致谢 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
缩略词表 | 第12-18页 |
1 文献综述 | 第18-26页 |
1.1 柿概况 | 第18页 |
1.2 乙烯与果实成熟软化 | 第18-20页 |
1.2.1 乙烯概述 | 第18-19页 |
1.2.2 乙烯促进果实成熟与软化 | 第19-20页 |
1.3 细胞壁与果实质地软化 | 第20-23页 |
1.3.1 细胞壁组成结构的变化 | 第20-21页 |
1.3.2 细胞壁多糖物质的变化 | 第21页 |
1.3.3 细胞壁物质降解相关酶 | 第21-23页 |
1.4 转录因子与果实成熟软化 | 第23页 |
1.5 柿果实质地机理研究进展 | 第23-24页 |
1.6 研究目标和内容 | 第24-26页 |
2 材料与方法 | 第26-38页 |
2.1 实验材料、处理与生理指标测定 | 第26页 |
2.1.1 果实材料与处理方法 | 第26页 |
2.1.2 硬度测定 | 第26页 |
2.2 转录组分析 | 第26-27页 |
2.2.1 RNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.2 基因功能注释与差异表达基因 | 第27页 |
2.2.3 转录因子和细胞壁降解基因筛选 | 第27页 |
2.3 基因克隆 | 第27-29页 |
2.3.1 RNA的提取和cDNA的合成 | 第27页 |
2.3.2 基因全长与启动子克隆 | 第27-29页 |
2.4 实时荧光定量PCR | 第29-31页 |
2.5 烟草双荧光素酶试验(转录调控效应分析) | 第31-34页 |
2.6 亚细胞定位分析 | 第34-35页 |
2.7 酵母双杂交分析(蛋白互作) | 第35-36页 |
2.8 双分子荧光互补实验(蛋白互作) | 第36-37页 |
2.9 统计分析与作图 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-51页 |
3.1 乙烯处理后对'磨盘柿'果实硬度的影响 | 第38-39页 |
3.2 转录组测序分析 | 第39-41页 |
3.3 乙烯处理诱导的转录因子及细胞壁降解基因的筛选 | 第41-42页 |
3.4 受乙烯处理诱导的转录因子和细胞壁降解基因的全长克隆 | 第42页 |
3.5 实时定量PCR验证转录组结果 | 第42-43页 |
3.6 乙烯诱导的转录因子对相关靶标基因启动子的调控效应 | 第43-45页 |
3.7 受乙烯诱导的转录因子和细胞壁降解基因与脱涩后软化相关性分析 | 第45页 |
3.8 DkGATA3,DkHB4和DkNAC22的亚细胞定位分析 | 第45-46页 |
3.9 DkHB4,DkGATA3,DkWRKY12对DkXTH9启动子以及DKNAC22对DKPE9启动子的结合作用分析 | 第46-47页 |
3.10 DkHB4与激活型转录因子DkERFs的共同调控效应分析 | 第47-48页 |
3.11 酵母双杂分析DkHB4和DkERFs的蛋白互作关系 | 第48-49页 |
3.12 双分子荧光互补验证DkHB4和DkERF16的蛋白互作关系 | 第49-51页 |
4 讨论与小结 | 第51-55页 |
4.1 讨论 | 第51-54页 |
4.2 小结与展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-67页 |
作者学习经历及在学期间所取得的科研成果 | 第67页 |