| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 课题的提出 | 第11-12页 |
| 1.2 文献综述 | 第12-16页 |
| 1.2.1 WRKY转录因子 | 第12-15页 |
| 1.2.2 低温胁迫对植物的影响 | 第15-16页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-29页 |
| 2.1 西瓜ClWRKY转录因子家族鉴定及特征分析 | 第17-19页 |
| 2.1.1 西瓜ClWRKY转录因子家族鉴定 | 第17页 |
| 2.1.2 西瓜ClWRKY蛋白保守结构域序列分析及系统发育树构建 | 第17-18页 |
| 2.1.3 西瓜ClWRKY家族基因结构分析 | 第18页 |
| 2.1.4 西瓜ClWRKY家族基因的共线性分析 | 第18-19页 |
| 2.2 西瓜ClWKRY转录因子家族基因表达谱分析 | 第19页 |
| 2.2.1 西瓜ClWRKY家族基因在果实发育中的表达分析(RNA-seq) | 第19页 |
| 2.2.2 西瓜ClWRKY对低温胁迫的响应分析(RNA-seq) | 第19页 |
| 2.3 ClWRKY20和ClWRKY55亚细胞定位分析 | 第19-22页 |
| 2.3.1 植物材料 | 第19-20页 |
| 2.3.2 亚细胞定位载体构建 | 第20-21页 |
| 2.3.3 重组载体转化农杆菌 | 第21页 |
| 2.3.4 注射侵染及表皮细胞观测 | 第21-22页 |
| 2.4 烟草遗传转化 | 第22-25页 |
| 2.4.1 植物材料 | 第22页 |
| 2.4.2 超表达载体构建 | 第22-23页 |
| 2.4.3 转化农杆菌LBA4404感受态 | 第23页 |
| 2.4.4 叶盘法转化栽培烟草 | 第23-24页 |
| 2.4.5 T0代转基因烟草阳性鉴定和表达量鉴定 | 第24-25页 |
| 2.5 转基因烟草植株的低温耐受性鉴定 | 第25-29页 |
| 2.5.1 植物材料培养及低温处理 | 第25页 |
| 2.5.2 冷害指数的测定 | 第25-26页 |
| 2.5.3 相对电导率的测定 | 第26页 |
| 2.5.4 丙二醛(MDA)含量的测定 | 第26-27页 |
| 2.5.5 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定 | 第27页 |
| 2.5.6 过氧化物酶(POD)活性的测定 | 第27页 |
| 2.5.7 过氧化氢酶(CAT)活性的测定 | 第27-28页 |
| 2.5.8 低温耐受性相关指标的统计分析与绘图 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-57页 |
| 3.1 西瓜ClWRKY转录因子家族鉴定及特征分析 | 第29-45页 |
| 3.1.1 西瓜ClWRKY转录因子家族成员鉴定 | 第29-33页 |
| 3.1.2 西瓜ClWRKY蛋白结构域序列比对及系统发生关系分析 | 第33-36页 |
| 3.1.3 西瓜ClWRKY转录因子家族基因结构分析 | 第36-38页 |
| 3.1.4 西瓜ClWRKY家族基因复制事件分析 | 第38-40页 |
| 3.1.5 ClWRKY家族基因在西瓜果实发育过程中的表达分析 | 第40-45页 |
| 3.2 ClWRKY家族基因在低温下的表达谱分析 | 第45-46页 |
| 3.3 ClWRKY20和ClWRKY55亚细胞定位分析 | 第46-47页 |
| 3.4 ClWRKY20和ClWRKY55超表达烟草植株获取 | 第47-48页 |
| 3.5 转基因烟草的低温耐受性分析 | 第48-57页 |
| 3.5.1 ClWRKY20对转基因植株低温耐受性的影响 | 第48-53页 |
| 3.5.2 ClWRKY55对转基因植株低温耐受性的影响 | 第53-57页 |
| 4 讨论 | 第57-62页 |
| 4.1 西瓜ClWRKY转录因子家族的特征 | 第57-59页 |
| 4.2 西瓜ClWRKY转录因子家族基因的表达差异 | 第59-60页 |
| 4.3 西瓜ClWRKY20和ClWRKY55的功能差异 | 第60-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录Ⅰ：亚细胞定位pH7LIC5.0-N-eGFP载体 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
