摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1.前言 | 第10-19页 |
1.1 相关概念及定义 | 第11-14页 |
1.1.1 心力衰竭 | 第11页 |
1.1.2 有氧运动 | 第11-12页 |
1.1.3 线粒体能量代谢 | 第12页 |
1.1.4 microRNA(miRNA)及其作用机理 | 第12-14页 |
1.2 国内外研究现状 | 第14-19页 |
1.2.1 有氧运动对于心力衰竭有显著的干预效果。 | 第14-15页 |
1.2.2 有氧运动对心力衰竭的干预与线粒体能量代谢功能相关 | 第15-16页 |
1.2.3 miRNA对心力衰竭中线粒体能量代谢的影响 | 第16-17页 |
1.2.4 mitomiRs对线粒体能量代谢的影响 | 第17-18页 |
1.2.5 mitomiRs对心血管疾病的影响 | 第18-19页 |
2.实验材料及研究方法 | 第19-35页 |
2.1 实验动物及饲养条件 | 第20-21页 |
2.2 仪器与设备 | 第21-22页 |
2.3 主要试剂 | 第22-23页 |
2.4 主要试剂的配制方法 | 第23-24页 |
2.5 动物模型的制备及分组 | 第24-25页 |
2.5.1 腹主动脉缩窄手术方案 | 第24-25页 |
2.5.2 假手术方案 | 第25页 |
2.5.3 有氧运动干预方案 | 第25页 |
2.5.4 动物分组 | 第25页 |
2.6 实验动物心脏结构与功能检测 | 第25-26页 |
2.7 模型动物的处死及取材 | 第26页 |
2.8 粗制线粒体的制备 | 第26页 |
2.9 超纯线粒体的制备 | 第26-27页 |
2.10 线粒体总RNA的制备 | 第27页 |
2.11 心肌总RNA的制备 | 第27-28页 |
2.12 细胞总RNA的制备 | 第28页 |
2.13 miRNA高通量测序 | 第28-29页 |
2.14 生物信息分析各组大鼠miRNA测序结果 | 第29-30页 |
2.14.1 known miRNA分析 | 第30页 |
2.14.2 novel miRNA分析 | 第30页 |
2.15 蛋白免疫印迹检测 | 第30-34页 |
2.16 RT-qPCR验证候选miRNA | 第34-35页 |
2.17 数据统计 | 第35页 |
3.实验结果与分析 | 第35-83页 |
3.1 以腹主动脉缩窄术成功建立压力后负荷过载的动物模型 | 第35-38页 |
3.2 有氧运动干预显著改善心衰大鼠的心脏功能 | 第38-40页 |
3.3 有氧运动改变定位在线粒体内的miRNA的表达谱 | 第40-81页 |
3.3.1 超纯线粒体的质量控制 | 第40-43页 |
3.3.2 known miRNA的生物信息学分析 | 第43-45页 |
3.3.3 novel miRNA的生物信息学分析 | 第45-81页 |
3.4 候选的novel miRNA在H9C2细胞中的鉴定 | 第81-83页 |
3.4.1 引物的设计 | 第81-83页 |
3.4.2 候选miRNA在大鼠心肌细胞H9C2中的表达丰度。 | 第83页 |
4.分析与讨论 | 第83-85页 |
4.1 超纯线粒体的制备 | 第83页 |
4.2 建库方式选择 | 第83-84页 |
4.3 高通量测序中known miRNA的筛选 | 第84页 |
4.4 高通量测序中novel miRNA的筛选 | 第84-85页 |
4.5 RT-qPCR验证候选novel miRNA | 第85页 |
5.结论与建议 | 第85-87页 |
5.1 结论 | 第85-86页 |
5.2 建议 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
研究生个人简历 | 第92页 |