内容提要 | 第1-10页 |
第一篇 新型降糖活性物质的研究 | 第10-75页 |
第1章 前言 | 第10-23页 |
一 糖尿病 | 第10-12页 |
二 绞股蓝愈伤组织细胞 | 第12-13页 |
三 霍乱毒素B 亚单位 | 第13页 |
四 胰岛素 | 第13-14页 |
五 普洱茶 | 第14-19页 |
六 PTP 与糖尿病 | 第19-22页 |
1 PTP 的结构和功能 | 第19-20页 |
2 PTP1b 与 2 型糖尿病的关系 | 第20-21页 |
3 PTP 相关药物的开发 | 第21-22页 |
七 糖尿病模式动物db/db 小鼠 | 第22-23页 |
第2章 CTB-人胰岛素融合蛋白在绞股蓝愈伤组织细胞系的表达及降糖效果 | 第23-35页 |
一 实验材料 | 第23页 |
1 细胞株和质粒 | 第23页 |
2 主要试剂 | 第23页 |
二 实验方法 | 第23-28页 |
1 不含 C 肽基因的胰岛素基因(BA)和含有GP 绞链的霍乱毒素B亚单位(CTB)基因的合成 | 第23-24页 |
2 构建克隆载体pMD18-T/CTB-BA | 第24-25页 |
3 构建植物细胞表达载体 pBI121/CTB-BA | 第25-26页 |
4 表达载体的转化及与绞股蓝愈伤组织细胞的共培养 | 第26-27页 |
5 PCR 鉴定转化体细胞基因组DNA | 第27页 |
6 RT-PCR 鉴定转基因细胞 | 第27页 |
7 检测人胰岛素表达量 | 第27页 |
8 Western blotting 法检测CTB-人胰岛素融合蛋白 | 第27-28页 |
9 表达产物的降糖试验 | 第28页 |
三 试验结果 | 第28-33页 |
1 CTB 和BA 基因的合成 | 第28-29页 |
2 克隆载体中目的基因的序列测定 | 第29页 |
3 融合克隆载体pMD18-T | 第29页 |
4 植物细胞表达载体 pBI121 /CTB-BA 的鉴定 | 第29-30页 |
5 转化体细胞基因组DNA 的鉴定 | 第30-31页 |
6 转基因细胞的RT-PCR 的鉴定 | 第31页 |
7 人胰岛素表达量的检测 | 第31-32页 |
8 western blot | 第32页 |
9 非转化子细胞和转化子细胞对小鼠的降血糖作用 | 第32-33页 |
四 讨论 | 第33-34页 |
五 小结 | 第34-35页 |
第3章 普洱茶 PTP-1B 抑制剂的筛选及其稳定性初步研究 | 第35-45页 |
一 实验材料 | 第35页 |
1 酶和底物 | 第35页 |
2 试剂 | 第35页 |
3 仪器 | 第35页 |
二 实验方法 | 第35-37页 |
1 各种茶及其提取物对 PTP-1B 及其它 PTPs 抑制率的测定 | 第35-37页 |
2 Time-course 曲线测量 | 第37页 |
3 保存温度、高压对普洱茶 PTP-1B 抑制活性的影响 | 第37页 |
三 试验结果 | 第37-43页 |
1 各种普洱茶及普洱茶提取物对 PTP-1B、SHP1,TC-PTP 抑制率及 1C50 的测定 | 第37-38页 |
2 普洱熟茶对 PTP-1B 抑制特异性考察 | 第38-39页 |
3 Time-course 曲线 | 第39-40页 |
4 保存温度、高压对普洱茶 PTP-1B 抑制活性的影响 | 第40-43页 |
四 讨论 | 第43-44页 |
五 小结 | 第44-45页 |
第4章 普洱茶对糖尿病模型小鼠降糖作用的研究 | 第45-56页 |
一 实验材料 | 第45页 |
1 试剂 | 第45页 |
2 试验动物及饲养条件 | 第45页 |
3 主要仪器设备 | 第45页 |
二 试验方法 | 第45-48页 |
1 普洱茶粉的制备 | 第45-46页 |
2 普洱茶(粉)的急性毒性(LD50)研究 | 第46页 |
3 普洱茶对2 型糖尿病小鼠的降血糖实验研究 | 第46-48页 |
三 实验结果 | 第48-54页 |
1 普洱茶(粉)的急性毒性(LD50) | 第48页 |
2 普洱茶对2 型糖尿病小鼠的降血糖效果 | 第48-52页 |
3 普洱茶对db/db 小鼠的饮食和体重的影响 | 第52-54页 |
四 讨论 | 第54-55页 |
五 小结 | 第55-56页 |
第5章 普洱茶对2 型糖尿病患者降糖作用的研究 | 第56-69页 |
一 实验材料 | 第56页 |
1 试剂 | 第56页 |
2 主要仪器设备 | 第56页 |
二 试验方法 | 第56-62页 |
1 纳入标准 | 第56页 |
2 排除标准 | 第56页 |
3 一般资料 | 第56-61页 |
4 试验方法 | 第61页 |
5 观察指标 | 第61页 |
6 判定标准 | 第61-62页 |
7 统计学处理 | 第62页 |
三 实验结果 | 第62-67页 |
1 实验前后不良症状的总的发生率比较 | 第62-63页 |
2 糖尿病人组和健康受试者组实验前后血糖指标的变化 | 第63-67页 |
四 讨论 | 第67-68页 |
五 小结 | 第68-69页 |
第6章 普洱茶降糖机制的初步研究 | 第69-75页 |
一 实验材料 | 第69页 |
1 动物组织 | 第69页 |
2 试剂和抗体 | 第69页 |
二 实验方法 | 第69-70页 |
1 小鼠肝脏和肌肉中蛋白电泳样品的制备 | 第69-70页 |
2 小鼠肝脏和肌肉蛋白电泳样品的Western Blotting | 第70页 |
三 实验结果 | 第70-72页 |
1 各组小鼠肝脏中蛋白酪氨酸磷酸化程度的比较 | 第70-71页 |
2 各组小鼠肝脏中Erk 磷酸化程度的比较 | 第71页 |
3 各组小鼠肌肉中蛋白酪氨酸磷酸化程度的比较 | 第71-72页 |
4 各组小鼠肌肉中Erk 磷酸化程度的比较 | 第72页 |
四 讨论 | 第72-74页 |
五 小结 | 第74-75页 |
第二篇 新型脂质体疫苗的研究 | 第75-92页 |
第1章 前言 | 第75-80页 |
一 流感及流感病毒 | 第75-77页 |
1 流感病毒及其流行 | 第75-76页 |
2 流感的防治 | 第76-77页 |
二 流感疫苗的研究进展 | 第77-78页 |
1 应用中的流感病毒疫苗 | 第77-78页 |
2 研制中的流感病毒疫苗 | 第78页 |
三 脂质体 | 第78-80页 |
第2章 脂质体流感疫苗的制备及免疫性质评价 | 第80-92页 |
一 实验材料 | 第80-81页 |
1 流感病毒及流感抗原 | 第80页 |
2 实验动物 | 第80页 |
3 主要试剂及仪器 | 第80-81页 |
二 试验方法 | 第81-84页 |
1 脂质体流感疫苗的制备 | 第81页 |
2 脂质体流感疫苗的性质考察 | 第81页 |
3 脂质体流感疫苗给药方式及剂量探索 | 第81-82页 |
4 脂质体流感疫苗激发机体体液免疫的检测 | 第82-83页 |
5 脂质体流感疫苗激发机体细胞免疫检测 | 第83-84页 |
三 实验结果 | 第84-90页 |
1 脂质体流感疫苗的性质考察 | 第84-85页 |
2 脂质体流感疫苗免疫剂量及给药方式的研究 | 第85-86页 |
3 脂质体流感疫苗激发机体体液免疫的检测 | 第86-87页 |
4 细胞免疫结果 | 第87-90页 |
四 讨论 | 第90-91页 |
五 小结 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-100页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
中文摘要 | 第102-106页 |
Abstract | 第106-110页 |