| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 心血管疾病及其临床治疗 | 第11-12页 |
| 1.2 PCSK9、LDL-C和 LDLR | 第12-14页 |
| 1.2.1 PCSK9 的发现 | 第12页 |
| 1.2.2 PCSK9 结构特征 | 第12-13页 |
| 1.2.3 PCSK9 的生物学活性 | 第13-14页 |
| 1.3 转基因小鼠 | 第14-16页 |
| 1.3.1 定义 | 第14页 |
| 1.3.2 发展历程 | 第14-15页 |
| 1.3.3 产生人源可变区抗体的转基因小鼠 | 第15-16页 |
| 1.4 PCSK9 单克隆抗体 | 第16页 |
| 1.5 PCSK9 单克隆抗体最新进展 | 第16-19页 |
| 第二章 抗PCSK9 单克隆抗体的制备 | 第19-55页 |
| 2.1 实验动物、试剂和仪器 | 第19-26页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第19页 |
| 2.1.2 免疫原 | 第19页 |
| 2.1.3 商品化试剂 | 第19-22页 |
| 2.1.4 自制实验试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.5 实验耗材 | 第24-25页 |
| 2.1.6 实验仪器 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-40页 |
| 2.2.1 动物免疫 | 第26-30页 |
| 2.2.2 抗血清滴度测定 | 第30-32页 |
| 2.2.3 细胞融合 | 第32-35页 |
| 2.2.4 阳性克隆筛选和亚克隆 | 第35-37页 |
| 2.2.5 抗体的亚型测定 | 第37页 |
| 2.2.6 抗体的生产和纯化 | 第37-38页 |
| 2.2.7 纯化抗体的质量控制 | 第38-40页 |
| 2.3 实验结果和讨论 | 第40-55页 |
| 2.3.1 偶联生物素的抗原验证 | 第40-41页 |
| 2.3.2 抗血清滴度测定 | 第41-48页 |
| 2.3.3 细胞融合 | 第48页 |
| 2.3.4 阳性克隆筛选及亚克隆 | 第48-51页 |
| 2.3.5 抗体的亚型测定 | 第51页 |
| 2.3.6 抗体的生产和纯化 | 第51-52页 |
| 2.3.7 纯化抗体的质量控制 | 第52-55页 |
| 第三章 单克隆抗体的活性和生物学功能测定 | 第55-63页 |
| 3.1 材料 | 第55页 |
| 3.2 方法 | 第55-56页 |
| 3.3 实验结果和讨论 | 第56-63页 |
| 3.3.1 抗原抗体结合实验——SA包被ELISA | 第56-58页 |
| 3.3.2 阻断配体受体结合实验——RBA ELISA | 第58-59页 |
| 3.3.3 阻断 PCSK9 介导的 HepG2 细胞表面 LDLR 的下调实验 | 第59-60页 |
| 3.3.4 阻断 PCSK9 介导的 HepG2 细胞对 LDL 内摄抑制的实验 | 第60-61页 |
| 3.3.5 亲和力测定 | 第61-63页 |
| 全文总结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 附录1 | 第69-70页 |
| 附录2 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 在校期间发表论文 | 第72-74页 |
