| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-22页 |
| ·核糖核酸酶 A 简介 | 第8-12页 |
| ·RNase A 的结构和理化性质 | 第8-9页 |
| ·RNase A 的生理功能和用途 | 第9-10页 |
| ·RNase A 的活性检测 | 第10-11页 |
| ·RNase A 的研究现状 | 第11-12页 |
| ·包含体蛋白质的体外复性 | 第12-20页 |
| ·蛋白质复性的基本原理 | 第13-14页 |
| ·体外复性难点及策略 | 第14-15页 |
| ·一般的复性方法 | 第15-18页 |
| ·金属螯合色谱辅助复性 | 第18-20页 |
| ·本文主要研究目的和内容 | 第20-22页 |
| 第二章 RNase A 重组菌株的构建及表达 | 第22-45页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·菌种和载体 | 第22-23页 |
| ·工具酶及分子量参照物 | 第23页 |
| ·主要化学试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·引物设计与合成 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-30页 |
| ·目的基因的获取 | 第24-26页 |
| ·重组质粒的构建 | 第26-28页 |
| ·重组子阳性菌落的筛选 | 第28-30页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第30-34页 |
| ·基因工程菌生长曲线的测定 | 第30页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第30-32页 |
| ·表达产物的 SDS-PAGE 电泳检测 | 第32-33页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第33-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-43页 |
| ·pET28a-RNase A 重组质粒构建 | 第34-38页 |
| ·RNase A 的表达 | 第38-43页 |
| ·本章小结 | 第43-45页 |
| 第三章 RNase A 包含体的复性 | 第45-58页 |
| ·实验材料和设备 | 第45-47页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·实验设备 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-50页 |
| ·RNase A 测活标准曲线的绘制及活性收率的计算 | 第47-48页 |
| ·RNase A 包含体的变性溶解 | 第48页 |
| ·RNase A 包含体的稀释复性 | 第48页 |
| ·RNase A 包含体的IMAC 复性和纯化 | 第48-50页 |
| ·复性RNase A的圆二色光谱分析 | 第50页 |
| ·实验结果及讨论 | 第50-57页 |
| ·RNase A 包含体的稀释复性 | 第50-53页 |
| ·RNase A 包含体的IMAC 复性 | 第53-56页 |
| ·复性RNase A 的结构分析 | 第56-57页 |
| ·IMAC 复性与稀释复性的比较 | 第57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第四章 结论与展望 | 第58-60页 |
| ·结论 | 第58页 |
| ·展望 | 第58-60页 |
| 附录 | 第60-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74页 |