摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
1.前言 | 第12-21页 |
1.1 文献综述 | 第13-20页 |
1.1.1 植物花香研究进展 | 第13-14页 |
1.1.2 蜡梅花香研究进展 | 第14-16页 |
1.1.3 花香挥发物的检测手段研究进展 | 第16页 |
1.1.4 植物苯环类花香挥发物的合成途径 | 第16-18页 |
1.1.5 植物BAHD酰基转移酶家族研究进展 | 第18-20页 |
1.1.6 BEAT研究进展 | 第20页 |
1.2 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
2.不同株系的蜡梅花香成分苯甲醇和乙酸苄酯含量的测定 | 第21-26页 |
2.1 前言 | 第21页 |
2.2 实验材料 | 第21-22页 |
2.3 实验方法 | 第22-24页 |
2.3.1 蜡梅H93株系不同时期取样 | 第22-23页 |
2.3.2 筛选最佳浓度的内标溶液 | 第23页 |
2.3.3 HS-SPME取样 | 第23页 |
2.3.4 GC-MS分析 | 第23-24页 |
2.3.5 苯甲醇和乙酸苄酯分析方法 | 第24页 |
2.4 结果与分析 | 第24-26页 |
2.5 讨论 | 第26页 |
3.蜡梅CpBEAT5、CpBEAT8基因的克隆与分析 | 第26-43页 |
3.1 前言 | 第26-27页 |
3.2 实验材料 | 第27页 |
3.3 实验方法 | 第27-30页 |
3.3.1 H93和SW001蜡梅株系基因组DNA的提取 | 第27页 |
3.3.2 蜡梅不同花期花瓣总RNA的提取和检测 | 第27页 |
3.3.3 蜡梅花cDNA的合成和检测 | 第27-29页 |
3.3.4 引物的设计 | 第29页 |
3.3.5 反应体系和反应程序 | 第29-30页 |
3.3.6 目的片段回收 | 第30页 |
3.3.7 构建克隆载体 | 第30页 |
3.3.8 序列分析 | 第30页 |
3.4 实验结果与分析 | 第30-43页 |
3.4.1 蜡梅基因组总DNA的获得 | 第30-31页 |
3.4.2 蜡梅花朵RNA质量检测 | 第31-32页 |
3.4.3 蜡梅花朵cDNA质量检测 | 第32页 |
3.4.4 CpBEAT5和CpBEAT8基因cDNA、gDNA的获得及序列分析 | 第32-43页 |
3.5 讨论 | 第43页 |
4.蜡梅CpBEAT5、CpBEAT8基因不同花期表达量分析 | 第43-47页 |
4.1 前言 | 第43页 |
4.2 实验材料 | 第43-44页 |
4.3 实验方法 | 第44-45页 |
4.4 结果与分析 | 第45-46页 |
4.5 讨论 | 第46-47页 |
5.蜡梅CpBEAT5、CpBEAT8启动子的克隆与分析 | 第47-52页 |
5.1 前言 | 第47页 |
5.2 实验材料 | 第47页 |
5.3 实验方法 | 第47-48页 |
5.3.1 引物的设计 | 第47-48页 |
5.3.2 反应体系和反应程序 | 第48页 |
5.3.3 序列分析 | 第48页 |
5.4 实验结果与分析 | 第48-52页 |
5.5 讨论 | 第52页 |
6.CpBEAT5和CpBEAT8基因植物超量表达载体的构建及烟草的遗传转化 | 第52-64页 |
6.1 前言 | 第52-53页 |
6.2 实验材料 | 第53页 |
6.3 实验方法 | 第53-57页 |
6.3.1 目的片段加特异性酶切位点 | 第53-54页 |
6.3.2 pCAMBIA2300质粒的提取 | 第54页 |
6.3.3 构建CpBEAT5和CpBEAT8重组质粒 | 第54-55页 |
6.3.4 CpBEAT5、CpBEAT8与pCAMBIA2300重组 | 第55-56页 |
6.3.5 CpBEAT5、CpBEAT8重组质粒转化EHA105农杆菌 | 第56页 |
6.3.6 农杆菌介导法转化烟草 | 第56-57页 |
6.3.7 CpBEAT5、CpBEAT8基因超量表达早花烟草花香挥发物测定 | 第57页 |
6.4 结果与分析 | 第57-64页 |
6.4.1 构建CpBEAT5、CpBEAT8超量表达载体 | 第57-59页 |
6.4.2 CpBEAT5、CpBEAT8重组质粒转化农杆菌 | 第59-60页 |
6.4.3 农杆菌EHA105转化早花烟草 | 第60页 |
6.4.4 转基因烟草阳性植株检测 | 第60-62页 |
6.4.5 烟草花香挥发物成分测定 | 第62-64页 |
6.5 讨论 | 第64页 |
7.展望 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
附录 | 第73-79页 |
致谢 | 第79页 |