| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 英文缩略词及中英文对照表 | 第6-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-29页 |
| 1.1 黄瓜氮素营养研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2 土壤硝态氮的有效性 | 第13页 |
| 1.3 植物硝态氮吸收与转运的生理机制 | 第13-17页 |
| 1.3.1 硝态氮的跨膜运输 | 第13-15页 |
| 1.3.2 硝态氮的转运系统 | 第15-17页 |
| 1.4 植物硝态氮转运系统的调控机制 | 第17-18页 |
| 1.5 植物硝态氮吸收和转运的分子机制 | 第18-24页 |
| 1.5.1 低亲和硝态氮转运蛋白基因家族NRT1 | 第19-23页 |
| 1.5.2 高亲和硝酸盐转运蛋白基因家族NRT2 | 第23-24页 |
| 1.6 硝态氮对植物根系发育的调控 | 第24-27页 |
| 1.6.1 根系的觅食行为 | 第24-25页 |
| 1.6.2 均匀硝态氮供给对根系的调控 | 第25-26页 |
| 1.6.3 非均匀硝态氮供给对根系发育的影响 | 第26-27页 |
| 1.7 研究意义、目的和内容 | 第27-29页 |
| 第二章 黄瓜高亲和硝酸盐转运蛋白基因(CsNRT2.1)的克隆与表达分析 | 第29-50页 |
| 2.1 试验材料 | 第29-31页 |
| 2.1.1 植物材料与培养条件 | 第29-30页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第30页 |
| 2.1.3 化学试剂及酶 | 第30-31页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第31页 |
| 2.2 试验方法 | 第31-39页 |
| 2.2.1 基因克隆 | 第31-35页 |
| 2.2.2 序列分析与进化树构建 | 第35页 |
| 2.2.3 GUS染色 | 第35-38页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qRT-PCR) | 第38-39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-49页 |
| 2.3.1 黄瓜高亲和硝酸盐转运蛋白(CsNRT2.1)基因序列的克隆及分析 | 第39-44页 |
| 2.3.2 黄瓜高亲和硝酸盐转运蛋白基因(CsNRT2.1)的时空表达分析 | 第44-46页 |
| 2.3.3 CsNRT2.1基因的GUS组织化学定位 | 第46页 |
| 2.3.4 黄瓜CsNRT2.1表达量对不同氮素有效性的响应 | 第46-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-50页 |
| 第三章 黄瓜高亲和硝酸盐转运蛋白(CsNRT2.1)组织化学与亚细胞定位 | 第50-58页 |
| 3.1 材料与方法 | 第50-54页 |
| 3.1.1 植物材料与质粒载体 | 第50页 |
| 3.1.2 酶及化学试剂 | 第50页 |
| 3.1.3 GFP表达载体的构建 | 第50-51页 |
| 3.1.4 CsNRT2.1-GFP重组质粒转化烟草表皮细胞 | 第51-52页 |
| 3.1.5 CsNRT2.1-GFP融合蛋白在拟南芥原生质体的瞬时表达 | 第52-53页 |
| 3.1.6 免疫组织化学定位 | 第53-54页 |
| 3.2 结果与分析 | 第54-57页 |
| 3.2.1 CsNRT2.1的亚细胞定位 | 第54-55页 |
| 3.2.2 CsNRT2.1的组织化学定位 | 第55-57页 |
| 3.3 讨论 | 第57-58页 |
| 第四章 黄瓜高亲和硝酸盐转运蛋白(CsNRT2.1)的生物学功能分析 | 第58-72页 |
| 4.1 材料与方法 | 第58-63页 |
| 4.1.1 植物材料与菌株 | 第58页 |
| 4.1.2 酶和试剂 | 第58页 |
| 4.1.3 仪器和设备 | 第58页 |
| 4.1.4 CsNRT2.1-RNAi干扰载体的构建 | 第58-59页 |
| 4.1.5 RNA干扰载体转基因黄瓜株系的遗传转化 | 第59页 |
| 4.1.6 黄瓜干扰株系的鉴定 | 第59-60页 |
| 4.1.7 黄瓜NRT1s和NRT2s家族基因的表达量 | 第60-61页 |
| 4.1.8 ~(15)N质谱测定和黄瓜幼苗NO_3~-吸收速率测定 | 第61页 |
| 4.1.9 根系形态测定 | 第61-62页 |
| 4.1.10 数据分析 | 第62-63页 |
| 4.2 结果与分析 | 第63-70页 |
| 4.2.1 CsNRT2.1-RNAi干扰转基因株系的获得 | 第63页 |
| 4.2.2 CsNRT2.1-RNAi转基因黄瓜的PCR和qRT-PCR鉴定 | 第63-65页 |
| 4.2.3 黄瓜高亲和硝酸盐转运蛋白CsNRT2.1在NO_3~-吸收中的作用 | 第65-68页 |
| 4.2.4 下调CsNRT2.1的表达对低N条件下黄瓜幼苗根系构型的影响 | 第68-70页 |
| 4.3 讨论 | 第70-72页 |
| 第五章 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 个人简历 | 第91页 |
