中国卤虫革兰氏阴性菌结合蛋白在早期胚胎发育中的表达及抗菌机制的研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1. 前言 | 第8-18页 |
| ·卤虫的研究概述 | 第8-14页 |
| ·卤虫的形态和习性及地理分布 | 第8-9页 |
| ·卤虫分类地位及经济价值 | 第9-11页 |
| ·卤虫胚胎发育过程及生活史 | 第11-12页 |
| ·卤虫胚胎发育相关基因研究进展 | 第12-13页 |
| ·卤虫免疫基因研究进展 | 第13-14页 |
| ·GNBP 基因相关研究展 | 第14-18页 |
| ·模式识别受体及无脊椎动物先天免疫应答 | 第14-16页 |
| ·GNBP 的结构和功能研究展 | 第16-18页 |
| 2. 材料与方法 | 第18-28页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·卤虫孵化及培养条件 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-20页 |
| ·总RNA提取及纯化试剂 | 第18页 |
| ·反转录相关试剂 | 第18页 |
| ·PCR试剂 | 第18页 |
| ·核酸电泳试剂 | 第18-19页 |
| ·PCR产物纯化试剂 | 第19页 |
| ·克隆用试剂 | 第19页 |
| ·real time PCR试剂 | 第19页 |
| ·整体免疫组化所需药品及试剂 | 第19-20页 |
| ·PH 调节用试剂 | 第20页 |
| ·仪器与设备 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-28页 |
| ·卤虫的饲养 | 第20-21页 |
| ·整体免疫组织化学 | 第21页 |
| ·卤虫总RNA 提取 | 第21-22页 |
| ·反转录合成cDNA | 第22-23页 |
| ·调取部分目的基因并测序 | 第23-26页 |
| ·GNBP 基因引物设计及PCR 扩增 | 第23页 |
| ·PCR产物检测 | 第23-24页 |
| ·回收目的片段 | 第24-25页 |
| ·目的片段克隆 | 第25页 |
| ·目的片段的测序 | 第25-26页 |
| ·GNBP 基因全序列的获得 | 第26页 |
| ·卤虫菌刺激实验 | 第26-27页 |
| ·血球计数板计数 | 第26-27页 |
| ·菌液梯度稀释并菌刺激 | 第27页 |
| ·实时定量PCR | 第27-28页 |
| ·real time PCR 引物设计 | 第27页 |
| ·real time PCR 反应体系及条件 | 第27-28页 |
| 3. 结果 | 第28-40页 |
| ·总RNA提取质量 | 第28页 |
| ·GNBP 部分序列 | 第28-29页 |
| ·GNBP 基因全长 | 第29-30页 |
| ·GNBP 基因信息学分析 | 第30-32页 |
| ·GNBP 在卤虫不同发育时期的表达 | 第32-40页 |
| ·免疫组化结果 | 第32-34页 |
| ·real time PCR分析结果 | 第34-40页 |
| 4. 讨论 | 第40-45页 |
| ·中国卤虫GNBP 基因的序列及功能分析 | 第40-41页 |
| ·中国卤虫GNBP 基因的表达分析 | 第41-42页 |
| ·中国卤虫抗菌机制的研究 | 第42-43页 |
| ·实验条件的优化 | 第43-45页 |
| ·卤虫RNA 提取及反转录方法的优化 | 第43页 |
| ·PCR 及real time PCR反应的优化 | 第43-45页 |
| ·普通PCR 反应实验条件优化 | 第43-44页 |
| ·real time PCR 反应的条件优化 | 第44页 |
| ·整体免疫组化实验优化 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
