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环境因子依赖型sRNA对病原菌中三型分泌系统的表达调控研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 前言第11-29页
    1.1 病原微生物对人类社会的影响第11页
    1.2 肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)第11-13页
        1.2.1 EHEC O57:H7的简介第11-12页
        1.2.2 EHEC O57:H7的发病率第12-13页
        1.2.3 EHEC O57:H7的流行病学分布第13页
    1.3 T3SS的相关研究第13-18页
        1.3.1 T3SS的简介第13-14页
        1.3.2 T3SS的结构组成第14-16页
        1.3.3 T3SS蛋白表达与输出的调控研究第16-17页
        1.3.4 T3SS介导的致病机制第17-18页
    1.4 环境信号与T3SS、sRNA MicA的关系第18-21页
        1.4.1 环境信号与病原菌致病因子第18-19页
        1.4.2 T3SS受到环境信号的严格调控第19页
        1.4.3 环境信号与sRNA第19-21页
    1.5 sRNA的调控作用第21-27页
        1.5.1 sRNA的调控作用方式第21-23页
        1.5.2 Hfq作为sRNA伴侣蛋白参与sRNA对靶标的调控第23页
        1.5.3 RNase介导sRNA对mRNA稳定性的调控第23页
        1.5.4 sRNA在病原菌致病性调控中的作用第23-26页
        1.5.5 sRNA与OMVs第26-27页
    1.6 研究目标与研究内容第27-29页
第二章 材料与方法第29-54页
    2.1 实验材料第29-33页
        2.1.1 所用试剂及仪器第29-31页
        2.1.2 溶液配制第31-33页
    2.2 研究方法第33-54页
第三章 结果与分析第54-73页
    3.1 环境信号对T3SS的影响第54-55页
    3.2 环境信号与sRNA第55-56页
    3.3 MicA过表达对T3SS的影响第56页
    3.4 MicA过表达对ler及grlR mRNA的影响第56-58页
    3.5 MicA与ler mRNA结合位点的模拟与验证第58-60页
        3.5.1 MicA与ler mRNA结合位点的模拟第58页
        3.5.2 自身启动子引导的绿色荧光蛋白报告系统的构建第58-59页
        3.5.3 MicA过表达对Ler表达水平的影响第59-60页
    3.6 MicA与ler mRNA结合位点的突变及验证(一)第60-62页
        3.6.1 MicA与ler mRNA结合位点的突变第60-61页
        3.6.2 MicA与ler mRNA结合位点突变后的验证第61-62页
    3.7 MicA与ler mRNA结合位点的突变及验证(二)第62-64页
        3.7.1 不改变ler mRNA二级结构的突变第62-63页
        3.7.2 点突变的MicA与ler结合作用的验证第63-64页
    3.8 组成型启动子引导的绿色荧光蛋白报告质粒第64-66页
    3.9 RNaseE介导MicA对Ler的调控作用第66-70页
        3.9.1 RNase相关突变菌株的构建第66-67页
        3.9.2 RNase介导MicA过表达对ler RNA水平的影响第67-68页
        3.9.3 MicA对ler mRNA稳定性的调控第68-70页
    3.10 MicA过表达促进细菌OMVs的产生第70-73页
第四章 总结与讨论第73-81页
    4.1 总结第73-74页
    4.2 讨论第74-81页
参考文献第81-90页
附录第90-91页
致谢第91页

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