摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 前言 | 第7-18页 |
1.1 肝癌HCC | 第7-9页 |
1.1.1 肝癌HCC | 第7页 |
1.1.2 HCC临床分期 | 第7-8页 |
1.1.3 肝癌临床治疗现状 | 第8-9页 |
1.2 microRNA与表观遗传 | 第9-13页 |
1.2.1 microRNA的定义 | 第9-10页 |
1.2.2 microRNA在肿瘤发生和发展中的作用 | 第10-11页 |
1.2.3 microRNA的研究策略 | 第11-12页 |
1.2.4 microRNA的筛选方法 | 第12-13页 |
1.3 本研究的目的与意义 | 第13-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-32页 |
2.1 实验材料 | 第18-20页 |
2.1.1 仪器 | 第18页 |
2.1.2 耗材 | 第18-19页 |
2.1.3 试剂 | 第19-20页 |
2.2 组织样本收集 | 第20页 |
2.3 细胞系 | 第20页 |
2.4 细胞培养 | 第20-21页 |
2.4.1 细胞复苏 | 第20页 |
2.4.2 细胞传代 | 第20-21页 |
2.4.3 细胞冻存 | 第21页 |
2.5 RNA提取及实时定量RT PCR | 第21-23页 |
2.5.1 提取RNA | 第21-22页 |
2.5.2 RT-PCR | 第22-23页 |
2.6 蛋白质免疫印迹 | 第23-27页 |
2.6.1. 收集蛋白样品 | 第23-25页 |
2.6.2. 电泳(Electrophoresis) | 第25-26页 |
2.6.3. 转膜(Transfer) | 第26页 |
2.6.4. 封闭(Blocking) | 第26页 |
2.6.5.蛋白质免疫处理 | 第26页 |
2.6.6. 曝光 | 第26-27页 |
2.7 细胞转染步骤 | 第27-29页 |
2.7.1 mimics转染 | 第27页 |
2.7.2 siRNA转染 | 第27-29页 |
2.8 细胞增殖检测MTT | 第29页 |
2.9 细胞侵袭检测 | 第29-30页 |
2.10 荧光报告基因分析 | 第30页 |
2.11 免疫组织化学分析 | 第30-31页 |
2.12 数据分析 | 第31-32页 |
第三章 结果 | 第32-41页 |
3.1 miR-320a在肝癌组织和细胞系中低表达 | 第32-33页 |
3.2 c-Myc包含两段靶向MiR-320a的序列 | 第33-34页 |
3.3 c-Myc是miR-320a在肝癌中的靶向基因 | 第34-36页 |
3.4 C-Myc的表达受到miR-320a调控 | 第36-38页 |
3.5 miR-320a通过靶向c-Myc表达抑制肝癌细胞的增殖和侵袭 | 第38-41页 |
第四章 讨论 | 第41-44页 |
第五章 结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-55页 |
攻读硕士期间完成的科研成果 | 第55-57页 |
致谢 | 第57页 |