| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-29页 |
| 1 桃果实贮藏保鲜技术的研究现状 | 第12-13页 |
| 2. 控制桃果实成熟软化的分子机理研究进展 | 第13-21页 |
| ·相关酶与果实成熟软化 | 第13-17页 |
| ·乙烯与果实成熟 | 第17-21页 |
| 3. 植物基因工程常用启动子研究进展 | 第21-25页 |
| ·组成型启动子的研究 | 第22页 |
| ·诱导型启动子 | 第22-23页 |
| ·组织特异性启动子 | 第23-25页 |
| 4 抑制乙烯生物合成的基因工程技术 | 第25-27页 |
| ·反义RNA 技术 | 第25-26页 |
| ·RNA 干扰技术 | 第26页 |
| ·病毒诱导的基因沉默 | 第26-27页 |
| 5 本研究目的及意义 | 第27-28页 |
| 6 2A12 启动子驱动的ACO 基因反义植物表达载体构建技术图 | 第28-29页 |
| 第二章 桃ACC 氧化酶基因的cDNA 片段克隆 | 第29-31页 |
| 1 材料与试剂 | 第29-31页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·菌株和载体 | 第29页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·主要试剂溶液的配制 | 第29-31页 |
| 2. 实验方法 | 第31-36页 |
| ·桃果肉RNA 的提取及其浓度的检测 | 第31页 |
| ·mRNA 的反转录 | 第31-32页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第32-33页 |
| ·目的扩增片段的回收 | 第33-34页 |
| ·目的片段与T 载体连接 | 第34页 |
| ·连接产物的转化 | 第34-35页 |
| ·重组子的鉴定 | 第35-36页 |
| ·阳性克隆的序列测定及生物信息学分析 | 第36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-45页 |
| ·桃果肉总RNA 的提取质量 | 第36-37页 |
| ·ACO 基因的RT-PCR 扩增 | 第37页 |
| ·ACO 基因的克隆及鉴定 | 第37-39页 |
| ·ACO 基因的序列测定与生物信息学分析 | 第39-45页 |
| 第三章 番茄果实特异性2A12 启动子的克隆 | 第45-52页 |
| 1 材料与试剂 | 第45-46页 |
| ·植物材料 | 第45页 |
| ·菌株和载体 | 第45页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第45页 |
| ·主要试剂溶液的配制 | 第45-46页 |
| 2 技术路线 | 第46-47页 |
| 3 实验方法 | 第47-49页 |
| ·番茄基因组DNA 的提取与纯化 | 第47页 |
| ·2A12 启动子的克隆 | 第47-49页 |
| 4 结果与分析 | 第49-52页 |
| ·番茄基因组 DNA 的提取及PCR 扩增 | 第49-50页 |
| ·重组克隆载体pMD-2A 的鉴定 | 第50页 |
| ·2A12 序列分析 | 第50-52页 |
| 第四章 桃果ACC 氧化酶基因植物反义表达载体的构建 | 第52-62页 |
| 1 材料与试剂 | 第52页 |
| ·菌株和表达载体 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器与设备 | 第52页 |
| 2 方法 | 第52-58页 |
| ·pBI-anti-ACO 植物表达载体的构建 | 第52-54页 |
| ·pBI-2A 植物表达载体构建 | 第54-56页 |
| ·pBI-2A-ACO 反义植物表达载体构建 | 第56-58页 |
| 3 实验结果与分析 | 第58-62页 |
| ·酶切鉴定 | 第58-60页 |
| ·PCR 鉴定 | 第60-62页 |
| 第五章 讨论 | 第62-69页 |
| 1 ACC 氧化酶基因的克隆 | 第62-66页 |
| ·测序结果 | 第62页 |
| ·桃果肉总RNA 的提取和反转录 | 第62-64页 |
| ·ACO 基因的 PCR 扩增 | 第64-66页 |
| 2 2A12 启动子的克隆 | 第66-67页 |
| ·启动子的选择 | 第66页 |
| ·2A12 启动子的序列分析 | 第66-67页 |
| 3 关于表达载体的构建 | 第67-69页 |
| ·表达载体的构建 | 第67-68页 |
| ·限制性内切酶的注意事项 | 第68页 |
| ·连接反应 | 第68-69页 |
| 第六章 结论 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 个人简介 | 第79-80页 |
| 导师简介 | 第80页 |