摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第12-18页 |
1.1 胃癌的概述 | 第12-13页 |
1.2 LncRNA的简介 | 第13-14页 |
1.3 LncRNA-ROR目前研究进展 | 第14-16页 |
1.3.1 ROR的发现 | 第14-15页 |
1.3.2 ROR的功能及其机制 | 第15-16页 |
1.4 实验设计 | 第16-18页 |
第二章 材料和方法 | 第18-46页 |
2.1 材料 | 第18-30页 |
2.1.1 组织样本及其临床资料 | 第18-21页 |
2.1.2 胃癌细胞株 | 第21页 |
2.1.3 慢病毒载体信息 | 第21-22页 |
2.1.4 引物序列 | 第22-23页 |
2.1.5 实验主要试剂 | 第23-26页 |
2.1.6 实验溶液及配置方法 | 第26-27页 |
2.1.7 实验耗材及仪器设备 | 第27-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-46页 |
2.2.1 总RNA的提取及鉴定 | 第30-31页 |
2.2.2 逆转录反应 | 第31-32页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR | 第32-33页 |
2.2.4 细胞培养及细胞计数 | 第33-35页 |
2.2.5 构建慢病毒重组质粒 | 第35-36页 |
2.2.6 细胞转染及筛选 | 第36-39页 |
2.2.7 CCK-8实验 | 第39页 |
2.2.8 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第39-40页 |
2.2.9 Transwell侵袭、迁移实验 | 第40页 |
2.2.10 蛋白质免疫印迹实验(Western Blotting) | 第40-45页 |
2.2.11 统计分析 | 第45-46页 |
第三章 实验结果与分析 | 第46-64页 |
3.1 ROR在胃癌组织中的表达情况 | 第46-50页 |
3.1.1 qRT-PCR检测胃癌及其配对正常组织中ROR的表达情况 | 第46-48页 |
3.1.2 ROR在各组中的表达差异 | 第48-49页 |
3.1.3 65例胃癌样本中ROR的总体表达差异 | 第49-50页 |
3.2 ROR的表达与胃癌临床病理特征的相关性分析 | 第50-51页 |
3.3 构建稳定敲减ROR的胃癌细胞株 | 第51-55页 |
3.3.1 ROR在胃癌细胞株中的表达情况 | 第51-52页 |
3.3.2 shRNA的构建以及干扰载体的选取 | 第52-53页 |
3.3.3 构建ROR敲减的胃癌细胞株MGC-803、SGC-7901 | 第53-55页 |
3.4 CCK-8实验探究抑制ROR的表达对胃癌细胞以及裸鼠移植瘤增殖能力的影响 | 第55-57页 |
3.5 Transwell实验探究抑制ROR的表达对胃癌细胞迁移能力的影响 | 第57-58页 |
3.6 Transwell实验探究抑制ROR的表达对胃癌细胞侵袭能力的影响 | 第58-59页 |
3.7 流式细胞术探究抑制ROR的表达对胃癌细胞凋亡能力的影响 | 第59-61页 |
3.8 Western blotting实验证明ROR可能是通过AKT信号通路影响EMT进程从而抑制胃癌细胞的迁移 | 第61-64页 |
第四章 讨论 | 第64-69页 |
第五章 结论 | 第69-70页 |
研究成果 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
中英文缩略词表 | 第76-78页 |
致谢 | 第78页 |