| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 1 前言 | 第16-52页 |
| ·细胞周期概述 | 第16-18页 |
| ·植物细胞周期调节机制 | 第18-31页 |
| ·植物细胞周期蛋白 | 第19-21页 |
| ·细胞周期蛋白依赖性激酶 | 第21-22页 |
| ·细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 | 第22-23页 |
| ·E2F 转录因子等其他细胞周期关键调节因子 | 第23页 |
| ·细胞周期各时相的调控 | 第23-30页 |
| ·G0→G1→S 期调控 | 第23-25页 |
| ·S 期调控 | 第25-26页 |
| ·G2/M 期调控 | 第26-29页 |
| ·M 期调控 | 第29-30页 |
| ·细胞周期关键基因对细胞大小的调控 | 第30-31页 |
| ·激素对细胞周期的调控 | 第31-32页 |
| ·植物种子的发育 | 第32-38页 |
| ·植物胚的发育 | 第33-36页 |
| ·植物胚乳的发育 | 第36-38页 |
| ·种子发育调控的研究进展 | 第38-50页 |
| ·植物胚胎发育的分子调控 | 第38-42页 |
| ·合子的激活 | 第38页 |
| ·极性的建立 | 第38-39页 |
| ·胚胎的模式建成 | 第39-40页 |
| ·分生组织的起始及器官的发生 | 第40-42页 |
| ·植物胚乳发育的分子调控 | 第42-44页 |
| ·转运层胚乳细胞命运决定 | 第42-43页 |
| ·糊粉层胚乳细胞命运决定 | 第43-44页 |
| ·淀粉胚乳细胞命运决定 | 第44页 |
| ·种子大小的分子调控 | 第44-47页 |
| ·胚、胚乳发育与母体组织之间的关系 | 第47-50页 |
| ·受精前后配子体之间的协调机制 | 第47页 |
| ·种子不同结构之间的协调生长 | 第47-49页 |
| ·种子发育过程中母体组织和合子之间的协调作用 | 第49-50页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第50-52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-67页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第52页 |
| ·菌株和质粒 | 第52页 |
| ·酶、生化试剂及仪器 | 第52-53页 |
| ·培养基配方 | 第53页 |
| ·PCR 引物 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-67页 |
| ·序列数据的获取 | 第53页 |
| ·聚类分析 | 第53-54页 |
| ·半定量RT-PCR 及Real-time PCR 分析 | 第54页 |
| ·植物总RNA 的提取 | 第54页 |
| ·反转录cDNA 第一链的合成 | 第54页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第54页 |
| ·Real-time PCR 分析 | 第54页 |
| ·植物基因组DNA 及质粒DNA 的提取 | 第54-55页 |
| ·目的基因的分离 | 第55-57页 |
| ·目的基因的扩增 | 第55页 |
| ·PCR 产物的连接、转化和测序 | 第55-56页 |
| ·正反义表达载体的构建 | 第56-57页 |
| ·RNAi 表达载体的构建 | 第57页 |
| ·GUS 表达载体的构建 | 第57页 |
| ·RNA 原位杂交 | 第57-61页 |
| ·正义和反义探针的制备 | 第57-59页 |
| ·材料的固定、脱水及包埋 | 第59页 |
| ·切片 | 第59页 |
| ·脱蜡、消化、乙酰化、杂交 | 第59-60页 |
| ·洗片 | 第60-61页 |
| ·杂交信号检测 | 第61页 |
| ·石蜡切片 | 第61-62页 |
| ·取材固定 | 第61页 |
| ·材料脱水、透明、浸蜡、包埋 | 第61页 |
| ·切片 | 第61-62页 |
| ·Toludine Blue O（TBO）染色 | 第62页 |
| ·半薄切片 | 第62页 |
| ·农杆菌介导的水稻转化 | 第62-64页 |
| ·根癌农杆菌EHA105 感受态细胞的制备 | 第62-63页 |
| ·电转法转化农杆菌 | 第63页 |
| ·水稻成熟胚愈伤组织的诱导 | 第63页 |
| ·水稻愈伤组织的转化 | 第63-64页 |
| ·GUS 染色分析 | 第64-65页 |
| ·亚历山大染色分析 | 第65页 |
| ·基因芯片杂交与分析 | 第65-67页 |
| ·取材 | 第65-66页 |
| ·芯片杂交 | 第66页 |
| ·芯片数据分析 | 第66-67页 |
| 3 结果与分析 | 第67-97页 |
| ·水稻细胞周期关键调节基因的基因组鉴定及表达分析 | 第67-77页 |
| ·水稻细胞周期关键调节基因序列的获得与分析 | 第67-71页 |
| ·细胞周期关键调节基因序列的获得 | 第67页 |
| ·细胞周期关键调节因子的聚类分析 | 第67-69页 |
| ·细胞周期关键调节因子的蛋白结构分析 | 第69-71页 |
| ·水稻细胞周期关键基因在不同组织器官中的表达模式分析 | 第71-73页 |
| ·水稻细胞周期关键基因的原位杂交分析 | 第73-74页 |
| ·生长素和细胞分裂素对水稻细胞周期关键基因的调控分析 | 第74-77页 |
| ·细胞周期关键调节基因的功能分析 | 第77-97页 |
| ·候选基因的表达载体构建及遗传转化 | 第77-79页 |
| ·表达载体构建 | 第77-78页 |
| ·基因转化及转基因植株鉴定 | 第78-79页 |
| ·P_(ubi)::CycB1;1~(RNAi) 转基因水稻表型分析及Orysa;Cyc81;1 基因功能分析 | 第79-90页 |
| ·P_(ubi)::CycB1;1~(RNAi) 转基因水稻种子发育异常 | 第82-86页 |
| ·P_(ubi)::CycB1;1~(RNAi) 转基因水稻胚乳和胚发育异常 | 第86-89页 |
| ·P_(ubi)::CycB1;1~(RNAi) 异常种子的胚细胞增大 | 第89-90页 |
| ·Orysa;CycB1;1 基因编码蛋白的序列及结构特征分析 | 第90-92页 |
| ·Orysa;CycB1;1 基因表达模式分析 | 第92-93页 |
| ·PGluA-1::CycB1;1~(RNAi) 胚乳中种子发育相关基因的表达分析 | 第93-94页 |
| ·P_(ubi)::CycB1;1~(RNAi) 转基因胚的转录组分析 | 第94-97页 |
| 4 讨论 | 第97-102页 |
| ·水稻和拟南芥细胞周期关键调节基因的数目和结构相对保守 | 第97页 |
| ·细胞周期关键调节基因表达模式具有一定的组织特异性 | 第97-98页 |
| ·水稻细胞周期受生长素和细胞分裂素的调控 | 第98-99页 |
| ·Orysa;CycB1;1 基因的正常表达为水稻种子发育所必需 | 第99-101页 |
| ·Orysa;CycB1;1 基因协调胚和胚乳的发育 | 第101-102页 |
| 5 结论 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-126页 |
| 附录 | 第126-146页 |
| 致谢 | 第146-147页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第147页 |
