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有氧运动对心衰大鼠的干预与线粒体定位的miRNA的关系初探

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
1.前言第10-19页
    1.1 相关概念及定义第11-14页
        1.1.1 心力衰竭第11页
        1.1.2 有氧运动第11-12页
        1.1.3 线粒体能量代谢第12页
        1.1.4 microRNA(miRNA)及其作用机理第12-14页
    1.2 国内外研究现状第14-19页
        1.2.1 有氧运动对于心力衰竭有显著的干预效果。第14-15页
        1.2.2 有氧运动对心力衰竭的干预与线粒体能量代谢功能相关第15-16页
        1.2.3 miRNA对心力衰竭中线粒体能量代谢的影响第16-17页
        1.2.4 mitomiRs对线粒体能量代谢的影响第17-18页
        1.2.5 mitomiRs对心血管疾病的影响第18-19页
2.实验材料及研究方法第19-35页
    2.1 实验动物及饲养条件第20-21页
    2.2 仪器与设备第21-22页
    2.3 主要试剂第22-23页
    2.4 主要试剂的配制方法第23-24页
    2.5 动物模型的制备及分组第24-25页
        2.5.1 腹主动脉缩窄手术方案第24-25页
        2.5.2 假手术方案第25页
        2.5.3 有氧运动干预方案第25页
        2.5.4 动物分组第25页
    2.6 实验动物心脏结构与功能检测第25-26页
    2.7 模型动物的处死及取材第26页
    2.8 粗制线粒体的制备第26页
    2.9 超纯线粒体的制备第26-27页
    2.10 线粒体总RNA的制备第27页
    2.11 心肌总RNA的制备第27-28页
    2.12 细胞总RNA的制备第28页
    2.13 miRNA高通量测序第28-29页
    2.14 生物信息分析各组大鼠miRNA测序结果第29-30页
        2.14.1 known miRNA分析第30页
        2.14.2 novel miRNA分析第30页
    2.15 蛋白免疫印迹检测第30-34页
    2.16 RT-qPCR验证候选miRNA第34-35页
    2.17 数据统计第35页
3.实验结果与分析第35-83页
    3.1 以腹主动脉缩窄术成功建立压力后负荷过载的动物模型第35-38页
    3.2 有氧运动干预显著改善心衰大鼠的心脏功能第38-40页
    3.3 有氧运动改变定位在线粒体内的miRNA的表达谱第40-81页
        3.3.1 超纯线粒体的质量控制第40-43页
        3.3.2 known miRNA的生物信息学分析第43-45页
        3.3.3 novel miRNA的生物信息学分析第45-81页
    3.4 候选的novel miRNA在H9C2细胞中的鉴定第81-83页
        3.4.1 引物的设计第81-83页
        3.4.2 候选miRNA在大鼠心肌细胞H9C2中的表达丰度。第83页
4.分析与讨论第83-85页
    4.1 超纯线粒体的制备第83页
    4.2 建库方式选择第83-84页
    4.3 高通量测序中known miRNA的筛选第84页
    4.4 高通量测序中novel miRNA的筛选第84-85页
    4.5 RT-qPCR验证候选novel miRNA第85页
5.结论与建议第85-87页
    5.1 结论第85-86页
    5.2 建议第86-87页
参考文献第87-91页
致谢第91-92页
研究生个人简历第92页

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