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蜡梅花香相关基因BEAT的克隆和功能初步探究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略语表第11-12页
1.前言第12-21页
    1.1 文献综述第13-20页
        1.1.1 植物花香研究进展第13-14页
        1.1.2 蜡梅花香研究进展第14-16页
        1.1.3 花香挥发物的检测手段研究进展第16页
        1.1.4 植物苯环类花香挥发物的合成途径第16-18页
        1.1.5 植物BAHD酰基转移酶家族研究进展第18-20页
        1.1.6 BEAT研究进展第20页
    1.2 研究的目的与意义第20-21页
2.不同株系的蜡梅花香成分苯甲醇和乙酸苄酯含量的测定第21-26页
    2.1 前言第21页
    2.2 实验材料第21-22页
    2.3 实验方法第22-24页
        2.3.1 蜡梅H93株系不同时期取样第22-23页
        2.3.2 筛选最佳浓度的内标溶液第23页
        2.3.3 HS-SPME取样第23页
        2.3.4 GC-MS分析第23-24页
        2.3.5 苯甲醇和乙酸苄酯分析方法第24页
    2.4 结果与分析第24-26页
    2.5 讨论第26页
3.蜡梅CpBEAT5、CpBEAT8基因的克隆与分析第26-43页
    3.1 前言第26-27页
    3.2 实验材料第27页
    3.3 实验方法第27-30页
        3.3.1 H93和SW001蜡梅株系基因组DNA的提取第27页
        3.3.2 蜡梅不同花期花瓣总RNA的提取和检测第27页
        3.3.3 蜡梅花cDNA的合成和检测第27-29页
        3.3.4 引物的设计第29页
        3.3.5 反应体系和反应程序第29-30页
        3.3.6 目的片段回收第30页
        3.3.7 构建克隆载体第30页
        3.3.8 序列分析第30页
    3.4 实验结果与分析第30-43页
        3.4.1 蜡梅基因组总DNA的获得第30-31页
        3.4.2 蜡梅花朵RNA质量检测第31-32页
        3.4.3 蜡梅花朵cDNA质量检测第32页
        3.4.4 CpBEAT5和CpBEAT8基因cDNA、gDNA的获得及序列分析第32-43页
    3.5 讨论第43页
4.蜡梅CpBEAT5、CpBEAT8基因不同花期表达量分析第43-47页
    4.1 前言第43页
    4.2 实验材料第43-44页
    4.3 实验方法第44-45页
    4.4 结果与分析第45-46页
    4.5 讨论第46-47页
5.蜡梅CpBEAT5、CpBEAT8启动子的克隆与分析第47-52页
    5.1 前言第47页
    5.2 实验材料第47页
    5.3 实验方法第47-48页
        5.3.1 引物的设计第47-48页
        5.3.2 反应体系和反应程序第48页
        5.3.3 序列分析第48页
    5.4 实验结果与分析第48-52页
    5.5 讨论第52页
6.CpBEAT5和CpBEAT8基因植物超量表达载体的构建及烟草的遗传转化第52-64页
    6.1 前言第52-53页
    6.2 实验材料第53页
    6.3 实验方法第53-57页
        6.3.1 目的片段加特异性酶切位点第53-54页
        6.3.2 pCAMBIA2300质粒的提取第54页
        6.3.3 构建CpBEAT5和CpBEAT8重组质粒第54-55页
        6.3.4 CpBEAT5、CpBEAT8与pCAMBIA2300重组第55-56页
        6.3.5 CpBEAT5、CpBEAT8重组质粒转化EHA105农杆菌第56页
        6.3.6 农杆菌介导法转化烟草第56-57页
        6.3.7 CpBEAT5、CpBEAT8基因超量表达早花烟草花香挥发物测定第57页
    6.4 结果与分析第57-64页
        6.4.1 构建CpBEAT5、CpBEAT8超量表达载体第57-59页
        6.4.2 CpBEAT5、CpBEAT8重组质粒转化农杆菌第59-60页
        6.4.3 农杆菌EHA105转化早花烟草第60页
        6.4.4 转基因烟草阳性植株检测第60-62页
        6.4.5 烟草花香挥发物成分测定第62-64页
    6.5 讨论第64页
7.展望第64-66页
参考文献第66-73页
附录第73-79页
致谢第79页

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