合素交联引起c-Abl 激酶募集至其胞浆尾部 | 第51-53页 |
(二) c-Abl 激酶通过其 SH3 结构域与β2 整合素的胞浆尾部相互作用 | 第53-54页 |
五、c-Abl 激酶通过talin 头部结构域与β2 整合素的胞浆尾部结合 | 第54-58页 |
六、c-Abl 激酶通过调节Vav 的活性来调控细胞粘附 | 第58-62页 |
讨 论 | 第62-66页 |
一、c-Abl 激酶参与 β2 整合素的 outside-in 信号转导 | 第62-63页 |
二、c-Abl 激酶调控 β2 整合素介导的中性粒细胞粘附和活化 | 第63页 |
三、talin 参与 c-Abl 激酶和 β2 整合素的相互作用 | 第63-64页 |
四、c-Abl 激酶调控 Vav 的活性 | 第64-66页 |
结论和主要创新点 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
在学期间公开发表论文及著作情况 | 第83页 |