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c-Abl激酶在β2整合素介导的信号转导途径中的作用研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-11页
英文缩写词第11-12页
前言第12-32页
 一、整合素概述第13-21页
  (一) 整合素家族的组成和结构第13页
  (二) 白细胞中表达的整合素第13-15页
  (三) β2 整合素的配体第15-16页
  (四) β2 整合素的生理功能第16-21页
   1. β2 整合素与白细胞骨架重排第16-17页
   2. β2 整合素与白细胞迁移第17页
   3. β2 整合素与白细胞的炎症效应第17页
   4. β2 整合素介导的信号事件第17-21页
    (1) β2 整合素inside-out 信号第17-18页
    (2) β2 整合素outside-in 信号第18-21页
 二、c-Abl 激酶概述第21-27页
  (一) c-Abl 激酶的基本结构及细胞定位第21-22页
  (二) c-Abl 激酶活性调节第22-23页
  (三) c-Abl 激酶生理功能第23-27页
   1. c-Abl 激酶与细胞凋亡第23-24页
   2. c-Abl 激酶与细胞周期调控第24-25页
   3. c-Abl 激酶与基因转录调控第25页
   4. c-Abl 激酶与细胞信号转导第25页
   5. c-Abl 激酶的抑制剂第25-27页
 三、talin 概述第27-29页
  (一) talin 的结构及分布第27页
  (二) talin 与整合素活化第27-29页
 四、Vav 概述第29-31页
  (一) Vav 的结构及分布第29-30页
  (二) Vav 的功能第30-31页
 五、本论文的研究目的和意义第31-32页
材料与方法第32-45页
 一、实验材料第32-34页
  (一) 菌株、细胞、质粒和抗体第32页
  (二) 试剂和酶类第32-33页
  (三) c-Abl 激酶干涉质粒的合成第33页
  (四) 主要仪器第33页
  (五) 主要溶液和培养基第33-34页
 二、实验方法第34-45页
  (一) 目的基因片段的扩增第34-35页
  (二) 表达质粒的构建和测序第35-38页
  (三) 蛋白质的表达第38-40页
  (四) 中性粒细胞的提取第40页
  (五) HL-60 细胞培养及分化第40页
  (六) 免疫沉淀及激酶反应实验第40-42页
  (七) Far Western 实验第42页
  (八) GST pull-down 实验第42-43页
  (九) 体外蛋白质结合实验第43页
  (十) 免疫荧光双标记实验第43页
  (十一) 流式细胞分析实验第43页
  (十二) 细胞静止粘附检测第43-44页
  (十三) 细胞氧呼吸爆发实验第44页
  (十四) 细胞转染与c-Abl 激酶的干涉第44页
  (十五) 数据分析第44-45页
实验结果与分析第45-62页
 一、中性粒细胞的粘附能够活化c-Abl 酪氨酸激酶第45-47页
 二、c-Abl 激酶参与了β2 整合素介导的中性粒细胞的稳定粘附和伸展第47-50页
  (一) c-Abl 激酶的抑制影响了β2 整合素介导的中性粒细胞的稳定粘附第47-48页
  (二) c-Abl 激酶的干涉影响了β2 整合素介导的中性粒细胞的稳定粘附第48-49页
  (三) c-Abl 激酶参与β2 整合素介导的中性粒细胞的呼吸爆发第49-50页
 三、c-Abl 激酶不参与TNF-α引起的β2 整合素的活化第50-51页
 四、c-Abl 激酶募集到β2 整合素依赖于β2 整合素介导的细胞粘附第51-54页
  (一) β2 整合素交联引起c-Abl 激酶募集至其胞浆尾部第51-53页
  (二) c-Abl 激酶通过其 SH3 结构域与β2 整合素的胞浆尾部相互作用第53-54页
 五、c-Abl 激酶通过talin 头部结构域与β2 整合素的胞浆尾部结合第54-58页
 六、c-Abl 激酶通过调节Vav 的活性来调控细胞粘附第58-62页
讨 论第62-66页
 一、c-Abl 激酶参与 β2 整合素的 outside-in 信号转导第62-63页
 二、c-Abl 激酶调控 β2 整合素介导的中性粒细胞粘附和活化第63页
 三、talin 参与 c-Abl 激酶和 β2 整合素的相互作用第63-64页
 四、c-Abl 激酶调控 Vav 的活性第64-66页
结论和主要创新点第66-67页
参考文献第67-82页
致谢第82-83页
在学期间公开发表论文及著作情况第83页

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