| 致谢 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-37页 |
| 1 柑橘黄龙病的研究进展 | 第17-27页 |
| 1.1 柑橘黄龙病发生及分布 | 第18-19页 |
| 1.2 柑橘黄龙病症状 | 第19-20页 |
| 1.3 柑橘黄龙病的病原、病原寄主及病原传播 | 第20-22页 |
| 1.3.1 柑橘黄龙病的病原 | 第20-21页 |
| 1.3.2 柑橘黄龙病病原菌在柑橘叶片中的分布 | 第21页 |
| 1.3.3 柑橘黄龙病病原菌的寄主 | 第21-22页 |
| 1.3.4 柑橘黄龙病的传播 | 第22页 |
| 1.3.5 感染柑橘黄龙病后的病理变化 | 第22页 |
| 1.4 柑橘黄龙病的检测技术 | 第22-25页 |
| 1.4.1 田间和指示植物诊断 | 第22-23页 |
| 1.4.2 电镜检测 | 第23页 |
| 1.4.3 淀粉显色检测法 | 第23页 |
| 1.4.4 分子生物学检测 | 第23-24页 |
| 1.4.5 血清学检测 | 第24-25页 |
| 1.5 柑橘黄龙病防治措施 | 第25-27页 |
| 2 甘薯茎腐病研究进展 | 第27-32页 |
| 2.1 甘薯茎腐病国内外分布 | 第27页 |
| 2.2 甘薯茎腐病发病症状 | 第27-28页 |
| 2.3 甘薯茎腐病病原菌 | 第28-29页 |
| 2.4 病害传播和发病规律 | 第29页 |
| 2.5 甘薯茎腐病的检测方法 | 第29-31页 |
| 2.5.1 田间症状观察 | 第29-30页 |
| 2.5.2 病原细菌的分离培养和鉴定 | 第30页 |
| 2.5.3 分子检测 | 第30-31页 |
| 2.6 防控措施 | 第31-32页 |
| 2.6.1 农业防治 | 第31页 |
| 2.6.2 加强植物检疫 | 第31-32页 |
| 3 单克隆抗体技术及其在植物细菌病害检测中的应用 | 第32-36页 |
| 3.1 抗体的结构及特性 | 第32-33页 |
| 3.1.1 抗体的基本结构 | 第32页 |
| 3.1.2 抗体的精细结构 | 第32-33页 |
| 3.2 单克隆抗体技术 | 第33-34页 |
| 3.3 抗体在植物细菌病害检测中的应用 | 第34-36页 |
| 4 研究目的和意义 | 第36-37页 |
| 第二章 柑橘黄龙病菌单克隆抗体的制备及应用 | 第37-62页 |
| 1. 材料与方法 | 第37-47页 |
| 1.1 病叶及柑橘黄龙病菌鉴定 | 第37-39页 |
| 1.1.1 病叶来源 | 第37页 |
| 1.1.2 柑橘黄龙病菌鉴定 | 第37-39页 |
| 1.2 培养基、抗体及实验材料 | 第39-40页 |
| 1.3 免疫原的制备 | 第40页 |
| 1.4 单克隆抗体的制备 | 第40-42页 |
| 1.4.1 抗原免疫小鼠 | 第40页 |
| 1.4.2 细胞融合及筛选 | 第40-41页 |
| 1.4.3 杂交瘤细胞的单克隆化及扩增 | 第41页 |
| 1.4.4 杂交瘤细胞株的冻存和复苏 | 第41页 |
| 1.4.5 腹水抗体制备及纯化 | 第41-42页 |
| 1.4.6 腹水抗体效价的测定 | 第42页 |
| 1.4.7 单克隆抗体类型及亚类鉴定 | 第42页 |
| 1.5 Western blot分析单抗的特性 | 第42-44页 |
| 1.6 血清学方法的建立及特性分析 | 第44-47页 |
| 1.6.1 ACP-ELISA方法的建立及其特异性和灵敏度分析 | 第44-46页 |
| 1.6.2 dot-ELISA方法的建立及其特异性、广谱性和灵敏度分析 | 第46-47页 |
| 1.7 血清学方法的田间应用 | 第47页 |
| 2. 结果与分析 | 第47-60页 |
| 2.1 柑橘样品黄龙病菌的鉴定 | 第47-48页 |
| 2.2 细胞的融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆 | 第48页 |
| 2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定 | 第48-49页 |
| 2.4 Western blot分析黄龙病原菌单抗的特异性 | 第49-50页 |
| 2.5 检测柑橘黄龙病菌的ACP-ELISA方法的建立 | 第50-52页 |
| 2.5.1 检测柑橘黄龙病菌的ACP-ELISA方法的建立 | 第50页 |
| 2.5.2 ACP-ELISA方法和柑橘黄龙病菌单抗的特异性和广谱性分析 | 第50-51页 |
| 2.5.3 ACP-ELISA方法和单抗的灵敏度分析 | 第51-52页 |
| 2.6 dot-ELISA方法的建立及其特性分析 | 第52-58页 |
| 2.6.1 检测柑橘黄龙病菌的dot-ELISA方法的建立 | 第52页 |
| 2.6.2 dot-ELISA方法的特异性和广谱性分析 | 第52-53页 |
| 2.6.3 dot-ELISA方法的灵敏度分析 | 第53-56页 |
| 2.6.4 dot-ELISA方法的广谱性分析 | 第56-58页 |
| 2.7 血清学方法的田间应用 | 第58-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 第三章 甘薯茎腐病菌单克隆抗体的制备及其血清学方法 | 第62-76页 |
| 1 材料与方法 | 第62-66页 |
| 1.1 菌株 | 第62页 |
| 1.2 细胞培养基、抗体及实验材料 | 第62页 |
| 1.3 菌株培养 | 第62页 |
| 1.4 单克隆抗体的制备 | 第62-63页 |
| 1.4.1 免疫原的制备、小鼠免疫 | 第62-63页 |
| 1.4.2 细胞融合及筛选 | 第63页 |
| 1.4.3 杂交瘤细胞筛选及扩增 | 第63页 |
| 1.4.4 杂交瘤细胞株的冻存和复苏 | 第63页 |
| 1.4.5 腹水抗体制备及纯化 | 第63页 |
| 1.4.6 腹水抗体效价的测定 | 第63页 |
| 1.4.7 单克隆抗体类型及亚类鉴定 | 第63页 |
| 1.5 甘薯茎腐病菌多克隆抗体的制备 | 第63-64页 |
| 1.6 血清学方法的建立及特性分析 | 第64-66页 |
| 1.6.1 ACP-ELISA方法的建立 | 第64页 |
| 1.6.2 TAS-ELISA方法的建立 | 第64-65页 |
| 1.6.3 dot-ELISA和Tissue blot-ELISA方法的建立及其特异性和灵敏度分析 | 第65-66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-75页 |
| 2.1 杂交瘤细胞的筛选和克隆 | 第66页 |
| 2.2 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定 | 第66-67页 |
| 2.3 ACP-ELISA方法的建立及其特性分析 | 第67-69页 |
| 2.3.1 检测甘薯茎腐病菌的ACP-ELISA方法的建立 | 第67页 |
| 2.3.2 ACP-ELISA方法分析甘薯茎腐病菌单抗的特异性 | 第67-68页 |
| 2.3.3 ACP-ELISA方法的灵敏度分析 | 第68-69页 |
| 2.4 dot-ELISA和Tissue blot-ELISA方法的建立及其特性分析 | 第69-72页 |
| 2.4.1 检测甘薯茎腐病菌的dot-ELISA方法的建立 | 第69页 |
| 2.4.2 dot-ELISA方法的特异性分析 | 第69-70页 |
| 2.4.3 dot-ELISA方法的灵敏度分析 | 第70-71页 |
| 2.4.4 检测甘薯茎腐病菌的Tissue blot-ELISA方法的建立 | 第71页 |
| 2.4.5 Tissue blot-ELISA方法的特异性分析 | 第71-72页 |
| 2.5 TAS-ELISA方法的建立及其特异性和灵敏度 | 第72-75页 |
| 2.5.1 检测甘薯茎腐病菌的TAS-ELISA方法的建立与特异性分析 | 第72-74页 |
| 2.5.2 检测甘薯茎腐病菌的TAS-ELISA方法的灵敏度分析 | 第74-75页 |
| 3 讨论 | 第75-76页 |
| 全文总结 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-88页 |
| 附录A 生化试剂及分子生物学试剂 | 第88-89页 |
| 附录B 常用试剂提取配方及缓冲液、培养基配方 | 第89-91页 |
