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新型降糖活性物质及新型脂质体疫苗的研究

内容提要第1-10页
第一篇 新型降糖活性物质的研究第10-75页
 第1章 前言第10-23页
  一 糖尿病第10-12页
  二 绞股蓝愈伤组织细胞第12-13页
  三 霍乱毒素B 亚单位第13页
  四 胰岛素第13-14页
  五 普洱茶第14-19页
  六 PTP 与糖尿病第19-22页
   1 PTP 的结构和功能第19-20页
   2 PTP1b 与 2 型糖尿病的关系第20-21页
   3 PTP 相关药物的开发第21-22页
  七 糖尿病模式动物db/db 小鼠第22-23页
 第2章 CTB-人胰岛素融合蛋白在绞股蓝愈伤组织细胞系的表达及降糖效果第23-35页
  一 实验材料第23页
   1 细胞株和质粒第23页
   2 主要试剂第23页
  二 实验方法第23-28页
   1 不含 C 肽基因的胰岛素基因(BA)和含有GP 绞链的霍乱毒素B亚单位(CTB)基因的合成第23-24页
   2 构建克隆载体pMD18-T/CTB-BA第24-25页
   3 构建植物细胞表达载体 pBI121/CTB-BA第25-26页
   4 表达载体的转化及与绞股蓝愈伤组织细胞的共培养第26-27页
   5 PCR 鉴定转化体细胞基因组DNA第27页
   6 RT-PCR 鉴定转基因细胞第27页
   7 检测人胰岛素表达量第27页
   8 Western blotting 法检测CTB-人胰岛素融合蛋白第27-28页
   9 表达产物的降糖试验第28页
  三 试验结果第28-33页
   1 CTB 和BA 基因的合成第28-29页
   2 克隆载体中目的基因的序列测定第29页
   3 融合克隆载体pMD18-T第29页
   4 植物细胞表达载体 pBI121 /CTB-BA 的鉴定第29-30页
   5 转化体细胞基因组DNA 的鉴定第30-31页
   6 转基因细胞的RT-PCR 的鉴定第31页
   7 人胰岛素表达量的检测第31-32页
   8 western blot第32页
   9 非转化子细胞和转化子细胞对小鼠的降血糖作用第32-33页
  四 讨论第33-34页
  五 小结第34-35页
 第3章 普洱茶 PTP-1B 抑制剂的筛选及其稳定性初步研究第35-45页
  一 实验材料第35页
   1 酶和底物第35页
   2 试剂第35页
   3 仪器第35页
  二 实验方法第35-37页
   1 各种茶及其提取物对 PTP-1B 及其它 PTPs 抑制率的测定第35-37页
   2 Time-course 曲线测量第37页
   3 保存温度、高压对普洱茶 PTP-1B 抑制活性的影响第37页
  三 试验结果第37-43页
   1 各种普洱茶及普洱茶提取物对 PTP-1B、SHP1,TC-PTP 抑制率及 1C50 的测定第37-38页
   2 普洱熟茶对 PTP-1B 抑制特异性考察第38-39页
   3 Time-course 曲线第39-40页
   4 保存温度、高压对普洱茶 PTP-1B 抑制活性的影响第40-43页
  四 讨论第43-44页
  五 小结第44-45页
 第4章 普洱茶对糖尿病模型小鼠降糖作用的研究第45-56页
  一 实验材料第45页
   1 试剂第45页
   2 试验动物及饲养条件第45页
   3 主要仪器设备第45页
  二 试验方法第45-48页
   1 普洱茶粉的制备第45-46页
   2 普洱茶(粉)的急性毒性(LD50)研究第46页
   3 普洱茶对2 型糖尿病小鼠的降血糖实验研究第46-48页
  三 实验结果第48-54页
   1 普洱茶(粉)的急性毒性(LD50)第48页
   2 普洱茶对2 型糖尿病小鼠的降血糖效果第48-52页
   3 普洱茶对db/db 小鼠的饮食和体重的影响第52-54页
  四 讨论第54-55页
  五 小结第55-56页
 第5章 普洱茶对2 型糖尿病患者降糖作用的研究第56-69页
  一 实验材料第56页
   1 试剂第56页
   2 主要仪器设备第56页
  二 试验方法第56-62页
   1 纳入标准第56页
   2 排除标准第56页
   3 一般资料第56-61页
   4 试验方法第61页
   5 观察指标第61页
   6 判定标准第61-62页
   7 统计学处理第62页
  三 实验结果第62-67页
   1 实验前后不良症状的总的发生率比较第62-63页
   2 糖尿病人组和健康受试者组实验前后血糖指标的变化第63-67页
  四 讨论第67-68页
  五 小结第68-69页
 第6章 普洱茶降糖机制的初步研究第69-75页
  一 实验材料第69页
   1 动物组织第69页
   2 试剂和抗体第69页
  二 实验方法第69-70页
   1 小鼠肝脏和肌肉中蛋白电泳样品的制备第69-70页
   2 小鼠肝脏和肌肉蛋白电泳样品的Western Blotting第70页
  三 实验结果第70-72页
   1 各组小鼠肝脏中蛋白酪氨酸磷酸化程度的比较第70-71页
   2 各组小鼠肝脏中Erk 磷酸化程度的比较第71页
   3 各组小鼠肌肉中蛋白酪氨酸磷酸化程度的比较第71-72页
   4 各组小鼠肌肉中Erk 磷酸化程度的比较第72页
  四 讨论第72-74页
  五 小结第74-75页
第二篇 新型脂质体疫苗的研究第75-92页
 第1章 前言第75-80页
  一 流感及流感病毒第75-77页
   1 流感病毒及其流行第75-76页
   2 流感的防治第76-77页
  二 流感疫苗的研究进展第77-78页
   1 应用中的流感病毒疫苗第77-78页
   2 研制中的流感病毒疫苗第78页
  三 脂质体第78-80页
 第2章 脂质体流感疫苗的制备及免疫性质评价第80-92页
  一 实验材料第80-81页
   1 流感病毒及流感抗原第80页
   2 实验动物第80页
   3 主要试剂及仪器第80-81页
  二 试验方法第81-84页
   1 脂质体流感疫苗的制备第81页
   2 脂质体流感疫苗的性质考察第81页
   3 脂质体流感疫苗给药方式及剂量探索第81-82页
   4 脂质体流感疫苗激发机体体液免疫的检测第82-83页
   5 脂质体流感疫苗激发机体细胞免疫检测第83-84页
  三 实验结果第84-90页
   1 脂质体流感疫苗的性质考察第84-85页
   2 脂质体流感疫苗免疫剂量及给药方式的研究第85-86页
   3 脂质体流感疫苗激发机体体液免疫的检测第86-87页
   4 细胞免疫结果第87-90页
  四 讨论第90-91页
  五 小结第91-92页
参考文献第92-100页
攻读博士期间发表的论文第100-101页
致谢第101-102页
中文摘要第102-106页
Abstract第106-110页

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