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茶树叶发育相关miRNA和转录因子挖掘及采后不同萎凋蛋白质组差异分析

摘要第10-14页
ABSTRACT第14-18页
本文所用主要缩略词第19-21页
第一部分 文献综述第21-35页
    第一章 植物叶发育过程及研究进展第21-31页
        1 植物叶形态建成第21-22页
        2 植物叶发育分子调控机理第22-25页
            2.1 顶端分生组织第22页
            2.2 叶原基起始发育第22-23页
            2.3 叶极性发育第23页
            2.4 叶片大小的调控第23-25页
        3 植物microRNA (miRNA)在叶发育中的作用第25-27页
            3.1 miRNA的形成与调控机制第25-26页
            3.2 miRNA参与叶原基形成和极性生长第26页
            3.3 miRNA参与叶形态建成第26-27页
            3.4 miRNA参与叶的衰老第27页
        4 茶树叶发育与内含物质代谢第27-31页
            4.1 茶树叶形态发育特点第27-28页
                4.1.1 茶叶叶发育第27-28页
                4.1.2 茶树叶形态特征第28页
            4.2 茶树叶发育与内含物质形成相关性第28-31页
                4.2.1 茶多酚的合成第28-29页
                4.2.2 茶氨酸的合成第29页
                4.2.3 咖啡碱的合成第29-31页
    第二章 植物叶采后学研究进展第31-35页
        1 植物叶采后学研究现状第31页
        2 茶树叶萎凋技术及采后生理变化第31-35页
            2.1 自然萎凋和日光萎凋第32-33页
            2.2 不同温湿度对萎凋的影响第33页
            2.3 不同时间对萎凋的影响第33-35页
本研究的目的与意义第35-37页
第二部分 研究报告第37-163页
    第三章 茶树叶的转录组测序分析第37-55页
        1 材料和方法第38-40页
            1.1 植物材料和RNA提取第38页
            1.2 cDNA库的构建和illumina测序第38页
            1.3 数据过滤和从头组装第38-39页
            1.4 Unigenes的功能注释第39页
            1.5 DEGs的功能富集分析第39页
            1.6 RP-HPLC色谱条件第39页
            1.7 实时定量PCR验证第39-40页
        2 结果与分析第40-52页
            2.1 茶树转录组测序和组装分析第40-42页
            2.2 功能注释和分类第42-43页
            2.3 GO分类第43-44页
            2.4 COG分类第44-45页
            2.5 KEGG分类第45-46页
            2.6 茶树转录组中的差异表达基因第46-48页
            2.7 基于茶树转录组数据揭示其中参与类黄酮合成途径的基因第48-49页
            2.8 RP-HPLC检测四个茶树品种中儿茶素的含量第49-51页
            2.9 茶树中儿茶素合成相关基因的表达分析第51-52页
        3 讨论第52-55页
    第四章 茶树叶发育及响应激素刺激的内参基因选择第55-73页
        1 材料与方法第56-58页
            1.1 植物材料与处理第56页
            1.2 RNA提取与cDNA反转录第56-57页
            1.3 候选基因的选择、引物设计和基因克隆第57页
            1.4 qRT-PCR实验第57页
            1.5 数据分析第57-58页
        2 结果与分析第58-70页
            2.1 茶树候选内参基因的克隆第58-63页
            2.2 茶树候选内参基因表达谱分析第63-65页
            2.3 茶树候选内参基因表达稳定性分析第65-68页
                2.3.1 GeNorm分析第65-67页
                2.3.2 NormFinder分析第67-68页
                2.3.3 BestKeeper分析第68页
            2.4 茶树内参基因验证第68-70页
        3 讨论第70-73页
    第五章 茶树叶结构发育特征及microRNA鉴定与分析第73-93页
        1 材料和方法第74-76页
            1.1 植物材料第74页
            1.2 茶树叶树脂切片和光合指标测定第74-75页
            1.3 小RNA文库的构建和测序第75页
            1.4 小RNA序列的质量控制和生物信息学分析第75-76页
        2 结果与分析第76-90页
            2.1 茶树叶在不同发育阶段的解剖特征第76-77页
            2.2 光合强度和呼吸强度第77-78页
            2.3 茶树叶中小RNA的高通量测序分析第78-82页
            2.4 鉴定茶树叶中保守的和新的miRNA第82-83页
            2.5 茶树叶miRNA靶基因的预测和注释第83-89页
            2.6 茶树叶发育过程中miRNA表达的丰度和差异分析第89-90页
        3 讨论第90-93页
    第六章 茶树叶发育相关GRF和GIF家族基因的鉴定与分析第93-105页
        1 材料和方法第94-95页
            1.1 植物材料与处理第94页
            1.2 数据的来源与控制第94页
            1.3 序列分析、系统发育树构建和小RNA靶位点预测第94-95页
            1.4 茶树材料RNA分离、cDNA逆转录和qRT-PCR检测第95页
        2 结果与分析第95-102页
            2.1 茶树的GRF和GIF基因家族的鉴定和序列分析第95-97页
            2.2 茶树CsGRF和CsGIF蛋白系统进化树和保守基序分析第97-99页
            2.3 茶树CsGRF转录本的miRNA靶位点预测第99页
            2.4 CsGRF和CsGIF基因在茶树叶发育期间的表达分析第99-101页
            2.5 茶树CsGRF和CsGIF基因在激素处理下的表达谱第101-102页
        3 讨论第102-105页
    第七章 茶树叶发育相关TCP家族基因鉴定与分析第105-119页
        1 材料和方法第106-107页
            1.1 植物材料、生长条件和激素处理第106页
            1.2 茶树TCP序列的检索第106页
            1.3 系统进化树、序列特征和互作网络分析第106-107页
            1.4 亚细胞定位和microRNA靶位点预测第107页
            1.5 茶树材料RNA分离、cDNA逆转录和qRT-PCR分析第107页
        2 结果与分析第107-116页
            2.1 茶树TCP家族蛋白的鉴定和系统进化树构建第107-109页
            2.2 茶树CsTCP蛋白的序列特征第109-110页
            2.3 茶树CsTCP蛋白的亚细胞定位第110页
            2.4 茶树CsTCP蛋白的功能注释和互作网络分析第110-112页
            2.5 茶树CsTCP转录本microRNA靶位点的预测第112页
            2.6 茶树叶发育过程中CsTCP基因的表达谱第112-114页
            2.7 CsTCP基因在激素处理后茶树叶中的表达谱第114-115页
            2.8 TCP功能冗余对分析第115-116页
        3 讨论第116-119页
    第八章 茶树叶采后不同时间萎凋处理对蛋白质组的影响第119-137页
        1 材料和方法第120-122页
            1.1 植物材料和萎凋处理第120页
            1.2 茶树材料蛋白质提取、消化和iTRAQ标记第120页
            1.3 LC-MS/MS分析第120-121页
            1.4 蛋白质鉴定和定量第121页
            1.5 生物信息学和注释第121页
            1.6 基因表达检测第121-122页
        2 结果与分析第122-134页
            2.1 采摘后茶树叶表型变化和蛋白质组学鉴定第122-126页
            2.2 茶叶DEPs的GO注释第126-128页
            2.3 茶叶DEPs的KEGG注释第128页
            2.4 茶叶中蛋白-蛋白相互作用(PPI)第128-130页
            2.5 茶叶DEPs转录和蛋白水平的比较分析第130-134页
        3 讨论第134-137页
            3.1 采摘后的茶树叶具有衰老生物学特征第134页
            3.2 茶叶DEPs在初级代谢中起抑制作用第134-135页
            3.3 DEPs参与了茶叶特异化合物的次生代谢途径第135-137页
    第九章 茶树叶采后不同温度萎凋处理对蛋白质组的影响第137-153页
        1 材料和方法第138-140页
            1.1 植物材料和萎凋处理第138页
            1.2 蛋白质提取、消化和iTRAQ标记第138页
            1.3 LC-MS/MS分析第138-139页
            1.4 蛋白质鉴定和定量第139页
            1.5 生物信息学和注释第139页
            1.6 基因表达检测第139-140页
        2 结果与分析第140-150页
            2.1 采后茶叶在高温和低温萎凋处理中DEPs的鉴定与分析第140-144页
            2.2 茶树不同温度萎凋DEPs的GO注释第144-145页
            2.3 茶树不同温度萎凋DEPs的KEGG注释第145-146页
            2.4 茶树不同温度萎凋蛋白-蛋白相互作用(PPI)第146-147页
            2.5 茶树不同温度萎凋处理qRT-PCR检测分析第147-150页
        3 讨论第150-153页
            3.1 DEPs在采后茶叶中参与了对极限温度的响应第150页
            3.2 茶树叶不同温度萎凋DEPs涉及到了茶叶特有化合物的代谢途径第150页
            3.3 茶树叶不同温度萎凋DEPs参与叶能量代谢第150-151页
            3.4 内源性激素相关的DEPs被激活或抑制第151页
            3.5 茶树叶不同温度萎凋DEPs涉及到了细胞发育的抑制作用第151-153页
    第十章 茶树叶采后遮荫/光照萎凋对蛋白质组的影响第153-163页
        1 材料和方法第153-155页
            1.1 植物材料和萎凋处理第153-154页
            1.2 蛋白质提取、消化和iTRAQ标记第154页
            1.3 LC-MS/MS分析第154页
            1.4 蛋白质鉴定和定量第154-155页
            1.5 生物信息学和注释第155页
        2 结果与分析第155-162页
            2.1 采后茶叶光照和遮荫萎凋处理中DEPs的鉴定与分析第155-158页
            2.2 茶树叶光照和遮荫萎凋处理DEPs的GO注释第158-160页
            2.3 茶树叶光照和遮荫萎凋处理DEPs的KEGG注释第160-161页
            2.4 茶树叶光照和遮荫萎凋处理蛋白-蛋白相互作用(PPI)第161-162页
        3 讨论第162-163页
            3.1 茶树叶光照和遮荫萎凋处理DEPs参与了光合作用和光合固碳第162页
            3.2 茶树叶光照和遮荫萎凋处理DEPs涉及到了茶叶儿茶素的合成第162-163页
全文结论第163-165页
本研究的创新点第165-167页
参考文献第167-191页
附录第191-211页
攻读博士学位期间发表及待发表论文第211-213页
致谢第213页

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